植物組織培養(yǎng)技術(shù)及其在育種中的應(yīng)用-免費閱讀
【正文】 （四）基因工程 （一）基因工程的含義 按照人們的愿望， 進行嚴密的設(shè)計， 通過體外 DNA重組技術(shù) 和 DNA轉(zhuǎn)移技術(shù)，有目的地改造生物種性， 使現(xiàn)有物種在短時間內(nèi)趣于完善， 創(chuàng)造出新的生物類型。 5. 原生質(zhì)體的融合 ? 化學(xué)法誘導(dǎo)融合 1) 按比例混合雙親原生質(zhì)體 2) 滴加 PEG 3) 滴加高鈣高 PH值溶液 4) 洗滌原生質(zhì)體溶液 5) 離心獲得原生質(zhì)體溶液 6) 篩選雜種細胞 7) 再生雜種細胞。 此時，細胞外僅由細胞膜包裹， 呈圓形只有在高滲溶液中才能相對穩(wěn)定。一般說來 ， 愈傷組織如果先形成芽 ， 隨后根自然會發(fā)生 ， 如果先有根 ， 以后不一定會出芽 。 矮小性； 不育性； 全顯性。 植物組織培養(yǎng)所需營養(yǎng)與環(huán)境條件 （ 1）無機營養(yǎng) 大量元素： 一般是指濃度大于 (N) 、磷 (P) 、鉀 (K) 、鈣 (Ca) 、鎂 (Mg) 、硫 (S) 。亦即人們根據(jù)科學(xué)設(shè)計改變細胞的遺傳基礎(chǔ)，通過無菌操作，大量培養(yǎng)細胞、組織乃至完整個體的技術(shù)。生物技術(shù)是一門綜合性學(xué)科。 植物組織培養(yǎng)的基本操作 ?無菌操作技術(shù) ?細胞培養(yǎng)技術(shù) ?原生質(zhì)體融合技術(shù) ?接種用具的滅菌 接種前，必須把用具放入接種室或箱內(nèi)，初用接種室或箱時要用甲醛（一般市售分析純的有效成份為 3638% 熏蒸 5小時以上再開紫外光燈照射 4060分鐘，以后在每次接種之前，把要接種的試管或三角瓶放入接種室（箱）內(nèi)，用 5%的煤酚瓶皂溶液即來蘇爾（一般市售的有效成份為 4753%）或 5% 的石灰炭酸液噴霧消毒，再打開紫外光燈照 2040分鐘，這樣消毒后，再經(jīng) 3040分鐘便可進行接種。 ? 赤霉素 （ GA） ：脫落酸（ ABA） 、乙烯利（ CEDP）。 ?花粉發(fā)育時期的鑒定 適宜的花粉發(fā)育時期對于提高花粉誘導(dǎo)愈傷組織分化的頻率是很重要的 ， 為此 ， 進行花藥培養(yǎng)前 ， 要用顯微鏡進行花粉發(fā)育時期的鑒定 。 單倍體育種程序： 材料采集 ? 接種培養(yǎng) ? 誘導(dǎo)愈傷組織 ?獲得再生植株 ? 染色體加倍 ? 幼苗培育和品種選擇 （二）原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交 常規(guī)雜交育種由于物種間難以逾越的天然屏障而舉步維艱。 1960， G. Barski發(fā)現(xiàn) , 題細胞原生質(zhì)體能融合在一起形成單核的、并能進行分裂的雜種細胞； 1972， 。
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