【正文】 基酸的序列 蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)測(cè)定 蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)含量測(cè)定：圓二色光譜法，測(cè)α 螺旋較多的蛋白質(zhì)時(shí)，結(jié)果較為準(zhǔn)確。 析： 硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽放入蛋白質(zhì)溶液中，破壞水化膜并中和表面電荷，導(dǎo)致蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素去除而沉淀。若調(diào)節(jié) pH值至其等電點(diǎn)時(shí)，變性蛋白質(zhì)呈絮狀析出，再加熱，形成堅(jiān)固的凝塊。 瘋牛?。菏怯呻貌《镜鞍滓鸬囊唤M人和動(dòng)物神經(jīng)退行性病變，具有傳染性、遺傳性或散在發(fā)病的特點(diǎn)。 （ Hb）由四個(gè)亞基組成，兩 個(gè)α亞基，兩個(gè)β亞基。 2. 氨基酸的紫外 吸收性 質(zhì) （ 1） 吸收波長(zhǎng)： 280nm （ 2） 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：分子中含有共軛雙鍵 （ 3） 光譜吸收能力：色氨酸＞酪氨酸＞苯丙氨酸 （ 4） 呈色反應(yīng)： 氨基酸與茚三酮水合物共加熱，生成的藍(lán)紫色化合物在 570nm 波長(zhǎng)處有最大吸收峰；藍(lán)紫色化合物＝（氨基酸加熱分解的氨）＋（茚三酮的還原產(chǎn)物）＋（一分子茚三酮）。 ?芳香族氨基酸：色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸。 每 100mg樣品中蛋白質(zhì)含量（ mg%）：每克樣品含氮質(zhì)量（ mg） 100。蛋白質(zhì)是一切生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，是各種生命功能的直接執(zhí)行者，在物質(zhì)運(yùn)輸與代謝、機(jī)體防御、肌肉收縮、信號(hào)傳遞、個(gè)體發(fā)育、組織生長(zhǎng)與修復(fù)等方面發(fā)揮著不可替代的作用。 （ 3） 酸性氨基酸：天冬氨酸（ Asp）、谷氨酸（ Glu）。在某一 pH 環(huán)境溶液中，氨基酸解離生成的陽(yáng)郭子及陰離子的趨勢(shì)相同，成為兼性離子。 四、 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與空間結(jié)構(gòu)的關(guān)系 ，具有相似一級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽或蛋白質(zhì)，其空間構(gòu)象及功能也相似。促進(jìn)作用則為正協(xié)同效應(yīng)；反之為負(fù)協(xié)同效應(yīng)。 ：水化膜、表面電荷。 七、 蛋白質(zhì)的分離純化 析： 利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開(kāi)的方法。 (3)層 析： 待分離蛋白質(zhì)溶液（流動(dòng)相）經(jīng)過(guò)一個(gè)固態(tài)物質(zhì)（固定相）時(shí)，根據(jù)溶液中待分離的蛋白質(zhì)顆粒大小、電荷多少及親和力等，使待分離的蛋白質(zhì)在兩相中反復(fù)分配，并以不同速度流經(jīng)固定相而達(dá)到分離蛋白質(zhì)的目的。 ：核酸的基本組成是核苷酸。 ? DNA變性只改變其二級(jí)結(jié)構(gòu)，不改變核苷酸排列順序。 b) 核酸內(nèi)切酶： 可以在 DNA或 RNA分子內(nèi)部切斷磷酸二酯鍵的酶。 ―― 生物催化劑 包括酶及核酶兩個(gè)概念。 ? 酶促反應(yīng)具有高度的特異性： ? 絕對(duì)的特異性：僅作用于特定結(jié)構(gòu)的底物，進(jìn)行一種專一的反應(yīng)，生成一種特定的產(chǎn)物。酶促反應(yīng)的機(jī)制很復(fù)雜，在酶的活性中心內(nèi)底物可發(fā)生鄰近效應(yīng)和定向排列，酶對(duì)底物可進(jìn)行酸堿多元催化在，底物在酶活性中心的疏水性‘口袋’里發(fā)生表面效應(yīng)。 抑制劑的影響 ? 酶的抑制劑： 引起酶催化活性下降但不引起酶蛋白變性的物質(zhì)。例消化酶原、凝血酶原等。 5. 變構(gòu)調(diào)節(jié)是快速調(diào)節(jié)。 9. 乳酸脫氫酶有五種類型，其中 LDH1型在心肌細(xì)胞中最多；肝病時(shí) LDH5升高 10. 肌酸激酶（ CK）有三型：腦中含 CK1（ BB 型）；心肌含 CK2（ MB 型）；骨骼肌含 CK3（ MM型） 六、 酶的命名與 分類原則 酶均有兩個(gè)名稱，系統(tǒng)名稱應(yīng)標(biāo)明酶的所有底物與反應(yīng)性質(zhì)。 ? 糖還是機(jī)體重要的碳源，糖代謝的中間產(chǎn)物可轉(zhuǎn)變成其他的含碳化合物。 表 41 糖酵解關(guān)鍵酶的調(diào)節(jié) 激活劑 抑制劑 附 注 6磷酸果糖激酶 1 AMP、 ADP 1,6二磷酸果糖 2,6二磷酸果糖 ATP、檸檬酸 ? 1,6二磷酸果糖是該酶的正反饋激活劑 ? 2,6二 磷酸果糖是該酶最強(qiáng)的變構(gòu)激活劑 丙酮酸激酶 1,6二磷酸果糖 ATP、丙氨酸 ―― 已糖激酶 ―― 6磷酸葡萄糖 長(zhǎng)鏈脂酰 CoA 有四種同工酶，肝細(xì)胞中的Ⅳ型，稱為葡萄糖激酶 ? 糖酵解的生理 意義 ? 迅速提供能量，對(duì)肌收縮更為重要。 ? 三大營(yíng)養(yǎng)素徹底氧化分解的最終代謝通路。 ⑶ NADPH還用于維持谷胱甘肽的還原狀態(tài)。 ? 通過(guò) 3個(gè)底物循環(huán)進(jìn)行有效調(diào)節(jié)。 ? 形成原因：肝內(nèi)糖異生活躍，且有葡萄糖－ 6－磷酸酶水解 6－磷酸葡萄糖釋放葡萄糖； 肌肉糖異生活性低，且無(wú)葡萄糖－ 6－磷酸酶。 脂肪酸的來(lái)源有二 ? 來(lái)源一是自身合成如飽和脂肪酸及單不飽和脂肪酸。 ? 第三步：脂酸的β氧化 每一次β氧化需要四個(gè)反應(yīng)依次連續(xù)進(jìn)行 1． 脫 氫：生成 FADH2 2． 加 水： 3． 再脫氫：生成 NADH+H＋ 4． 