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醫(yī)療器械檢化員微生物培訓(xùn)-免費(fèi)閱讀

  

【正文】 30,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù) (見(jiàn)表 1,例 5)。 生產(chǎn)人員手細(xì)菌總數(shù) ? 將每個(gè)采樣管震打 80次,混勻, 10倍遞減稀釋,每個(gè)稀釋度(取 3個(gè)稀釋度)分別取1ml放于滅菌培養(yǎng)皿(每個(gè)稀釋度傾注 2塊平板),用普通瓊脂培養(yǎng)基作傾注培養(yǎng),置 37℃ 溫箱培養(yǎng) 24h,觀察結(jié)果,取菌落數(shù)為 30~ 300的培養(yǎng)皿計(jì)算,求出平均菌落數(shù)。 校正因子 =1/= 校 正 因 子 計(jì) 算 校 正 因 子 計(jì) 算 ? 同批產(chǎn)品,需抽取 35件,進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn),確定最小、最大及平均回收率和初始污染菌數(shù)。 ? 3注皿:取處理洗脫液 A2ml,分別注入兩個(gè)無(wú)菌平皿中,每平皿1ml。在缺少這些驗(yàn)證的情況下,應(yīng)從產(chǎn)品單元上隨機(jī)選擇幾個(gè)部分作為樣品份額。盡量使用能使試驗(yàn)微生物生長(zhǎng)的最小的培養(yǎng)基的量。 釋出物檢查 無(wú)菌實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證:釋出物檢查 ? 目的:對(duì)未知或可疑的供試品,在進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行方法驗(yàn)證試驗(yàn),以確認(rèn)供試品在該試驗(yàn)條件下無(wú)抑菌活性或其抑菌活性可以忽略不計(jì)。 ? 如果 14以內(nèi)觀察到陽(yáng)性結(jié)果,不必繼續(xù)培養(yǎng)。 ? 接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中, 23~ 28℃ 培養(yǎng) 24~ 48h;用 %無(wú)菌氯化鈉溶液制成10100cfu/ml菌液備用。 ? 菌種應(yīng)有詳細(xì)登記本 , 包括名稱 、 分離日期 、鑒定日期 、 鑒定者 、 主要鑒定性能 , 并注意記錄使用 、 轉(zhuǎn)移及銷(xiāo)毀情況和原因 。 培養(yǎng)基質(zhì)量控制:靈敏度檢查 ? 中國(guó)藥典 2023年版在新增的“藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則”中對(duì)菌種有了較為明確的規(guī)定: ? 允許使用標(biāo)準(zhǔn)菌株和商業(yè)派生菌株 ? 標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)按保藏機(jī)構(gòu)提供的說(shuō)明進(jìn)行復(fù)活 ? 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株應(yīng)進(jìn)行純度和特性確認(rèn) ? 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株建議采用低溫冷凍干燥、液氮貯存或超低溫冷凍保藏的方法 ? 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株可用于制備每月或每周一次轉(zhuǎn)種的工作菌株 ? 冷凍菌株解凍后不得重新冷凍和再次使用 ? 工作菌株不可替代標(biāo)準(zhǔn)菌株,商業(yè)派生菌株僅可用作工作菌株 培養(yǎng)基質(zhì)量控制:靈敏度檢查 菌株傳代基本概念 ? 標(biāo)準(zhǔn)菌株: 由國(guó)內(nèi)或國(guó)際菌種保藏機(jī)構(gòu)保藏的,遺傳學(xué)特性得到確認(rèn)和保證并可追溯的菌株。 麥?zhǔn)媳葷峁艿呐浔? 菌懸液制備(使用麥?zhǔn)媳葷峁埽? ? 【材料】 ? 實(shí)驗(yàn)所需的微生物新鮮培養(yǎng)物如:金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物; ? 無(wú)菌生理鹽水、麥?zhǔn)媳葷峁埽? ? 酒精燈、接種環(huán)、無(wú)菌吸管、平皿。平板接種方法有多種。定期進(jìn)行 BD實(shí)驗(yàn)、 真空泄漏測(cè)試、溫度參數(shù)測(cè)試(空載熱分布、定載熱穿透、滿載熱穿透)、壓力改變速率測(cè)試( GB85992023大型蒸汽滅菌器技術(shù)要求),同時(shí)以生物指示劑驗(yàn)證滅菌效果 , 必須保證物品滅菌后無(wú)菌保證值 SAL小于百萬(wàn)分之一。 ? ,室內(nèi)測(cè)試人員不得多于二人。 ? 。 ? ? 將已制備好的培養(yǎng)皿按要求放置,打開(kāi)培養(yǎng)皿蓋,使培養(yǎng)基表面暴露 ,再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。