【正文】 中，精密加入溶劑10m1計算全量。④為了消除其它組分干擾，采用導(dǎo)數(shù)光譜或二波長，三波長等方法測定單一或大類成分，僅可用于藥味較少的制劑，其空白試驗取多批次樣品測定，結(jié)果一致才可采用。5含量限度的制定 含量限度是在檢驗方法確定的基礎(chǔ)上，積累足夠的數(shù)據(jù)后總結(jié)提出的。一種是規(guī)定下限，如藥典中收裁戊己九，%，六味地黃丸，山茱萸中熊果酸、%、%（大蜜九）；種是規(guī)定幅度，如部頌標(biāo)推進口西洋參藥材含人參總皂為5～10%，含西洋參制劑則應(yīng)根據(jù)處方量及工藝制相關(guān)數(shù)值規(guī)定制劑含量幅度；另一種為規(guī)定標(biāo)示量，如2005版藥典中收載華山參片，～%。而有關(guān)檢定該藥真?zhèn)蝺?yōu)劣各項均應(yīng)重點詳細說明。22 / 22。對質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中各項均應(yīng)作逐項說明。新藥申報生產(chǎn)時應(yīng)積累10批以上的含量數(shù)據(jù)，提出限度。如測定人參總皂苷，以人參皂苷Rbl、Re等作對照品并計算。由于處方原料不相同，工藝未知，配制出的背景空白不可能條件相同，吸收值差異較大，故此方法無推廣價值。4含量測定方法實驗設(shè)計中應(yīng)注意的幾個問題（1）提取問題 對含藥材原粉的制劑，如采用取部分提取液的測定方法，不宜將樣品粉末直接置容量瓶中定容，因為中藥含量測定的取樣量往往較大，且藥粉不溶于水，其固體體積不可忽視。此法理論值較準(zhǔn)確，但其不足是缺少成藥中被測藥材本身的雜質(zhì)干擾條件，模擬真實性差，特別是被測藥材組分復(fù)雜，如人參被測成分為人參皂苷Re、因與該成分共存的同系物或類同成分人參皂苷較多，其自身分離度重現(xiàn)性差，而只以加入純品測定回收率，與人參皂苷Re的干擾情況則無從反映。用實測值與原樣品中含測成分之差，除以加入純品量計算回收率。5），計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），一般要求低于5%。（5）樣品濃度與響應(yīng)值樣品濃度與吸收度或色譜峰面積（或峰高）之間的線性關(guān)系考察、即標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。對提取液的取舍一般有兩種方法，一種為取全量，即充分洗凈殘渣，并將洗滌液合并于提取液中；另一種為取一定量，即在提取前精密加入定量溶劑，稱重，搖勻，過濾，最后結(jié)果按相當(dāng)?shù)臉悠妨坑嬎?，即得。⑧?fù)方制劑中由于某些藥味基礎(chǔ)研究工作薄弱，測定干擾難以克服或含量極低，無法進行某些成分含量測定的，也可選擇適宜的溶劑進行浸出物測定，如含揮發(fā)性成分或脂溶性成分可作醚浸出物測定，前者還可測定揮發(fā)性醚浸出物；如含各種苷類成分藥味較多，也可測正丁醇浸出物。④對于因藥材原料產(chǎn)地和等級不同而含量差異較大的成分，需注意檢測指標(biāo)的選定和產(chǎn)地的限定。④，但須在起草說明中闡述理由。然而藥物的療效必定有其物質(zhì)基礎(chǔ)，根據(jù)中醫(yī)藥理論，結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)研究，擇其具生理活性的主要化學(xué)成分，作為有效或指標(biāo)性成分之一，建立含量測定項目，評價藥物的內(nèi)在質(zhì)量，并衡量其商品質(zhì)量是否達到要求及產(chǎn)品是否穩(wěn)定，是完全必要的。