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正文內(nèi)容

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(留存版)

  

【正文】 力在7分鐘左右均勻地下降到零。實(shí)驗(yàn)步驟:一.儀器準(zhǔn)備玻璃器皿簡(jiǎn)單刷洗并甩干金屬濾網(wǎng)剪切,并與合適燒杯配套組合為濾器,槍頭裝盒二.儀器消毒:(一)包裝包裝時(shí)手指與器材接觸面積要小,手指不能觸及器材的使用端。%,作用溫度37℃或室溫。實(shí)驗(yàn)材料:材料;4周齡新生乳鼠藥品:DMEM培養(yǎng)液,小牛血清(FCS),%胰蛋白酶,器材:培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)皿1套/組,移液槍?zhuān)糇?把/組,鑷子2把/組,濾器,酒精燈設(shè)備:離心機(jī)、二氧化碳培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超凈工作臺(tái)、二氧化碳培養(yǎng)箱實(shí)驗(yàn)步驟: 將4周齡新生乳鼠斷髓后,將尾巴提起,鼠身浸入75%酒精的燒杯中旋轉(zhuǎn)3 s左右(默數(shù)5下),取出放在滅菌的培養(yǎng)皿中,移入工作臺(tái)內(nèi)。原代培養(yǎng)的首次傳代稱(chēng)為第二代,是建立細(xì)胞系的關(guān)鍵時(shí)期。終止消化的方法為:加培養(yǎng)液,用吸管頭輕輕地、有序地吹打瓶壁細(xì)胞(從瓶底到瓶口,從瓶的一側(cè)到另一側(cè),注意吹打邊角細(xì)胞),細(xì)胞從支持物上脫落,并彼此分離懸浮于水中,液體混濁。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實(shí)驗(yàn)所需。原代細(xì)胞離體時(shí)間短,具有二倍體遺傳性,在一定程度上能反映體內(nèi)的生長(zhǎng)特性,很適合作藥物測(cè)試、細(xì)胞分化和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)研究。(二)胰蛋白酶液 胰蛋白酶是一種黃白色粉末,水解蛋白質(zhì)時(shí)作用于與賴(lài)氨酸或精氨酸相連接的肽健,除去細(xì)胞間粘蛋白及糖蛋白,影響細(xì)胞骨架.從而使細(xì)胞分離。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)實(shí)驗(yàn)報(bào)告小組成員 :孫顯鵬 孫夏慧 孫崇軍 劉萬(wàn)喜 石仁興 劉旭峰 李亞騰 馬英達(dá)
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