動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)-免費(fèi)閱讀
【正文】 ml胰蛋白酶液，翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使消化液浸泡細(xì)胞面。通常，原代細(xì)胞按l：2分種傳代。當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)滿(mǎn)后就需要將其稀釋分種成多瓶，細(xì)胞才能繼續(xù)生長(zhǎng)。在胸廓正中線中位處，用兩把眼科彎鑷(第1套器械)夾起皮膚，向左右兩側(cè)頭端撕拉，膈肌部位皮膚向尾端拉，皮膚外翻固定，軀干部肌肉暴露(注意：不要使表皮面接觸胸腹肌)。，包括試劑名稱(chēng)、濃度、配制日期、組號(hào)。％胰蛋白酶液的配制方法如下，攪拌均勻，等待過(guò)濾除菌（三）Hanks液（已提前配制好），等待過(guò)濾除菌四．過(guò)濾除菌及分裝注射器安裝濾器，吸取各類(lèi)試劑后分裝至相應(yīng)瓶中五．試劑存放及器材整理所有分裝試劑置于4℃冰箱中保存，已備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。這樣能使任何可能存在的液體得以與周?chē)魵庖韵嗤乃俣壬?，而不至于激烈的沸騰。隨后單個(gè)或幾個(gè)一起用紙包好。儀器與設(shè)備：各種型號(hào)培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、醫(yī)用解剖用具（解剖剪，解剖鑷）倒置顯微鏡，槍頭一盒，100目及200目銅濾網(wǎng)各3個(gè)、培養(yǎng)皿大小各一個(gè)、100ml培養(yǎng)瓶及塞子、1000毫升量筒2個(gè)、100毫升量筒2個(gè)、酒精一壺、玻璃棒幾個(gè)、 高壓滅菌鍋、無(wú)菌操作臺(tái)、牛皮紙1張/組，紙繩一卷/組、記號(hào)筆一個(gè)/組，注射器、過(guò)濾器。一般蒸氣消毒30分鐘。一般來(lái)說(shuō)，濃度越大、溫度越高、作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞的分離能力也越大，但超過(guò)一定限度就會(huì)損傷細(xì)胞。按一次用量或一周內(nèi)用量挑選小包裝瓶。本實(shí)驗(yàn)主要采用胰蛋白酶消化法，對(duì)初生乳鼠肺組織進(jìn)行原代培養(yǎng)。 取不同器官分別在100及200目濾器上研磨，并吸取2mlHanks液沖洗至濾器的燒
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