硫 解 ：生成一分子乙酰 CoA和脂酰 (n2)CoA，（ n為碳原子個(gè)數(shù)） 脂酸氧化的能量生成：以 16碳的軟脂酸為例 ? 產(chǎn)生的總能量是 131ATP，脂酸活化時(shí)相當(dāng)于消耗兩個(gè) ATP，凈產(chǎn)生 129個(gè) ATP分子 ? 含有 2n個(gè)碳原子的脂肪酸徹底氧化分解時(shí)可產(chǎn)生 n個(gè)乙酰 CoA分子、 n1個(gè) FADH2分子、 n1個(gè) NADH+H+分子 故總產(chǎn)生 12 n + 2（ n1） + 3（ n1）＝ 17n5個(gè) ATP，凈產(chǎn)生 17n7個(gè) ATP ? 例 14碳軟脂酸分解，最終凈產(chǎn)生 114個(gè) ATP 十二、 酮體生成過(guò)程的特點(diǎn) 酮體： 乙酰乙酸、β 羥 丁酸及丙 酮 ? β 羥 丁酸 + NAD+ ←→ 乙酰乙酸 + NADH+H＋ 酮體代謝的特點(diǎn)： 肝內(nèi)生酮肝外用。 ? 丙二酯 CoA抑制脂酰 CoA進(jìn)入線粒體，減少酮體生成。 ? 亞油酸可以轉(zhuǎn)變?yōu)榛ㄉ南┧峒捌溲苌铮ㄇ傲邢偎?、血?口惡 烷及白 三烯）。 ? 耗料 (18分子 乙酰 CoA)：線粒體的糖氧化。 ? 轉(zhuǎn)化為 7脫氫膽固醇，經(jīng)紫外線照射轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素 D3。 第六章 一、 生物氧化與體外燃燒的異同 見(jiàn)表 61。 底物水平磷酸化 ： 直接將代謝物分子中的能量轉(zhuǎn)移至 ADP（或 GDP），生成 ATP（或 GTP）的過(guò)程。 六、 其他氧化體系：需氧脫氫酶和氧化酶、過(guò)氧化物酶、超氧物歧化酶和微粒體酶 除線 粒體的氧化體系外，在微粒體、過(guò)氧化物酶體以及細(xì)胞其他部位還存在其他氧化體系，參與呼吸鏈以外的氧化過(guò)程，其過(guò)程是不伴隨磷酸化，不能生成 ATP，主要與體內(nèi)代謝物、藥物和毒物的生物轉(zhuǎn)化有關(guān)。 ? 腸道細(xì)菌對(duì)未消化的蛋白質(zhì)和氨基酸可產(chǎn)生腐敗作用。 ? 轉(zhuǎn)變成糖及脂類。 ? 谷氨酰胺既是氨的解毒產(chǎn)物，也是氨的儲(chǔ)存及運(yùn)輸形式。 四個(gè)反應(yīng)步驟。 ? 嘧啶核苷酸的合成僅在胸苷酸（ dTMP）合成時(shí)，需要 N10CH2FH4提供甲基。 ? 酪氨酸 → 多巴胺（腎上腺素、去甲腎上腺素）， 主要在神經(jīng)組織是腎上腺組織。 第八章 二十八、 體內(nèi)核苷酸的分布特點(diǎn)與生物學(xué)功能 核苷酸體內(nèi)的分布 ? 人體內(nèi)的核苷酸主要由機(jī)體細(xì)胞自身合成。 二十九、 嘌呤核苷酸的從頭合成途徑 從頭合成的基本原料： 天冬氨酸、谷胺酰胺、甘氨酸、一碳單位（ N5N10甲炔 FH N10甲酰 FH4）、 CO2合成（ 天甘在上，谷酰為 底，一碳單位在兩旁，二氧化碳頂頭上） 從頭合成的過(guò)程： ? IMP 的合成，記憶要點(diǎn)： ? 5’ P核糖 + ATP ――――→ PRPP + AMP 反應(yīng)由 PRPP合成酶催化。 三十二、 嘌呤核苷酸的抗代謝物 嘌呤核苷酸的抗代謝物見(jiàn)表 81。 ? 嘧啶核苷酸合成的酶是兩個(gè)多功能酶。 AMP ―― → 次黃嘌呤―― → 黃嘌呤―― → 尿酸 ? 谷氨酰胺 + HCO3－ + 2ATP → 氨基甲酰磷酸 + 谷氨酸 + 2ADP。 合成過(guò)程 ? 尿嘧啶核苷酸的合成。 三十一、 脫氧（核糖）核苷酸的生成特點(diǎn) ? 反應(yīng) 過(guò)程： NDP ――→ dNDP，由核糖核苷酸還原酶催化。 ? 組成輔酶：腺苷酸可作為 NAD、 FAD 的組成成分。此時(shí) ，尿中出現(xiàn)大量苯丙酮酸等代謝產(chǎn)物。 ? 肌酸激酶有三種同工酶： MM型（骨骼肌中）、 MB型（心肌中）、 BB型（腦組織中）。 ? 一碳單位的功效：作為合成嘌呤核苷酸與嘧啶核苷酸的原料。 三個(gè)重要中間產(chǎn)物：鳥(niǎo)氨酸、瓜 氨酸、精氨酸。 ? 肝為肌肉提供了生成丙酮酸的葡萄糖。 ? 轉(zhuǎn)氨酶與腺苷酸脫氨酶的嘌呤核苷酸循環(huán)聯(lián)合作用主要在肌肉中進(jìn)行。 ? 胃蛋白酶、胰蛋白酶是蛋白質(zhì)消化的主要酶。 ? 乙酰 CoA：三大物質(zhì)代謝的樞扭。 兩條呼吸鏈 ? NADH呼吸鏈：復(fù)合體 I → 復(fù)合體 III → 復(fù)合體 IV 乳酸脫氫酶、蘋(píng)果酸脫氫酶、異檸檬酸脫氫酶、谷氨酸脫氫酶、β羥丁酸脫氫酶 ? 琥珀酸呼吸鏈：復(fù)合體 II → 復(fù)合體 III → 復(fù)合體 IV 琥珀酸脫氫酶、磷酸甘油脫氫酶、脂酰 CoA脫氫酶 ? 細(xì)胞色素在呼吸鏈 中的排列順序 b560→ b562→ b566→ c1→ c→ a→ a3→ O2 三、 氧化磷酸化的概念及特點(diǎn) P/O比值： 物質(zhì)氧化時(shí)，每消耗 1摩爾氧原子所消耗無(wú)機(jī)磷的摩爾數(shù)（消耗 ADP的摩爾數(shù)），即生成 ATP的摩爾數(shù)。 ? HDL在血漿中的半衰期為 35天。 表 55 膽固醇合成的調(diào)節(jié) 合成增加 合成減少 HMGCoA還原酶活性變化 增高 降低 晝夜變化 午夜最高 正午最小 激素影響 胰島素增加、甲狀腺素增加 胰高血糖素增加、皮質(zhì)醇增加 飲食因素 飽食促進(jìn)合成 饑餓禁食導(dǎo)致合成減少 反饋調(diào)節(jié) 膽固醇自身的負(fù)反饋?zhàn)饔? 膽固醇的轉(zhuǎn)歸 ? 轉(zhuǎn)變?yōu)槟?汁 酸。 合成原料 ： “三高合成”。 表 51 脂酸分解與脂酸合成的比較 脂酸的分解（β 氧化） 脂酸的合成 合成部位 腦組織外的所有組織，先胞液，后線粒體 肝、腎、腦、肺、乳腺及脂肪組織的胞液中 主要代謝原料 脂肪酸 乙酰 CoA 主要代謝過(guò)程 第一步：脂肪酸的跨膜運(yùn)輸 第二步：脂肪酸的 β 氧 化 第一步：丙二酰 CoA的合成 第二步：脂酸合成 關(guān)鍵酶 肉堿脂酰 CoA轉(zhuǎn)移酶 I 乙酰 CoA羧化酶 所需的還原當(dāng)量 FAD、 NAD＋ NADPH 重要的中間產(chǎn)物 乙酰 CoA 丙二酸單酰 CoA（第六版教材中稱丙二酰 CoA） CO2作為參加者 是 不是 ?；d體 CoA ACP 十四、 幾種多不飽和脂酸及重要衍生物 ? 不飽和脂酸 包括油酸、軟油酸、亞油酸、α亞麻酸和花生四烯酸。 酮體生成的調(diào)節(jié) ? 