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動(dòng)物組織培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的基本條-免費(fèi)閱讀

  

【正文】 ? 慶大霉素:每毫升 100單位 —— 方便、廣譜、穩(wěn)定。 無(wú)血清培養(yǎng)基尚處于研究階段,難以推廣。 ? 一般說(shuō)來(lái),含 5%小牛血清的培養(yǎng)基對(duì)大多數(shù)細(xì)胞可以維持細(xì)胞不死,但支持細(xì)胞生長(zhǎng)一般需加 10%血清. ? 對(duì)于血清支持細(xì)因生長(zhǎng)的生物學(xué)效應(yīng)已得到證明,但對(duì)血清中的復(fù)雜成分至今尚未完全清楚. ? 血清中不僅存在促細(xì)胞生長(zhǎng)因子,同對(duì)也存在細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子或毒性因子,因此在含血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞所反映的生物學(xué)特性是細(xì)胞和復(fù)雜血清因子的綜合反應(yīng)。 ? 易發(fā)生支原體污染 合成培養(yǎng)基: 合成培養(yǎng)基是根據(jù)細(xì)胞生存所需物質(zhì)的種類(lèi)和數(shù)量,用人工方法模擬合成的。 ? ? 胰蛋白酶液濃度 越高 , 作用越強(qiáng) , 但超過(guò)一定限度會(huì)損傷細(xì)胞 。層流凈化細(xì)胞培養(yǎng)室的總體要求:經(jīng)濟(jì)、有序、高效、安全。 紫外燈 : 紫外線(xiàn)消毒 。初效空氣過(guò)濾器、高效空氣過(guò)濾器、阻尼層、燈具等組成,外殼為不銹鋼或彩鋼板。 傳遞窗 : 該裝置是一種潔凈室的輔助設(shè)備,主要用于潔凈區(qū)與潔凈區(qū),潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間小件物品的傳遞,以減少潔凈室的開(kāi)門(mén)次數(shù),把對(duì)潔凈區(qū)的污染降低到最低程度。 PB系列傳遞窗按用途分為標(biāo)準(zhǔn)型和生物潔凈型兩種。該產(chǎn)品既可懸掛,又可地面支撐,結(jié)構(gòu)緊湊,使用方便。 主要用于培養(yǎng)室 空氣 、 操作臺(tái) 、 塑料培養(yǎng) 皿和培養(yǎng)板等表面消毒 電熱干燥箱: 干熱消毒( 160 ℃ , 2小時(shí))。初步制定相關(guān)制度如下: 準(zhǔn)入制度: 1)必須取得實(shí)驗(yàn)室相關(guān)實(shí)驗(yàn)技能考試合格方可進(jìn)入層流凈化室; 2)在本室工作的實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守本室工作守則,外來(lái)人員在進(jìn)入凈化室工作之前,必須接受培訓(xùn); 3)沒(méi)有經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的人員不得單獨(dú)進(jìn)入凈化室工作; 4)進(jìn)入凈化室后要保持安靜,不得大聲喧嘩。 ? 胰蛋白酶是一種黃白色 粉末 , 用無(wú) Ca2+、 Mg2+的 PBS緩沖液配制常用的胰蛋白酶液濃度是 % 。目前已設(shè)計(jì)出許多種培養(yǎng)基,如 TC19 MEM、RPMI16 DMEM等。 ? 在生長(zhǎng)因子、蛋白質(zhì)工程、基因表達(dá)調(diào)控等研究領(lǐng)域,迫切需要用無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞. ? 無(wú)血清培養(yǎng)基的主要研制策略:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中補(bǔ)充各種必需因子,如 激素、生長(zhǎng)因子 、 結(jié)合蛋白 、 貼壁和擴(kuò)展因子 等。 目前,絕大多數(shù)人工合成培養(yǎng)基使用時(shí)還需添加血清。 ? 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 80%一 95% ? 血清 5%一 20%
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