植物組織培養(yǎng)-免費(fèi)閱讀
【正文】 :13:1904:13:19February 2, 2023 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 2023年 2月 上午 4時(shí) 13分 :13February 2, 2023 1少年十五二十時(shí)，步行奪得胡馬騎。 2023年 2月 2日星期四 4時(shí) 13分 19秒 04:13:192 February 2023 1做前，能夠環(huán)視四周；做時(shí)，你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線向前。 2023年 12月 14日 靜夜四無(wú)鄰，荒居舊業(yè)貧。 4 mo1 ／ L 蔗糖的 B5培養(yǎng)基中溶解 30％ (w／ v)甘油， 35％ (W／ v)乙二醇和 15％ (w／ V)DMSO，在25℃ 停留 5分鐘，或者在 0℃ 停留 15分鐘，期間更換 2次溶液。然后將 莖尖分生組織轉(zhuǎn)移到固體 B5分化培養(yǎng)基 上。在實(shí)體解副鏡下進(jìn)行操作。 (6)洗滌后立即 轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上進(jìn)行再培養(yǎng) ：或者不經(jīng)洗滌，直接轉(zhuǎn)移到半固體培養(yǎng)基上，或漂浮于液體培養(yǎng)基的濾紙上培養(yǎng)。 七、愈傷組織及懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的超低溫保存 2．組織和細(xì)胞超低溫保存實(shí)驗(yàn)程序 (1)將培養(yǎng) 5一 7天的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，或培養(yǎng) 10一 15天的愈傷組織 收集于保存試管中，每管 。 六、超低溫保存后細(xì)胞活力、存活率及遺傳特性的觀測(cè) 4. 遺傳性狀的分析： 1)細(xì)胞全能性的保持：形態(tài)發(fā)生能力的表達(dá)情況。 通常采用快速化凍方法，即將液氮保存后的材料在 37— 40℃ 的溫水浴中化凍。降到 — 70℃ 左右 ，隨即浸入液氮，或者以此種速度連續(xù)降到一 196℃ 。 冷凍保護(hù)劑的作用： (1) 降低冰點(diǎn)，促進(jìn)過(guò)冷卻和“玻璃態(tài)化”的形成； (2) 提高溶液的粘滯性，阻止冰晶的生長(zhǎng)， (3) DMSO可使膜物質(zhì)分子重新分布，增加細(xì)胞膜的透性，在溫度降低時(shí)，加速細(xì)胞內(nèi)的水流到細(xì)胞外結(jié)冰，防止細(xì)胞內(nèi)結(jié)冰的傷害； (4) 穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)的大分子結(jié)構(gòu)，特別是膜結(jié)構(gòu)，阻止低溫傷害，非透性保護(hù)劑的主要作用在質(zhì)膜上。 1．材料的特性； 基因型、抗凍性、器官組織和細(xì)胞年齡、生理狀態(tài)。 (3) 將材料裝入試管，并隨即插入冰浴中。因?yàn)槔鋬霰Ｗo(hù)劑容易同溶液中的水分子結(jié)合，從而降低冰點(diǎn)，減少冰晶的形成 ，并且通過(guò)其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷，細(xì)胞得以在超低溫條件下保存。 水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。 動(dòng)物細(xì)胞、組織、胚胎 植物細(xì)胞、組織、器官 一、超低溫種質(zhì)保存的發(fā)展歷史： 1. 保持細(xì)胞培養(yǎng)物的遺傳穩(wěn)定性； 2. 2. 長(zhǎng)期保存植物的種質(zhì)資源 。第九章 植物細(xì)胞、組織及器官的超低溫保存 植物種質(zhì)資源是植物育種的基礎(chǔ)，種質(zhì)資源的保存方式有 原生境保存和非原生境保存 ，非原生境保存包括移地保存（種質(zhì)圃或植物園保存）、種質(zhì)（種子）庫(kù)保存、離體保存等。 3. 長(zhǎng)期保存農(nóng)作物的優(yōu)良品種及其育種親本材料的種質(zhì)； 4. 建立長(zhǎng)期保存的莖尖分生組織種質(zhì)庫(kù)及無(wú)病毒的原種； 5. 5 . 保存實(shí)驗(yàn)材料，防止再培養(yǎng)中遺傳變異。如果將細(xì)胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細(xì)胞內(nèi)外的水分都會(huì)結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡。 在復(fù)蘇時(shí)，一般以很快的速度升溫， 12分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫，細(xì)胞內(nèi)外不會(huì)重新形成較大的冰晶，也不會(huì)暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過(guò)長(zhǎng)的時(shí)間，從而無(wú)冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生 ，凍存的細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。 (4) 加入 0℃ 預(yù)冷的冰保護(hù)劑，在 0℃ (冰浴中 )放置30一 45分鐘。 2．預(yù)處理 目的：
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1