酮體生成增加：饑餓時(shí) ，胰高血糖素增多，脂肪動(dòng)員加強(qiáng)。 關(guān)鍵酶： 激素敏感性甘油三酯脂肪酶 HSL，也是脂肪分解的限速酶 ? 激活：脂解激素如腎上腺素、胰高血糖素、 ACTH、 TSH ? 抑制：胰島素、前列腺素 E煙酸 十一、 脂肪酸β氧化過(guò)程的特點(diǎn) 脂肪酸β氧化的過(guò)程：三個(gè)步驟 ? 第一步：脂酸的活化，生成脂酰 CoA，胞液中進(jìn)行，脂酰 CoA合成酶催化 脂肪酸 + ATP + 輔酶 A → 脂酰 CoA + PPi ? 第二步：脂酰 CoA 進(jìn)入線粒體 依賴肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 I（外膜上）、肉堿 肉堿脂酰轉(zhuǎn)位酶（內(nèi)膜上）、肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 II（內(nèi)膜上）三種酶作用轉(zhuǎn)運(yùn)。 ? 血糖來(lái)源有三：⑴食物消化吸收 ⑵肝糖原分解 ⑶糖異生 ? 血糖去路有四：⑴無(wú)氧酵解 ⑵有氧氧化 ⑶磷酸戊糖途徑 ⑷轉(zhuǎn)化為脂肪、氨基酸 第五章 八、 什么是脂類，包括哪些物質(zhì) 脂類：脂肪及類脂的總稱 ? 脂肪：甘油三酯或稱三脂肪酸甘油酯。葡萄糖釋入血液后又被肌攝取。 ? 谷草轉(zhuǎn)氨酶生成天冬氨酸機(jī)制：以乳酸為原料異生為糖時(shí)。 ⑴ NADPH是體內(nèi)許多合成代謝的供氫體。 表 42 糖有氧氧化的調(diào)節(jié) 激活劑 抑制劑 附 注 丙酮酸脫氫酶復(fù)合體 AMP ATP 乙酰 CoA、 NADH+H＋ 變構(gòu)調(diào)節(jié) + 共價(jià)修飾 檸檬酸合成酶 非關(guān)鍵酶 異檸檬酸脫氫酶 ADP ATP、 NADH 主要調(diào)節(jié)點(diǎn)、反饋抑制 α 酮戊二酸脫氫酶 Ca2+ ATP、 NADP、琥珀酰 CoA 反饋抑制 巴斯德效應(yīng)：糖的有氧氧化抑制糖酵解的現(xiàn)象。 ⑵ 二次底物水平磷酸化過(guò)程：各生成 1分子 ATP 1,3二磷酸甘油酸→ 3磷酸甘油酸 + ATP 磷酸烯醇式丙酮酸→丙酮酸 + ATP 二次 ATP消耗的反應(yīng)： 葡萄糖 + ATP → 6磷酸葡萄糖 6磷酸果糖 + ATP → 1,6二磷酸果糖 二個(gè)磷酸丙糖的生成： 1,6二磷酸果糖裂解為磷酸二羥丙酮和 3磷酸甘油醛 二個(gè) ATP的凈生成： 2（底物水平磷酸化） 2（磷酸丙糖）－ 2（ ATP消耗） ⑶ 三次不可逆性反應(yīng)，三個(gè)關(guān)鍵酶的參與 已糖激酶 催化 葡萄糖 → 6磷酸葡萄糖 6磷酸果糖激酶 1 催化 6磷酸果糖 → 1,6二磷酸果糖 丙酮酸激酶 催化 磷酸烯醇式丙酮酸 → 丙酮酸 第二階段：丙酮酸還原生成乳酸，所需的氫原子由前述‘一次脫氫’過(guò)程提供，反應(yīng)由乳酸脫氫酶催化，輔酶是 NAD+。此外，酶還可以作為工具用于臨床檢驗(yàn)和科學(xué)研究。 同工酶概念及應(yīng)用 ? 同工酶：是指催化的化學(xué)反應(yīng)相同，酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化