【正文】 ..........8 培養(yǎng)基 pH 的測(cè)定 ................................................8 數(shù)據(jù)處理 .........................................................83 結(jié)果與分析 ........................................................8 不同培養(yǎng)時(shí)間下的菌球直徑變化 .....................................8 不同培養(yǎng)時(shí)間下的菌球密度變化 .....................................9 不同培養(yǎng)時(shí)間下的液體培養(yǎng)基 pH 變化 ...............................10 不同培養(yǎng)時(shí)間下的四種胞外酶活性變化 ..............................11 淀粉酶活性變化 ................................................11 羧甲基纖維素酶（CMC 酶）活性變化 ...............................12河南科技大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 多酚氧化物酶活性變化 ..........................................13 漆酶活性變化 ..................................................134 結(jié)論與討論 .......................................................15 結(jié)論 ............................................................15 討論 ............................................................15參考文獻(xiàn) ............................................................18致 謝 ..............................................................20河南科技大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）11 前言 杏鮑菇的分類(lèi)地位杏鮑菇（學(xué)名： Pleurotus eryngii） ，又稱(chēng)刺芹菇、刺芹側(cè)耳，是生長(zhǎng)于歐洲地中海區(qū)域、中東和北非，但也在亞洲部分地區(qū)生長(zhǎng)的食用性菇類(lèi)。新鮮杏鮑菇粗蛋白含量為 20％，粗脂肪為 ％，粗纖維為 ％，灰分為％，礦物質(zhì)含量較高 [3]，人體中必需的微量元素鈣、鎂含量是猴頭菇鈣含量20ug/g 的 倍，姬松茸鈣含量 [4]。目前，食用菌多糖已廣泛應(yīng)用于免疫性缺陷疾病、自身免疫病和腫瘤等疾病的臨床治療及醫(yī)藥領(lǐng)域的其它用途，如制備醫(yī)用透析膜、藥物緩釋劑、血漿代用品及疫苗等 [8]。二、菌種更純。河南科技大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）3六、操作更簡(jiǎn)便。 國(guó)內(nèi)杏鮑菇液體菌種研究現(xiàn)狀我國(guó)較早從事食用菌液體深層發(fā)酵研究的是上海植物生理研究所孫美聿等人。2．液體菌種生產(chǎn)技術(shù)要求較高，需要專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員管理，才能保證菌種不受污染。據(jù)報(bào)道，把杏鮑菇的液體菌種接到固體培養(yǎng)料中，由于液體菌種具有流動(dòng)性，因而接入的菌種可流散在不同的部位萌發(fā)生長(zhǎng) [15]。試管培養(yǎng)基：采用 PDA 培養(yǎng)基，馬鈴薯 200 克，葡萄糖 20 克，瓊脂 15 克，自來(lái)水 1000 毫升，自然 pH。二級(jí)菌種的制備：將一級(jí)菌種按試驗(yàn)要求接種于裝有二級(jí)培養(yǎng)基的250ml 三角瓶中，恒溫振蕩培養(yǎng)，溫度25℃、轉(zhuǎn)速120r／min。曲線的繪制：以培養(yǎng)時(shí)間（天）為橫坐標(biāo)，菌球密度（個(gè)）為縱坐標(biāo)，繪制曲線。曲線的繪制：以培養(yǎng)時(shí)間（天）為橫坐標(biāo)，漆酶 OD 值為縱坐標(biāo)，繪制曲線。菌球直徑大小反應(yīng)了菌種分裂生長(zhǎng)能力的強(qiáng)弱。菌球直徑越小，菌球密度越大，菌種干重越大，則液體菌種流動(dòng)性越強(qiáng)，越易分散，發(fā)菌點(diǎn)越多，萌發(fā)越快。這可能與杏鮑菇液體菌種消耗有機(jī)氮源產(chǎn)生酸性代謝廢物有關(guān)。在培養(yǎng)初期菌種淀粉酶分泌較少，之后在豐富的多糖誘導(dǎo)下大量分泌淀粉酶。至于第九天又出現(xiàn)上升趨勢(shì)，可能與半纖維素有關(guān)。菌球溶解后多酚氧化酶被釋放出來(lái)，所以前期活性很低，后期較高。也就是說(shuō)，在利用液體菌種生產(chǎn)杏鮑菇的過(guò)程中，液體菌種的菌球直徑越小、密度越大、活性越強(qiáng)，則菌種的品質(zhì)越好，越有利于生產(chǎn)。營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，即發(fā)菌養(yǎng)菌階段。他指出，我國(guó)雖然從產(chǎn)量和消費(fèi)上已成為食用菌產(chǎn)業(yè)大國(guó)，但由于受小農(nóng)生產(chǎn)方式和習(xí)慣影響，還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不是食用菌強(qiáng)國(guó)?？傮w來(lái)說(shuō)，中國(guó)食用菌產(chǎn)業(yè)缺乏各環(huán)節(jié)的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)量保證和認(rèn)證等規(guī)范化體系。但一些問(wèn)題也接踵而至，其一，勞動(dòng)力的問(wèn)題。在以往的日子里，她忘我的工作熱情，執(zhí)著的求真精神，給我留下了深刻的印象，從中我深切地體會(huì)到了科學(xué)要嚴(yán)謹(jǐn)、求實(shí)的道理。