【正文】 ● 如果不知患者的白細(xì)胞數(shù)，則每微升血以 8000個(gè)白細(xì)胞計(jì)數(shù) (國際標(biāo)準(zhǔn) ) 。 當(dāng)全血膜中出現(xiàn)少數(shù)環(huán)狀體時(shí)，且形態(tài)不典型，則最好間隔數(shù)小時(shí)后再取血檢查，如此時(shí)無間日瘧則可判為惡性瘧。各期瘧原蟲在發(fā)育中，大小滋養(yǎng)體明顯的阿米巴樣運(yùn)動(dòng)，其他期僅有輕微運(yùn)動(dòng)； 在厚血膜中，各期瘧原蟲的體積都略為縮小，其中只有大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變，而裂殖體和配子體的形態(tài)則無明顯變化。 ● 主要發(fā)生在晚秋及初冬，無復(fù)發(fā)。 由生活史容易看出，瘧原蟲的主要致病時(shí)期是紅細(xì)胞內(nèi)期原蟲； 主要是指紅細(xì)胞內(nèi)期的無性體 —— 小滋養(yǎng)體到成熟裂殖體，而不是紅 細(xì)胞內(nèi)期的無性體 —— 配子體。 ● 固定薄血膜時(shí)不要將甲醇觸碰到厚血膜 ● 沖洗染液時(shí)，不要沖走厚血膜。 （ 5）染色時(shí)間 染色時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋濃度和氣溫而適當(dāng)增減。 外觀吉氏染色血片 影響染色效果的因素 血片染色好壞除與玻片清潔度 、 血片制作質(zhì)量和染色技術(shù)等有關(guān)外 ， 還受到以下因素的影響： （ 1） 染劑 、 溶劑的質(zhì)量 染料 、 甲醇和甘油必須用分析純 ， 且在配制時(shí)所用的器具必須干凈而無水份 。 單張血片染色 ：將處理好的血膜，加姬氏母液 12滴 ，加中性蒸餾水 1530滴 ，染色 30分鐘左右，然后用清水輕輕將片上的染液沖洗干凈，晾干鏡檢。 姬氏染液母液配置方法 取姬氏粉 置于研缽中 ， 加 25ml甘油 充分研磨 ， 倒入 60或 100ml帶有玻塞的 有色 玻瓶中 。 組成紅 、 白細(xì)胞和瘧原蟲等蛋白質(zhì)的氨基酸電離出的帶正電荷的 NH3+和帶負(fù)電荷的 COO ， 與多色染劑有色基團(tuán)所帶的陰 、 陽離子相結(jié)合 ， 從而使紅 、 白細(xì)胞和瘧原蟲被染上不同的顏色 。夏天標(biāo)本盡可能 2448h內(nèi)固定染色；冬天也不能超過 72h。 ：每位選手滿分 100分，其中理論競賽 20分，技能競賽 80分；技能競賽中，制片染色 15分， 鏡檢讀片 60分， 顯微鏡使用與維護(hù) 5分。 作為標(biāo)本的血片每張玻片涂厚 、 薄血膜各 1個(gè)；門診和發(fā)熱病人血片每片 1人 ， 涂 2個(gè)厚血膜 1個(gè)薄血膜 ， 以防血膜脫落而影響檢查； 標(biāo)本片 發(fā)熱病人血片 標(biāo)簽 各種不同的瘧疾血片涂制法： 標(biāo)準(zhǔn)血片 （ 1人） 門診發(fā)熱病人血片 （ 1人） 居民普查血片 （ 2人） 厚薄血膜的標(biāo)準(zhǔn) ●厚血膜血量適宜，不宜過多或過少 。推制時(shí)速度要均勻，血滴大小、推片與載玻片之間夾角大小及展開血膜的速度快慢等常影響血膜的厚薄。 惡性瘧較理想的取血時(shí)間是在發(fā)作后至 20h內(nèi)取血 ， 初發(fā)患者退熱后常查不到原蟲 。凡是瘧疾 ， 最終定能查到瘧原蟲 ， 不存在沒有瘧原蟲的瘧疾 。 （三）瘧疾的癥狀主要是發(fā)冷、發(fā)熱、出汗，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡。 2022年 4月 25日為首個(gè)世界瘧疾日 。 衛(wèi)生部結(jié)合我國實(shí)際情況 ， 決定將 每年 4月 26日作為“ 全國瘧疾日 ” 。 （四）預(yù)防瘧疾最有效的辦法是防止蚊蟲叮咬。 