高效液相色譜-20xx-免費(fèi)閱讀
【正文】 進(jìn)樣量為 10μL， 3次進(jìn)樣得蘆丁色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的平均值為 ，計(jì)算樣品中蘆丁的含量。 A 樣品的 k降低， tR降低 B 樣品的 k增加， tR增加 C 相鄰組分的 ?增加 D 對(duì) ?基本無影響 例題 HPLC中的最佳流速 uH與 GC中的最佳流速 uG比較結(jié)果是（ ） A uH＞ uG B uH＜ uG C uH=uG 例題 用 ODS柱分析一有機(jī)弱酸混合物樣品，以某一比 例甲醇一水為流動(dòng)相時(shí)，樣品容量因子較小，若 想使容量因子適當(dāng)增加，較好的辦法是（ ）。H 2O tR↑， k↑ ? 調(diào)節(jié) pH范圍： ~ pH 破壞鍵合相與載體的結(jié)合 pH 腐蝕柱子 3） 適用：極弱酸堿物質(zhì) pH=3~7弱酸； pH=7~8弱堿；兩性化合物 分離類型選擇 第四節(jié) 影響分離的因素 一、分離度 二 、 流動(dòng)相 三 、 洗脫方式 1． 22114 kknR???????uCAH ???流動(dòng)相采用粘度小、低流速的勻的固定相：采用粒度小、填充均n39。第十三章 高效液相色譜法 HPLC 分析化學(xué) (下，第三版 ) 高效液相色譜法： 以氣相色譜為基礎(chǔ)，在經(jīng)典液相 色譜實(shí)驗(yàn)和技術(shù)基礎(chǔ)上建立的一種液相色譜法 主要內(nèi)容 一、概述 二、基本理論及條件選擇 三、各類高效液相色譜法 四、影響分離的因素 五、高效液相色譜儀 六、超效液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介 七、 HPLC定量分析方法學(xué)考察 八、 HPLC應(yīng)用 第一節(jié) 概述 一 、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 二 、 HPLC與 GC差別 三 、 高效液相色譜儀流程圖 四 、 特點(diǎn) 一、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 ? 主要區(qū)別：固定相差別 ， 輸液設(shè)備和檢測(cè)手段 1． 經(jīng)典 LC：僅做為一種分離手段 柱內(nèi)徑 1~3cm， 固定相粒徑 100μm 且不均勻 常壓輸送流動(dòng)相 柱效低 （ H↑， n↓） 分析周期長(zhǎng) 無法在線檢測(cè) 2． HPLC：分離和分析 柱內(nèi)徑 2~6mm， 固定相粒徑 10μm（ 球形 ， 勻漿裝柱 ） 高壓輸送流動(dòng)相 柱效高 （ H↓， n↑） 分析時(shí)間大大縮短 可以在線檢測(cè) 二、 HPLC與 GC差別 ? 相同：兼具分離和分析功能 ， 均可以在線檢測(cè) ? 主要差別：分析對(duì)象的差別和流動(dòng)相的差別 1． 分析對(duì)象 GC：能氣化 、 熱穩(wěn)定性好 、 且沸點(diǎn)較低的樣品 ， 高沸點(diǎn) 、 揮發(fā)性差 、 熱穩(wěn)定性差 、 離子型及 高聚物的樣品不可檢測(cè) 占有機(jī)物的 20% HPLC：溶解后能制成溶液的樣品 ， 不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制 分子量大 、 難氣化 、 熱穩(wěn)定性差及高分子 和離子型樣品均可檢測(cè) 用途廣泛 ， 占有機(jī)物的 80% 續(xù)前 2． 流動(dòng)相差別 ? GC：流動(dòng)相為惰性氣體 ? 組分與流動(dòng)相無親合作用力 ， 只與固定相作用 ? HPLC：流動(dòng)相為液體 ? 流動(dòng)相與組分間有親合作用力 ， 為提高柱的選擇性 、 改善分離度增加了因素 ， 對(duì)分離起很大作用 ? 流動(dòng)相種類較多 ， 選擇余地廣 ? 流動(dòng)相極性和 pH值的選擇也對(duì)分離起到重要作用 選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相 可以增大分離選擇性 3． 操作條件差別 GC：加溫操作 HPLC：室溫；高壓 （ 液體粘度大 ， 峰展寬小 ） 三、高效液相色譜儀流程圖 1． 貯液罐 （ 濾棒 ， 可濾去顆粒狀物質(zhì) ） 2． 高壓泵 （ 輸液泵 ） 3． 進(jìn)樣裝置 4． 色譜柱 ——分離 5． 檢測(cè)器 ——分析 6． 廢液出口或組分收集器 7． 記錄裝置 續(xù)前 四 、 HPLC的特點(diǎn)和應(yīng)用 “三高 ” “ 一快 ”
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