（2）昆蟲及微生物污染 自六十年代以來，國內(nèi)外對非滅菌藥物制劑（包括藥材與中成藥）的生物性污染都有一些考察，有些屬嚴(yán)重污染，據(jù)國外報道，在一份甘草中分離出黃曲霉菌的代謝產(chǎn)物黃曲霜毒素B1及B2；有些外用成藥中曾檢出破傷風(fēng)桿菌等。藥典附錄根據(jù)有關(guān)劑型分別要求檢查不同項目。藥材產(chǎn)地、采收期、加工方法不同等引起成分差異，也應(yīng)進行必要的考察。D用文字描述 在進行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究時。2005版藥典中收載對照品282個，比2000年版新增對照品數(shù)90個， 收載對照提取物11個）例如：麝香中甾體激素的鑒別。②對顯色劑的選擇應(yīng)靈敏并具專屑性。對某些顯色劑如稀碘化鉍鉀鑒別生物堿、茚三酮鑒別氨基酸或肽，或用指示劑鑒別有機酸等成分，展開溶劑必須完全揮干后才可噴用，否則背景深，反差小，無法測定含量。⑥對某些成藥中雜質(zhì)如油脂、蛋白、氨基酸或色素等，或有些雜質(zhì)性質(zhì)不清楚，但往往造成薄層背景深（特別是以硫酸顯色），有時雖可辨認(rèn)斑點作鑒別試驗，但定量無法進行。曾用此法測定牛黃清心丸中麝香酮與冰片獲得成功。③大復(fù)方中揮發(fā)性成分的分離微量升華法：取適量樣品，進行微量升華，將供試樣品置圈內(nèi)，上蓋一載破片，以酒精燈緩緩加熱，取載玻片滴加適量丙酮溶解，作為供試品溶液。又如國公酒，除醇加水溶解，以乙醚提取鑒別佛手；繼以醋酸乙酯提取鑒別橙皮苷，再以正丁醇提取鑒別牛膝中齊墩果酸；最后水溶液再經(jīng)處理鑒別辛弗林，如不經(jīng)以上諸步化學(xué)分離，單靠層折則難以獲得清晰的色譜。3實驗設(shè)計中的有關(guān)問題（1）提取純化問題色譜技術(shù)雖均具分離與鑒定的雙重功能，且薄層色譜對樣品的純化程度要求較低，但由于中成藥成分復(fù)雜、干擾較大，難以得到理想的分離效果，且有時被測成分含量極少，甚至難以檢出和辨認(rèn)。對同一品種藥材采用適宜溶劑提取，測定紫外或紅外光譜有時可得重現(xiàn)性光譜圖，特別是紅外圖譜吸收峰提供信息多，更有鑒別意義。取樣品適量，以醋酸乙酯提取。一Rb x是C一20位有兩分子糖，生物合成過程較長，則一Rd由 （c一20連分子葡萄糖）變成一Rbl需要較長的時間積累，而須根生命周期（挖掘前）比主根短，所以其一Rbl含量比主根低得多，而這種差別也有助于說明中醫(yī)臨床經(jīng)驗認(rèn)為須根不如主根的作用。薄層鑒別有廣闊的前途，應(yīng)大力開展，各國藥典收載天然藥物及制劑采用TLC法，就其與收載品種之比超過50%的即有德國、法國、英國、近50種收有TLC鑒別方法，%.而90版藥典則增加為161種。對摻偽品的鑒別，顯微鑒別與化學(xué)鑒別必須密切配合，起到相捕相成作用，如麝香、牛黃等鑒別即是。根據(jù)中醫(yī)藥理論，依處方原則首選君藥與臣藥進行；貴重藥雖量少，但有時起重要作用，加強質(zhì)量監(jiān)督也是很必要的；含毒劇藥物也須鑒別，更須規(guī)定含量或限度。首先須寫明工藝的全過程，工藝的技術(shù)控制條件（方法、時間、溫度、壓力）及理由；工藝分工序中間體的質(zhì)量檢測要求如相對密度、指標(biāo)成分含量等；優(yōu)選工藝的詳細對比數(shù)據(jù)，定最作工藝的依據(jù)。原料為粗提取物、有效部位或化學(xué)單體，均應(yīng)制定相應(yīng)的原料標(biāo)準(zhǔn)。