顯微鏡檢查是唯一可鑒別4種瘧原蟲的方法； 因此下面我重點(diǎn)介紹一下瘧原蟲的鏡檢技術(shù) 。 血膜的制作 （取血操作） 在制作血片前，首先要核對患者的姓名、年齡和住址。制成的薄血膜應(yīng)在玻片上形成平鋪的血細(xì)胞，細(xì)胞之間互相接觸而不相互重疊。 ●薄 血膜平整，無皺折和空泡，紅細(xì)胞單層排列。 將來咱們省內(nèi)競賽內(nèi)容及分值比例參考該標(biāo)準(zhǔn)。放置時(shí)間越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。 瘧原蟲和白細(xì)胞的胞漿被染成藍(lán)色 ， 紅細(xì)胞 、 瘧原蟲和白細(xì)胞核被染成紫紅色 。 在研缽中加少量甲醇 ， 洗去甘油濃液混入瓶內(nèi) ， 至 25ml甲醇 洗凈缽中甘油染液為止 ， 塞緊瓶塞 ， 充分搖勻 ， 置于 55—60℃ 水浴中或溫箱內(nèi) 24h或室溫內(nèi) 3—5天 ， 多加搖動(dòng) ， 即成原液 。 較理想的染色結(jié)果是 紅細(xì)胞為淡紅或淡紫紅色 ， 瘧原蟲的胞質(zhì)呈藍(lán)色 ， 核為紫紅色 ， 瘧色素為棕褐色 。 （ 2） 染液的新舊 染液存放時(shí)間越久 ， 染色力越強(qiáng) 。 染色時(shí)間長染色效果好，反之較差。 如何確定瘧原蟲血片為陰性 ● 檢查全部厚血膜未查見瘧原蟲。 瘧疾全球流行，惡性瘧約占全世界瘧疾發(fā)病總數(shù)的 50%，間日瘧約占全世界瘧疾發(fā)病總數(shù)的 43%。 卵形瘧 ● 又稱蛋形瘧原蟲， 在我國已基本消滅。 厚血膜惡性瘧小滋養(yǎng)體 惡性瘧環(huán)狀體在發(fā)育不同階段，其個(gè)體大小有很大變化。 容易鑒別的混合感染 1）同一血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧各期原蟲和惡性瘧雌雄配子體。 白細(xì)胞瘧原蟲密度計(jì)數(shù)法（ WHO推薦） 白細(xì)胞瘧原蟲計(jì)數(shù)法舉例 ● 假設(shè)計(jì)數(shù) 200 WBC中有 35個(gè)瘧原蟲，在不知患者白細(xì)胞數(shù)的情況下，以每微升血8000個(gè)白細(xì)胞為數(shù) , 由此計(jì)算出每微升血液瘧原蟲密度為 ： 35（原蟲數(shù)） x 8000247。 計(jì)數(shù)的白細(xì)胞數(shù) = 瘧原蟲數(shù) /μl血。 當(dāng)血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧原蟲時(shí)，此時(shí)應(yīng)注意觀察全血膜有無惡性瘧的配子體，如無可判為間日瘧，如有可判為混合感染。 將（未）成熟大配子體 與 成熟大滋養(yǎng)體 (核分裂前，剛要進(jìn)入裂殖體前期 )的形態(tài)鑒別 蟲體大小 :幾乎充滿被寄生的紅細(xì)胞 核 :一個(gè)，較大且致密，周圍有一圈空白的不染色帶 胞漿 :邊緣清楚，不含空泡 瘧色素 :顆粒較多較粗，均勻散在 蟲體大小 :不超過被寄生紅細(xì)胞的3/4 核 :一個(gè)，延長呈帶狀，周圍無明顯的不染色帶 漿 :邊緣不整齊，多有空泡 瘧色素 :顆粒較少較細(xì)，分布不均勻 厚血膜中瘧原蟲的形態(tài) 厚血膜由于用血量較多，涂制的血膜小，紅細(xì)胞重疊且干燥慢，致使蟲體皺縮，空泡消失，胞漿變形，其形態(tài)改變的程度與瘧原蟲運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)弱、空泡有無和大小有關(guān)。 三日瘧 ● 三日瘧在我國已基本消滅。在蚊體內(nèi)進(jìn)行有性生殖。 ● 配置母液時(shí)過濾可除去雜質(zhì)顆粒，有助于提高鏡檢質(zhì)量。 影響染色效果的因素 （ 4）染液的稀釋濃度 染液的濃度高其著色就快而深，從而瘧原蟲寄生紅細(xì)胞的薛氏點(diǎn)粗大顯著，但顏色常偏堿；染液濃度過低則染色時(shí)間