酶在食品分析中的應(yīng)用(2)(存儲(chǔ)版)
【正文】 留的酶抑制率法測(cè)定 ? 在一定條件下 ， 有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶的活性有抑制作用 ，在底物的作用下 ， 酶分解成可發(fā)生顯色反應(yīng)的硫代膽堿 。 謝謝 ！ 。 ? （ ４ ） 測(cè)定豬肉 、 牛乳鮮度的酶?jìng)鞲衅饕惨验_(kāi)發(fā)出來(lái) 。目前 ， PCR是區(qū)分雞肉和火雞肉的唯一方法 。 金屬硫蛋白含有大量的 SH， 能與 Hg、 Cd、 Cu、Ag等重金屬離子結(jié)合掩蔽金屬的毒性 ， 對(duì)細(xì)胞內(nèi)的金屬離子有重要的解毒作用 。 隨著研究的深入 ， 由原樣品的復(fù)雜處理和抽提發(fā)展為只需要高度純化過(guò)程 ， 加速了其在實(shí)際檢測(cè)中的應(yīng)用 。 因而 ELISA可作為商業(yè)上快速判定分析肉品終溫的一種方法 。 沙門氏菌的 ELISA檢測(cè) ? 例如對(duì) 沙門氏菌 最低檢測(cè)量可達(dá) 500CFU/g， 僅需 22h， 比常規(guī)方法縮短了 3～ 4 d， 與 金黃色葡萄球菌 、 大腸桿菌 無(wú)交叉反應(yīng) 。 ? FDA檢測(cè)蘑菇罐頭葡萄球菌腸毒素使用的 TECRA試劑盒在檢測(cè)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈的非特異反應(yīng) ， 因此 ， 這種試劑盒是不可靠的 ， 其所得出的檢測(cè)結(jié)果也是不可靠的 。 其中毒性最大 、 致癌能力最強(qiáng) 的是 黃曲霉毒素 。 以測(cè)定抗原為例 , 將抗原吸附于固相載體；加入待測(cè)抗原和一定量特異性抗體 ， 使固相抗原與待測(cè)抗原二者競(jìng)爭(zhēng)與抗體結(jié)合；經(jīng)過(guò)洗滌分離 ， 最后結(jié)合于固相的抗體與待測(cè)抗原含量呈負(fù)相關(guān) 。 （ 常用硫酸 ） 必需 酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板 DNM9602A酶標(biāo)分析儀 酶標(biāo)板 ELISA的基本類型 ? 隨著 ELISA在生物檢測(cè)分析領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用 ，根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件 ， 逐漸演變出了幾種不同類型的檢測(cè)方法： （ 5）捕獲法測(cè) IgM抗體； （ 6） ABSELISA法； （ 7） PCR酶聯(lián)免疫測(cè)定法； （ 8）斑點(diǎn)免疫酶結(jié)合試驗(yàn)。 如酶聯(lián)免疫法 、 酶電極法等 。 ? 到了 20世紀(jì) 50年代前已有 60種物質(zhì)能借助于酶法分析 。 酶法分析的發(fā)展 ? 如早在 1914年臨床上就開(kāi)始采用脲酶測(cè)定尿中的尿素 ， 但是在臨床實(shí)驗(yàn)室中酶分析的真正突破要推遲到 1958年 ， 當(dāng)時(shí)轉(zhuǎn)氨酶分析發(fā)展成為診斷肝病和心臟病的一個(gè)有效手段 。 ? 4） 利用酶催化反應(yīng)所產(chǎn)生的一些信息 。 重點(diǎn) ELISA試劑盒的組成 ? 完整的 ELISA試劑盒包含以下各組分： （ 1） 包被抗原或抗體的固相載體 （ 免疫吸附劑 ） ； （ 2） 酶標(biāo)記的抗原或抗體 （ 標(biāo)記物 ） ； （ 3） 酶作用的底物 （ 顯色劑 ） ； （ 4） 陰性和陽(yáng)性對(duì)照品 （ 定性測(cè)定 ） ， 參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清 （ 定量測(cè)定 ） ； （ 5） 結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液； （ 6） 洗滌液； （ 含吐溫 20磷酸鹽緩沖液 ） （ 7） 酶反應(yīng)終止液 。 （ 2）間接法 ELISA 競(jìng)爭(zhēng)法 ? 此法可用于抗原和半抗原的定量測(cè)定 ， 也可用于測(cè)定抗體 。 （ 1）毒素檢測(cè) ? 真菌毒素是真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物 ， 其中的十幾種對(duì)人類危害較大 ， 它們一般同時(shí)具有毒性強(qiáng)和污染頻率高的特點(diǎn) 。 2022年才得以解決 。 目前有許多種方法 ， 其中通過(guò)制備單克隆抗體分析食品中細(xì)菌的酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)研究最多 ， 檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠 。 ? 當(dāng)用蛋白質(zhì)做指示劑時(shí) ， 可制備抗體 ， 這種抗體對(duì) 單一蛋白質(zhì) 的天然狀態(tài)或變性狀態(tài)均具有專一性 ， 這樣它就可以指示蛋白質(zhì)在加熱過(guò)程中變化 。 （ 5）動(dòng)物性食品中藥物殘留檢測(cè) ? 利用 ELISA技術(shù)測(cè)定動(dòng)物性食品中有害殘留成分只是近幾年的事 。 （
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