你們?cè)谖以囼?yàn)過(guò)程中幫我解開(kāi)疑問(wèn)、解決困難，是你們使我在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中充滿(mǎn)動(dòng)力，感到溫暖，讓我明白了他人幫助和團(tuán)隊(duì)合作的重要性。本試驗(yàn)以培養(yǎng)時(shí)間為變量，以菌球直徑、菌球密度、培養(yǎng)基 PH、四種胞外酶活性為指標(biāo)，以期篩選出最佳培養(yǎng)周期，從而為杏鮑菇的標(biāo)準(zhǔn)化、周年化、規(guī)?；⒐S化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。從市場(chǎng)前景上看，我國(guó)的食用菌消費(fèi)潛力還相當(dāng)大，我國(guó) 13 億人口，2022 年人均蔬菜年消費(fèi)量達(dá)到 240kg，而人均食用菌年消費(fèi)量只有 3kg 左右，僅為 1／80，潛在消費(fèi)空間非常大。如食用菌生產(chǎn)的產(chǎn)地環(huán)境、設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)，添加劑、殺蟲(chóng)劑、農(nóng)藥、化肥的使用方法和標(biāo)準(zhǔn)。從生產(chǎn)銷(xiāo)售總體上看，中國(guó)食用菌存在著生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)不規(guī)范、產(chǎn)量大、價(jià)格低杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究16等問(wèn)題。杏鮑菇菌絲的生長(zhǎng)發(fā)育包括菌絲的發(fā)菌、生長(zhǎng)周期、生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)勢(shì)、抗逆性、菌絲表現(xiàn)等。所以總的來(lái)講：杏鮑菇四種胞外酶活性在第六天最大，菌種活性最強(qiáng)。多酚氧化酶在培養(yǎng)前期分泌較少，活性較低。上述變化可能與培養(yǎng)基內(nèi)纖維素有關(guān)。第八天以后淀粉酶活性逐漸下降。由圖 3 可知：培養(yǎng)基 pH 變化曲線呈緩慢下降趨勢(shì)。由圖 2 可知：液體菌種菌球密度變化曲線呈拋物線型：隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)菌球密度逐漸增加，在第 35 天呈指數(shù)型增加，在第六天達(dá)到最大，每毫升最多有128 個(gè)。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖 1。曲線的繪制：以培養(yǎng)時(shí)間（天）為橫坐標(biāo)，多酚氧化物酶 OD 值為縱坐標(biāo)，繪制曲線。曲線的繪制：以培養(yǎng)時(shí)間（天）為橫坐標(biāo)，菌球直徑（mm）為縱坐標(biāo)，繪制曲線。取 左右的母種菌塊接種于裝有 150ml 一級(jí)培養(yǎng)基的 250ml 三角瓶中，每瓶 3 塊，25℃下靜置 2 天，然后在溫度 25℃、轉(zhuǎn)速 150r/min，振蕩培養(yǎng) 5 天 [17]。 實(shí)驗(yàn)用具80 目篩網(wǎng)，電磁爐，250ml 三角瓶，試管，燒杯，吸管，培養(yǎng)皿，玻璃棒，量筒，溫度計(jì)，試管架，100ml 容量瓶，500ml 容量瓶，比色皿等。生產(chǎn)的液體菌種可以用作栽培用的母種或原種，也可直接作栽培種。 杏鮑菇液體菌種生產(chǎn)中存在的問(wèn)題液體菌種雖然在栽培上具有許多優(yōu)點(diǎn)，但目前仍不能取代固體菌種推廣使用，原因主要有以下幾方面 [14]：杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究41．生產(chǎn)液體菌種的投入比較大。1948 年美國(guó)科學(xué)家 Humfeld 等成功地對(duì)蘑菇進(jìn)行了液體深層培養(yǎng)，從而揭開(kāi)了人類(lèi)進(jìn)行食用菌液體培養(yǎng)和液體菌種研究的序幕，并很快使歐美國(guó)家蘑菇生產(chǎn)在五、六十年代快步進(jìn)入了液體菌種和工業(yè)化栽培時(shí)代 [9]。五、污染更少。液體菌種具有固體菌種不可比擬的優(yōu)勢(shì)：一、工藝更簡(jiǎn)便?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，食用菌中能顯著增強(qiáng)癌癥患者抵抗力的生理活性物質(zhì)即為食用菌多糖。杏鮑菇營(yíng)養(yǎng)豐富，質(zhì)地脆嫩，口感絕佳，風(fēng)味獨(dú)特，故有“草原上的美味牛肝菌”之美稱(chēng)。 liquid culture。綜上所述，杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期為六天。河 南 科 技 大 學(xué)畢 業(yè) 設(shè) 計(jì)(論 文)杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究畢 業(yè) 設(shè) 計(jì)（ 論 文 ）任 務(wù) 書(shū)（指導(dǎo)教師填表） 填表時(shí)間：2022 年 3 月 5 日學(xué)生姓名專(zhuān) 業(yè)班 級(jí)園藝 093指 導(dǎo)教 師課 題類(lèi) 型論文設(shè)計(jì)（論文）題目 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究主要研究?jī)?nèi)容1．不同培養(yǎng)時(shí)間對(duì)杏鮑菇液體菌種生長(zhǎng)性狀的影響：包括菌球直徑，菌球密度，培養(yǎng)基 pH。結(jié)果顯示：菌球直徑先變小后增大，第六天達(dá)到最小，最小為 ；菌球密度先變大后變小，在第六天達(dá)到最大，最大為 128 個(gè)/ml；培養(yǎng)基 pH 一直變小；淀粉酶活性在前三天內(nèi)活性很低，第四 4 天迅速增大，第六天達(dá)到最大，最大為，隨后逐漸下降；羧甲基纖維素酶在前四天內(nèi)活性很低，到第五天迅速增大，第六天達(dá)到最大，最大為 ，之后又迅速下降；多酚氧化酶活性在前五天內(nèi)逐漸上升，第七天達(dá)到最大，最大為 ，而后又下降；漆酶活性在前六天內(nèi)逐漸增加，第六天達(dá)到最大，最大為