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酶在食品分析中的應(yīng)用(2)-在線瀏覽

2025-02-25 07:36本頁(yè)面
  

【正文】 2) 酶標(biāo)記的抗原或抗體 ( 標(biāo)記物 ) ; ( 3) 酶作用的底物 ( 顯色劑 ) ; ( 4) 陰性和陽(yáng)性對(duì)照品 ( 定性測(cè)定 ) , 參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清 ( 定量測(cè)定 ) ; ( 5) 結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液; ( 6) 洗滌液; ( 含吐溫 20磷酸鹽緩沖液 ) ( 7) 酶反應(yīng)終止液 。 ( 1)夾心法; ( 2)間接法; ( 3)競(jìng)爭(zhēng)法; ( 4)雙位點(diǎn)一步法; 雙抗體夾心法 ? 此法常用于測(cè)定抗原 , 將已知抗體吸附于固相載體 , 加入待檢標(biāo)本 (含相應(yīng)抗原 )與之結(jié)合 。 ( 1)雙抗體夾心法 乙肝表面抗原。 將已知抗原吸附于固相載體 , 加入待檢標(biāo)本 (含相應(yīng)抗體 )與之結(jié)合 。 ( 2)間接法 ELISA 競(jìng)爭(zhēng)法 ? 此法可用于抗原和半抗原的定量測(cè)定 , 也可用于測(cè)定抗體 。 ( 3)競(jìng)爭(zhēng)法 黃曲霉素 ELISA測(cè)定中酶的作用 ? 由于酶的催化效率很高 , 間接地 放大 了免疫反應(yīng)的結(jié)果 , 使測(cè)定具有極高的靈敏度 。良好的結(jié)合物 既保持了酶的催化活性 , 也 保持了抗體或抗原的免疫活性 。 酶結(jié)合物一般需經(jīng)離子交換層析或分子篩分離純化 。 ( 1)毒素檢測(cè) ? 真菌毒素是真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物 , 其中的十幾種對(duì)人類危害較大 , 它們一般同時(shí)具有毒性強(qiáng)和污染頻率高的特點(diǎn) 。 它在自然界中分布十分廣泛 , 黃曲霉常常和其他多種微生物在一起 , 生長(zhǎng)在糧食 、 油料作物的種子 、 各種食品和飼料中 。 ? 在對(duì)黃曲霉素 B1(AFT B1)的檢測(cè)中 , 其 檢測(cè)AFT B1的線性范圍 ~ , 靈敏度為 Pg, 整個(gè)測(cè)定過(guò)程僅為 4h。 黃曲霉素 B1 ELISA試劑盒 ? 本試劑盒包括用于定量檢測(cè)黃曲霉素 BG的試劑和方法 。 2022年才得以解決 。 ( 2)農(nóng)藥殘留檢測(cè) ? 酶聯(lián)免疫測(cè)定已成為許多國(guó)際權(quán)威分析機(jī)構(gòu)如AOAC分析農(nóng)藥殘留的首選方法 。 草甘膦的 ELISA檢出下限為 , 與色譜法測(cè)定的結(jié)果一致 。 ( 3)細(xì)菌污染檢測(cè) ? 食品中的有害細(xì)菌數(shù)量達(dá)到一定數(shù)目 ,食用后會(huì)引起各種疾病 。 目前有許多種方法 , 其中通過(guò)制備單克隆抗體分析食品中細(xì)菌的酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)研究最多 , 檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠 。 此外以ELISA技術(shù)為基礎(chǔ)的全自動(dòng)沙門氏菌檢測(cè)系統(tǒng) ,實(shí)現(xiàn)了整個(gè)過(guò)程的自動(dòng)化 , 全程耗時(shí)僅為45min。 李斯特氏菌的快速檢測(cè) ? 在對(duì)李斯特氏菌的快速檢測(cè)中 , 利用三株針對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌 、 無(wú)害李斯特氏菌和西里杰氏李斯特氏菌共同表位的單抗 , 以?shī)A心ELISA法 , 在 48h內(nèi) , 可從人工模擬肉中檢測(cè)下限為 5CFU/g樣品 。 腸道疾病的爆發(fā)和動(dòng)物性食品有很大關(guān)系 ,而肉食品加熱煮制不當(dāng)是引起該疾病爆發(fā)的一個(gè)主要原因 。 ? 當(dāng)用蛋白質(zhì)做指示劑時(shí) , 可制備抗體 , 這種抗體對(duì) 單一蛋白質(zhì) 的天然狀態(tài)或變性狀態(tài)均具有專一性 , 這樣它就可以指示蛋白質(zhì)在加熱過(guò)程中變化 。 目前用的最多的是對(duì)乳酸脫氫酶的免疫檢測(cè) 。 ? 幾種以單克隆抗體為基礎(chǔ)的 ELISA反應(yīng)已得到應(yīng)用 , 可以檢測(cè)出 1%~ 2%的摻假率 。 同時(shí) ,ELISA技術(shù)也可以利用對(duì)熱穩(wěn)定的肌肉抗原來(lái)檢測(cè)加熱處理后的肉摻假情況 。 ( 5)動(dòng)物性食品中藥物殘留檢測(cè) ? 利用 ELISA技術(shù)測(cè)定動(dòng)物性食品中有害殘留成分只是近幾年的事 。 特別是對(duì)豬肉 、 禽肉和水產(chǎn)品中重要禁用獸藥的檢測(cè) 。 檢測(cè)靈敏度可達(dá)到 109, 完全達(dá)到我國(guó)農(nóng)業(yè)部目前的 1 109監(jiān)督檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 。 ( 6) 人畜共患疾病病原體檢測(cè) ?
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