4處方中藥味均用法定計量單位。以粗提物處方，如復(fù)方川貝精片：麻黃膏適量 桔梗75g半夏（制）60g 川貝母20g 陳皮75g 甘草膏12g。（1）方內(nèi)主要藥味縮寫加劑型，如參巧片、葛根斗連膠囊、銀黃口服液。此外還有很多處方、工藝方面的環(huán)節(jié)都影響藥品的質(zhì)量。二次達80%，二種工藝醇沉濃度僅相差5~10%。又如成藥木瓜九，其處方含木瓜、當(dāng)歸、川芎、白芷、狗脊、牛膝、威靈仙、雞血藤、海風(fēng)藤、人參、川烏、草烏等藥味，其中紅顏色的藥味均有地區(qū)習(xí)慣用藥，如木瓜：木瓜、木桃、西藏木瓜等；狗脊：狗脊、黑狗脊；威靈仙：威靈仙、棉團鐵線蓮、革葉鐵線蓮、短梗菝葜；牛膝：牛膝（懷）、川牛膝、狗筋曼、脈毛馬蘭；海風(fēng)藤：松蘿、木通、異型南五味子等均有不同品種和不同地區(qū)的使用習(xí)慣，在日常藥用中應(yīng)注意鑒別，在研制新藥時，由于處方來源于多種渠道，更應(yīng)密切注意處方中各藥味系指何品種，確定后，必須取材穩(wěn)定，更應(yīng)注意藥材品種來源，以保證上市產(chǎn)品用藥安全和有效。由于廣豆根中苦參堿含量遠高于北豆根，按刁用北豆根量投入廣豆根，從而引起一、二百人出現(xiàn)中毒癥狀。又如動物藥金錢白花蛇，為祛風(fēng)濕通經(jīng)活絡(luò)的常用中藥。1對貴重藥材及常用緊缺藥材，要加強真?zhèn)蔚臋z驗，最好備有標(biāo)準(zhǔn)藥材對照品。四、質(zhì)量標(biāo)淮制定的前提標(biāo)準(zhǔn)的制定必須具備以下三個先決條件，即處方組成固定；原料（飲片）穩(wěn)定；制備工藝穩(wěn)定。又如血竭的質(zhì)量評價，由于血竭主要成分血蝎素極不穩(wěn)定，只是根據(jù)血竭素的理化性質(zhì)在270nm處有最大吸收，采用無水乙醇提取，其吸收度高低基本上與傳統(tǒng)經(jīng)驗對血竭的外觀鑒別質(zhì)量優(yōu)劣相一致，制定了一定濃度的血渴無水乙醇溶液在270nm吸收度不得少于一定值的規(guī)格限度。例如：六味地黃九的含量測定，藥典收載了薄層光密度法測定處方山茱萸中熊果酸的含量，若企業(yè)哲無薄層掃描儀，則可采用薄層比色法與其對比，測定結(jié)果一致或有一定相關(guān)性且穩(wěn)定，在日常檢驗中即可采用比色法控制產(chǎn)品質(zhì)量，但遇有產(chǎn)品含量處于合格邊緣，或需要仲裁時，只有各級法定標(biāo)準(zhǔn)，特別是國家藥典具有權(quán)威性（現(xiàn)行）。新藥被批準(zhǔn)后其生產(chǎn)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)再經(jīng)過二年試行期即直接轉(zhuǎn)為部頒標(biāo)難。在新藥取得批準(zhǔn)文號后，其它研究資料如藥效、毒理、臨床研究資料均已完成歷史使命，可存檔備用，但唯有質(zhì)量標(biāo)難伴隨產(chǎn)品終身。目的是保證臨床研究試驗藥品的質(zhì)量穩(wěn)定一致及上市藥品的質(zhì)量，從而保證藥品的安全和有效。衛(wèi)生部正在對成藥的地方標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)過有計劃的整頓提高。但各國家均不排除生產(chǎn)廠可以采用非藥典方法進行檢驗。