生化實驗05凱氏定氮法(存儲版)
【正文】 →關(guān)閉汽水分離閥， 開始蒸餾 →觀察硼酸 指示劑混合液顏色變化，從顏色變綠起再蒸餾 35min后，將三角瓶液面移離冷凝管下口約 1cm → 繼續(xù)蒸餾 1min左右，結(jié)束蒸餾。 在消化過程中，可分數(shù)次加入少許 H2O2以加速有機物氧化。 動植物組織中的氮包括蛋白氮和非蛋白氮兩大類，主要以有機氮形式存在。 Designed by XK Wang 3 一、原理 在催化劑（如 CuSO K2SO硒粉等）存在的條件下，將植物材料與濃硫酸共熱，有機物氧化分解成 CO2和 H2O，其中的氮轉(zhuǎn)變?yōu)榘?，并進一步生成 (NH4)2SO4，這個過程稱為 消化 。 Designed by XK Wang 8 2. 定容： 消化液冷卻后，沿管壁仔細加入 10mL左右無氨蒸餾水以沖洗管壁 →冷卻后轉(zhuǎn)入 100mL容量瓶，再用少量無氨蒸餾水沖洗消化管數(shù)次，洗滌液一并轉(zhuǎn)入容量瓶 →冷卻后用無氨蒸餾水定容至刻度，混勻后備用。 （ 滴定空白蒸餾液的鹽酸用量一般為 ） Designed by XK Wang 12 W= g（根據(jù)樣品管編號在講臺上查表獲得）； VT= mL。測定 Vc含量，可作為衡量果蔬品質(zhì)指標之一。 V0= mL； VT= mL。 Designed by XK Wang 18 三 、實驗步驟 取 2%草酸 10 mL至蒸發(fā)皿中，用 2,6二氯酚靛酚溶液滴定至粉紅色，并在 30s內(nèi)不褪色為滴定終點，記錄染料用量。用草酸提取 Vc，然后用藍色的堿性 2,6二氯酚靛酚溶液對其進行滴定時， Vc可將 2,6二氯酚靛酚還原成無色。 可將冷凝管下口浸入硼酸 指示劑混合液中檢測清洗效果，當硼酸 指示劑混合液不變色時，表明蒸餾裝置清洗干凈 。開始時溫度可稍低，加熱至管口不再產(chǎn)生泡沫時可逐漸升溫，使消化管內(nèi)液體達到微沸，直到消化液
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