因此,微生物限度檢查宜在環(huán)境潔凈度 10000級(jí)下的局部潔凈度 100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行;限度檢查實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配有相應(yīng)的人流和物流緩沖間,并定期作環(huán)境監(jiān)測(cè)。 ? 一般情況下,醫(yī)療器械微生物檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有開(kāi)展無(wú)菌檢查、微生物限度檢查等檢測(cè)活動(dòng)的、獨(dú)立設(shè)置的潔凈室(區(qū))或隔離系統(tǒng),并為上述檢驗(yàn)配備相應(yīng)的細(xì)菌(真菌)等實(shí)驗(yàn)室、培養(yǎng)室、文檔處理區(qū)等輔助區(qū)域,同時(shí),應(yīng)對(duì)上述區(qū)域明確標(biāo)識(shí)。 微生物實(shí)驗(yàn) 培訓(xùn) 一、人員資質(zhì)及培訓(xùn)要求 ? 從事醫(yī)療器械微生物檢驗(yàn)工作的人員應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識(shí)的教育背景。 二、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制 ? 【要求】 無(wú)菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度 10000級(jí)下的局部潔凈度 100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行。 二、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制 【 要求 】 ? 菌種處理 、 微生物鑒別和陽(yáng)性對(duì)照室 ? 菌種的處理包括的內(nèi)容比較多 , 如菌種的傳代 、 保藏 、 制備以及培養(yǎng)基促生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) 、 陽(yáng)性對(duì)照 、 微生物方法驗(yàn)證 、消毒劑和防腐劑的效力測(cè)定和對(duì)環(huán)境中分離菌的鑒別等 ,這些實(shí)驗(yàn)過(guò)程中都在處理活的微生物 , 處理不當(dāng)會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染 , 影響其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果 , 因此 , 該室必須與其他實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格分開(kāi);必要時(shí) , 應(yīng)按實(shí)驗(yàn)室性質(zhì)的需要保持對(duì)相鄰實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)壓差;需采取必要的消毒方式確保實(shí)驗(yàn)室潔凈條件合格 ( 如臭氧 , 乳酸熏蒸等 ) , 以凈化層流臺(tái)作為局部 100級(jí)的控制措施 , 最好是使用生物安全柜 ,所有的與活毒菌種相關(guān)的活動(dòng)都應(yīng)在層流臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行 。 ? ? 全部采樣結(jié)束后,將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 ? 、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。 最少采樣點(diǎn)數(shù)目 同時(shí)滿足最少平皿數(shù) 采樣點(diǎn)的布置 ? 采樣點(diǎn)的位置可以同懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)。 三、滅菌控制 ? 所有器具應(yīng)采用可靠方法滅菌 ?置壓力蒸汽滅菌器內(nèi) 121℃ 30 min 或 ?置電熱干燥箱內(nèi) 180℃ 2 h。以下介紹平行劃線法及分區(qū)劃線法。 菌懸液制備(使用麥?zhǔn)媳葷峁埽? ? 【方法】 ? 輕搖標(biāo)準(zhǔn)試管; ? 無(wú)菌操作挑取金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物至無(wú)菌生理鹽水試管(與標(biāo)準(zhǔn)管相同直徑)中混勻,直到濁度與所要求的標(biāo)準(zhǔn)管的濃度相同; ? 序列稀釋已挑取菌落的生理鹽水試管至所需的菌液濃度如: 100cfu/ml。( 0代) ? 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株: 由標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)一次傳代得到的培養(yǎng)物。 ? 各種菌種應(yīng)按規(guī)定時(shí)間定期移種 。 ? 接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜
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