【正文】 HE N ZNN + I C H 2 C O O pH﹥ E N Z C H 2N N H ++C O O I +組氨酸 C H 3E N Z SI C H 2 C O O +pH=2～ C H 3C H 2E N Z + +SC O O I N H 2E N Z I C H 2 C O O +pH= 甲硫氨酸 HN C H 2 HE N Z ++C O O I +（二） 2類試劑能與 巰基 形成對(duì) 酸穩(wěn)定 的衍生物，而與其它基團(tuán)形成的產(chǎn)物則對(duì) 酸不穩(wěn)定 。 它氧化吲哚基成為羥吲哚衍生物。兩端間的間隔基團(tuán)是（ CH2） n OCN H 2( C H 2 ) nC lC H 3O C C H 3N H 2 C l若間隔基團(tuán)含有二硫橋，則成為可裂解同型雙功能試劑。 嘌呤核苷酸的烷基鹵化衍生物也可看作是親和試劑，各種親和側(cè)鏈如 Cys、 His、 Lys、 Met等能與試劑上的鹵原子反應(yīng)。 第七節(jié) 蛋白質(zhì)化學(xué)修飾的應(yīng)用 一、用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)分子中某種氨基酸的數(shù)量 常用方法 : 對(duì)氯苯甲酸與巰基作用； 三硝基苯磺酸與氨基作用 。 二、在蛋白質(zhì)序列分析中的應(yīng)用 （一）控制酶解程度 用三氟乙酰法將 Lys的 εNH2保護(hù)起來(lái) 變成酶不能水解的產(chǎn)物。 二、外生親和試劑 （一）將鹵代烷基衍生物通過腺嘌呤的 N6連到腺嘌呤 上，則可形成有效的外生親和試劑。 雙亞氨酸酯（非裂解） 二甲基 3， 3′二硫代 雙丙基亞氨酯（可裂解） （二）異型雙功能試劑 這類試劑的一端與氨基作用，另一端與巰基側(cè)鏈作用，但用碳二亞胺時(shí)，另一端反應(yīng)基團(tuán)是羧基。 （二）各種芐基鹵化物能使吲哚環(huán)烷基化 最常用的是 2羥基 5硝基芐基溴，由于溶解度的問題，常用它的類似物二甲基（ 2羥基 5硝基芐基）锍鹽。 E N ZOCO+HNNCRRH+++ C+E N Z HHONCON RRC+E N Z HHONCON RR+ HX E N Z OCX C+ HHNON RR H +++ C+E N Z HHONCON RRCHNON RRHE N ZOC ++碳二亞胺 形成相應(yīng)酰胺 重排 四、巰基的修飾 由于半胱氨酸時(shí)蛋白質(zhì)中反應(yīng)性最強(qiáng)的殘基，所以很多試劑可用來(lái)修飾巰基側(cè)鏈。 羥胺不能使雙取代物發(fā)生可逆反應(yīng)，而是清除咪唑環(huán)。 當(dāng)交聯(lián)劑一端的反應(yīng)基團(tuán)與蛋白質(zhì)作用之后，經(jīng)光照另一端則產(chǎn)生一個(gè)反應(yīng)活性部分，這部分即可是碳烯，也可是氮烯。 合成具有兩個(gè)反應(yīng)基的嘌呤 核苷酸衍生物，它既含鹵代 烷基部分又含二羰丁基部分， 不僅對(duì)能與鹵代烷反應(yīng)的側(cè) 鏈有專一性，還對(duì)精氨酸殘 基有專一性。 N H C H CON HSSC H 2C H 2C HN H CON H還原劑 胱氨酸 N H C H CON HS HC H 2半胱氨酸 C H 2 C H 2N HN H C H CON HSN H 2C H 2C H 2C H 2S氨乙酰 半 胱氨酸基 環(huán)乙烯亞胺 N H C H CON HO HC H 2XClN H C H CON HO XC H 2S HN H 2 C H 2 C H 2絲氨酸基