菌種操作規(guī)程ppt課件(存儲版)
【正文】 分次加入氫氧化鈉溶液（總量為57mL）研磨，充分溶解后，加蒸餾水至 100mL，過濾即成。 ? 1%～ 2%來蘇爾溶液：將 10%的來蘇爾溶液稀釋 5～ 10倍。瓊脂完全溶化后，趁熱裝入試管（ 18 180mm）或 500mL三角瓶中，小試管裝量每支約 10mL，三角瓶每瓶 300mL裝量，分裝必要時可用三角漏斗，以免使培養(yǎng)基溢在管口或瓶口上而造成污染。若三角瓶中的培養(yǎng)基暫時不用，可放置冰箱內(nèi)保存。 ? PH： 待藥品完全溶解后再補充水定容至所需量，調(diào)整 PH，若 PH偏酸，可滴 10N的 NaOH,邊加邊攪拌 ,調(diào)節(jié) PH至 ～ ；若 PH偏堿 ,則用 10N HCl調(diào)節(jié) PH至 ～ ,應注意 PH值不要調(diào)過 ,以免回調(diào)影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。 ? 丙二醇 50mL加熱熏煙滅菌。 廢液樣處理方法 ? 菌種廢母瓶、廢懸浮液，化驗樣余樣，菌種觀察菌絲及測 PH多余發(fā)酵液等均不得直接倒入下水道，必須升溫至 100℃ 左右煮沸 30分鐘后，再放入下水道并填寫 《 廢樣液處理記錄 》 。 1℃ 濕度 50%～ 70%的條件培養(yǎng)11天后，下?lián)u瓶測生物量、總油和 AA的含量并填寫《 原材料搖瓶考察結(jié)果記錄 》 。 小罐接種操作 ? 本工藝采用菌絲進罐和傾倒式接種法。 ? 種瓶并好后，將瓶口包扎紗布和牛皮紙，等待進罐，若母瓶不進罐，并瓶后應置于 2～ 8℃ 冰箱保存，期限不超過 2天。 母瓶菌絲的制備 ? 母瓶培養(yǎng)基配方 成 份 葡萄糖 酵母粉 PH 配 比 3% % ～ 規(guī) 格 分析純 符合酵母粉驗收標準 ? 配制稱量時，一般將不溶或難溶物質(zhì)（如酵母粉等）和易溶解物分開稱，根據(jù)母瓶培養(yǎng)基配方稱取所需葡萄糖和酵母粉重量，葡萄糖用蒸餾水溶解，酵母粉直接按配比分裝于三角瓶內(nèi)。 ? 母斜面生長成熟后，取下，無菌試驗正常則用 %新潔而滅溶液滅菌后再用牛皮紙扎口后放置冰箱低溫保藏備用溫度 2～ 8℃ ，保藏期不超過 15天；無菌試驗不正常則按廢樣液處理辦法處理并填寫 《 廢樣液處理記錄 》 。 ? 母斜面用 30 200mm的大試管分裝，每支大試管約 20mL；子斜面用茄子瓶分裝，每支約 60mL，裝好后，塞好棉塞，用雙層紗布扎口后，再用牛皮紙扎口，放置在不銹鋼筐中，蓋上牛皮紙，準備消毒。經(jīng)無菌試驗檢查正常。 ? 保藏 合格安瓿管置 2～ 5℃ 冰箱保藏，保藏期為 1～ 10年。 ? 按 10%的抽樣率抽取滅菌好的脫脂牛奶作無菌實驗，每支肉湯倒入約 1mL左右的牛奶。菌種操作規(guī)程 （ Master Operation Procedure for ARA Production Strain） CA/WA001— 2022版 ? 1目的 建立菌種操作規(guī)程，確保菌種保藏、自然選育、生產(chǎn)供種操作規(guī)范性，提供優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的生產(chǎn)菌種。 ? 脫脂好的牛奶倒入試管（ Φ18 200mm）或 250mL三角瓶中，置消毒鍋中滅菌，滅菌溫度 110℃ 、時間 20分鐘。測定方法：將測定儀照著安瓿管管壁打一槍，如果各壁呈紫色的光即為合格，如果沒有顏色，呈白光，即是不合格產(chǎn)品。斜面孢子一般培養(yǎng) 7～ 9天，孢子成熟。 ? 將定容后的培養(yǎng)液放置電爐上加熱，將稱量好的瓊脂，邊攪拌邊加入，待瓊脂全部融化后，取下培養(yǎng)基進行分裝。 ? 將接種后的母斜面放置培養(yǎng)間，溫度 28℃ ，濕度 50～70%，培養(yǎng) 7～ 9天，觀察生長情況，并填寫 《 母斜面生長記錄 》 和 《 溫度濕度原始記錄 》 。 ? 子斜面生長成熟后，取下，無菌試驗正常則用 %新潔而滅溶液滅菌后再用牛皮紙扎口后放置冰箱低溫保藏備用，保藏期不超過 15天；無菌試驗不正常則按廢樣液處理辦法處理并填寫 《 廢樣液處理記錄 》 。 ? 母瓶進罐前，要在無菌條件下
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