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蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾ppt課件-免費(fèi)閱讀

  

【正文】 N H C H CON HSSC H 2C H 2C HN H CON H還原劑 胱氨酸 N H C H CON HS HC H 2半胱氨酸 C H 2 C H 2N HN H C H CON HSN H 2C H 2C H 2C H 2S氨乙酰 半 胱氨酸基 環(huán)乙烯亞胺 N H C H CON HO HC H 2XClN H C H CON HO XC H 2S HN H 2 C H 2 C H 2絲氨酸基 (二)化學(xué)裂解 用化學(xué)方法裂解肽鍵是常用方法。 ,產(chǎn)生自由基離子,再與分子氧反應(yīng),形成蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物。 合成具有兩個(gè)反應(yīng)基的嘌呤 核苷酸衍生物,它既含鹵代 烷基部分又含二羰丁基部分, 不僅對(duì)能與鹵代烷反應(yīng)的側(cè) 鏈有專一性,還對(duì)精氨酸殘 基有專一性。 第五節(jié) 親和標(biāo)記 親和標(biāo)記:部位專一性標(biāo)記,是利用酶和底物的親和性,使用與酶底物類似的修飾劑,對(duì)酶活性部位上的氨基酸殘基進(jìn)行共價(jià)標(biāo)記。 當(dāng)交聯(lián)劑一端的反應(yīng)基團(tuán)與蛋白質(zhì)作用之后,經(jīng)光照另一端則產(chǎn)生一個(gè)反應(yīng)活性部分,這部分即可是碳烯,也可是氮烯。 (四)反應(yīng)活性部分 可以在某種程度上控制交聯(lián)劑的反應(yīng)部位,可以通過交聯(lián)劑反應(yīng)活性部位的疏水性、親水性或電荷來(lái)控制反應(yīng)。 羥胺不能使雙取代物發(fā)生可逆反應(yīng),而是清除咪唑環(huán)。 NHHONCN NHONCN C H 2 C O O NHONCNC H 2 C O O +NHONCNC H 2 C O O C H 2 C O O 1羧乙基組氨酸 3羧乙基組氨酸 1, 3二羧乙基組氨酸 HENZNN + C C H 3CC H 2OOOOO C H 2 C H 3pH 4~ 7 +HOC H 2C H 3 C O 2+ 焦碳酸二乙酯 碘乙酸 I C H 2 C O O + I C H 2 C O O +C C H 3C H 2E N ZNN OO用碘乙酸烷化組氨酸 殘基可得單取代或雙 取代衍生物。 E N ZOCO+HNNCRRH+++ C+E N Z HHONCON RRC+E N Z HHONCON RR+ HX E N Z OCX C+ HHNON RR H +++ C+E N Z HHONCON RRCHNON RRHE N ZOC ++碳二亞胺 形成相應(yīng)酰胺 重排 四、巰基的修飾 由于半胱氨酸時(shí)蛋白質(zhì)中反應(yīng)性最強(qiáng)的殘基,所以很多試劑可用來(lái)修飾巰基側(cè)鏈。 馬來(lái)酸酐 E N Z C H 2 HS C O O H gC l+ E N Z C H 2 S C O O H gH+++Cl對(duì)氯汞苯甲酸 +N ( C H 3) 2S O 2 N H C H C O O HC H 2 S H g+ S汞 N5二甲氨基萘磺酰半胱氨酸 E N ZSN ( C H 3) 2S O 2 N H C H C O O HC H 2 S H gHENZ S(四) 5, 5′二硫雙硝基苯甲酸( DTNB)也常用于修飾 巰基 ,它與半胱氨酸形成混合二硫化物。 (二)各種
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