如大黃的薄層鑒別，85版藥典一部收載方法即須以兩個溶劑系統(tǒng)：苯一甲酸乙酯一甲醇一甲酸一水〔3：1：：：〕；己烷一石油醚（6090℃）一甲酸乙酯一甲酸一水（3：1：：：），展開二次，才能使水解后的恩醌苷元大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素、大黃素甲醚、大黃酚等五種成分分開；而90版藥典一部則改進為只用一種溶劑系統(tǒng)石油醚（30一60℃） 甲酸乙酯甲酸（15：5：1，上層）一次展開即可得到分離度好，斑點清晰的薄層色譜（2000版及目前使用的2005版仍在使用該方法）。但須強調(diào)指出的是處方、原料和工藝絕不允許更動。藥材的真?zhèn)闻c地區(qū)習(xí)慣用藥的鑒別與應(yīng)用。常出現(xiàn)的偽品有紫苜蓿、蘭花棘豆、錦雞兒及錦葵科植物圓葉錦葵、歐蜀葵等，這些偽品性狀與正品黃芪類似，?；烊牖騻纬潼S芪藥材商品，嚴(yán)重影響中藥材質(zhì)量。八十年代中，華北曾大量應(yīng)用感冒湯防治流感。其它如烏毛蕨、狗脊蕨、莢果蕨等分布與使用地區(qū)均較窄，藥理活性也不及以上各種。加丹參注射液的制備，一般采用水煎醇沉反復(fù)二次，%，二次達85%；工藝II第一次醇沉達60%。見表5（略）。（含提取物）一般采用原料（藥材）名與劑型名結(jié)合，如穿心蓮片、絞股藍皂苷片等。（二）處方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中處方形式多種，有以凈藥材或飲片處方，如天麻九：天麻60g羌活100g 獨活50g 杜仲（制）50g 牛膝60g 蓽薢60g 附子（制）10g 當(dāng)歸100g 地黃160g玄參60g。3處方中有需要炮制的藥味，應(yīng)加括號注明，如蜜黃芪，應(yīng)為黃芪（密制）。干擾大，或擬測定藥味含量極少，而不屬于實驗設(shè)計不合理操作技術(shù)問題所致，含量測定確實困難或成藥未收裁含量測定項，有的僅收載了浸出物含量，可以暫時原料藥材（主藥之一）規(guī)定含量測定項目，間接控制成品質(zhì)量。因此在中藥新藥審批辦法《有關(guān)中藥部分的修訂和補充規(guī)定》（以下簡稱《補充規(guī)定》）中已明確增加了4號申報資料即制備工藝及其研究資料的要求。（五）鑒別1鑒別藥味的選擇：復(fù)方用藥為中醫(yī)藥特點之一，處方藥味從兩三味、十余味至幾十味，一般未要求逐個進行鑒別。有些成分不清楚或化學(xué)測定干擾較大的藥味也需要進行顯微鑒別，研究時需根據(jù)處方中藥味逐一分析比較，排除類似細胞組織和內(nèi)含物的干擾，選取各藥味在該成藥中具有專屬性的顯微特征作為鑒別依據(jù)，所收載的特征必須明顯、易察見。（3）色譜鑒別 指薄層色譜、氣相色譜和液相色譜對中藥進行真?zhèn)舞b別。④可以區(qū)別不同藥用部位，如人參須含人參總皂苷高于主根已為眾所周知，但其所含皂苷成分的比例有所不同： 人參主根與須根所含單體皂苷的分布及比例有顯著差別，最明顯的是人參主根中人參皂苷Rbl含量比須很高，人參皂苷Rd在須根中含量較高，即一Rbl與一Rd的比例在主根與須根中恰好倒置。結(jié)腸透析液中同時鑒別大黃蒽醌類成分與川芎內(nèi)酯類成分。（4）其它如光譜鑒別，紫外或紅外光譜等。有些藥材雖具備組織細胞應(yīng)有的顯微特征，但有的已作了手腳，如提過人參皂苷的人參，熬過山楂汁的山楂片，煮過的鹿茸片渣等，同時須進行理化鑒別甚至含量測定。如龍膽瀉肝九，先以正己烷提取，鑒別當(dāng)歸（內(nèi)酯類成分）；繼以丙酮提取，鑒別關(guān)木通（馬兜鈴酸）；再以甲醇提取經(jīng)氧化鋁小柱，用甲酵沖洗，鑒別龍膽（龍膽苦苷），即能依次鑒別多種成分，又可使各供試液達到凈化的目的