植物組織培養(yǎng)技術(shù)及其在育種中的應(yīng)用-文庫吧資料
2024-08-17 17:34本頁面
【正文】 ? 電擊融合； ? 篩選雜種細(xì)胞； ? 雜種細(xì)胞再生和完整植株的形成。 4. 原生質(zhì)體的制備 （ 1）取材與滅菌 （ 2）酶解 (纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶 ) （ 3）分離 （沉淀法、漂洗法、滴洗法） （ 4）洗滌 （ 5）鑒定（形態(tài)觀測(cè)、活性鑒定） 原生質(zhì)體的培養(yǎng)： 細(xì)胞壁再生； 細(xì)胞分裂； 植株再生。 1960， G. Barski發(fā)現(xiàn) , 題細(xì)胞原生質(zhì)體能融合在一起形成單核的、并能進(jìn)行分裂的雜種細(xì)胞； 1972， 。 ?原生質(zhì)體在一定條件下可以融合成雜種細(xì)胞，開辟了一條新的育種途徑。 原生質(zhì)體經(jīng)適當(dāng)處理，可與其他細(xì)胞融合成新的體細(xì)胞。 1. 原生質(zhì)體的概念 植物細(xì)胞原生質(zhì)體是指那些以去除全部細(xì)胞壁的細(xì)胞。 單倍體育種程序： 材料采集 ? 接種培養(yǎng) ? 誘導(dǎo)愈傷組織 ?獲得再生植株 ? 染色體加倍 ? 幼苗培育和品種選擇 （二）原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交 常規(guī)雜交育種由于物種間難以逾越的天然屏障而舉步維艱。 在轉(zhuǎn)移愈傷組織時(shí)，應(yīng)注意其極性，原來向上的一但轉(zhuǎn)移后的一但轉(zhuǎn)移后仍應(yīng)向上，否則會(huì)影響生長(zhǎng)，同時(shí)在轉(zhuǎn)移時(shí)，就避免沾帶過多的培養(yǎng)基。 因此 ，掌握芽分化的條件是十分重要的 。 （ 3） 從愈傷組織分化成苗 誘導(dǎo)愈傷組織分化出根 、 莖 、 葉的方法是在愈傷組織長(zhǎng)到 13毫米大小 （ 如小米大 ） 時(shí) ， 即可轉(zhuǎn)移到誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上 ， 促使分化長(zhǎng)出植株 。 ?花粉發(fā)育時(shí)期的鑒定 適宜的花粉發(fā)育時(shí)期對(duì)于提高花粉誘導(dǎo)愈傷組織分化的頻率是很重要的 ， 為此 ， 進(jìn)行花藥培養(yǎng)前 ， 要用顯微鏡進(jìn)行花粉發(fā)育時(shí)期的鑒定 。 第二是在離體培養(yǎng)的花藥中，花粉形成愈傷組織，再?gòu)挠鷤M織分化出單倍體植株。 2. 單倍體植物在育種上的意義 1. 單倍體植物的直接利用； 2. 克服雜種分離，縮短育種年限； 3. 快速獲得異花授粉植物的自交系； 4. 單倍體植物的誘變育種； 5. 克服遠(yuǎn)緣雜種不孕性與不穩(wěn)定的現(xiàn)象； 3. 單倍體植株和愈傷組織的培養(yǎng) （ 1） 單倍體材料的采集 單倍體育種的首要問題是如何獲得大最的單倍體植株 。 植物組織培養(yǎng)經(jīng)歷的五個(gè)階段： （ 1） 預(yù)備階段 ?外植體的獲得； ?接種材料的消毒處理； ?配制適宜的培養(yǎng)基； （ 2） 誘導(dǎo)去分化階段 （ 3）繼代增殖階段 （
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