【正文】 幾種生物技術藥物檢驗項目表 IFNα2b 原液 蛋白含量 宿主菌蛋殘留量 ≤ 總蛋白質的 % 等電點 ～ 鼠 IgG含量 ≤ 100 ng/劑量 電泳純度 ≥ %分子量 177。 耐用性（ robustness/ruggedness） 是通過有效地改變實驗方法的參數(shù)，來測定此改變對試驗結果的影響，即實驗結果不受影響的承受程度。 精密性（ precision） 表示測定值之間的一致性或接近的程度，一般表示為變異系數(shù) (CV%)，變異系數(shù)即是測定值的標準差與測定值的比值。 直線性（ linearity） 是測定結果與樣品中測試物濃度的線性關系，該參數(shù)的測定將確定檢測方法的測量范圍，它可以表示為回歸直線的斜率和離散性，或者相關系數(shù) R和測定系數(shù) R2 。 安全性及其他檢測項目 ?無菌試驗 ?熱源試驗 ?異常毒性試驗 ?免疫原性檢查 ?水分、裝量、 pH檢測 生物技術藥物待測樣品保存 ? 生物技術藥物大多為具有生物活性的蛋白質、多肽，易受環(huán)境條件的影響。 七、殘余雜質檢測 對殘余雜質進行限制的意義 a、殘余雜質可能具有毒性，引起安全性問題； b、可能影響產(chǎn)品的生物學活性和藥理作用，或使產(chǎn)品變質； c、反映產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性。 ?在生產(chǎn)工程中每批產(chǎn)品的紫外吸收光譜應當一致。 相對分子質量測定 ? 還原型 SDSPAGE：蛋白質在 SDS和 β 巰基乙醇存在下沸水浴 5min，形成表面帶大量負電荷的桿狀分子，降低了分子形態(tài)和電荷的影響，在電泳過程中蛋白遷移率基本只與其相對分子質量相關。蛋白質樣品在荷質比均一。 對于成品的生物活性測定標準，要根據(jù)不同方法的特點規(guī)定相當標示量的范圍，目前，生物活性的測定方法有四類：動物基礎、細胞基礎、生化（酶）法、特異（免疫、受體）結合法。 Crystal violet：染活細胞后，在比色計中測定光吸收值（ A）， A值與著染色細胞數(shù)成正比。計算對照品和各實驗樣品的半效稀釋倍數(shù)， 按下式計算樣品效價：樣品效價 =對照品效價 樣品半效稀釋倍數(shù)／對照品半效稀釋倍數(shù) 生物學活性測定方法選擇 體內(nèi)測定和體外測定方法 a、體內(nèi)測定：即整體動物測定，能為較大范圍的重組產(chǎn)品的效價提供有用信息，但費時、昂貴、難操作及同時存在倫理問題，大多數(shù)情況下傾向于選擇體外測定方法。7H2O 、 NaHCO3 g、 Glucose 1 000 mL的溶液， 置于玻璃或塑料瓶中，用 1 mol 我國基因工程產(chǎn)品安全管理 法規(guī)和技術指南 《 傳代細胞系生產(chǎn)生物制品的規(guī)程 》 《 人用鼠源性單克隆抗體質量控制要點 》 《 預防用新生物制品臨床研究的技術要求 》 《 人用重組 DNA制品質量控制要點 》 《 人的體細胞治療申報臨床試驗指導原則 》 《 人基因治療申報臨床試驗指導原則 》 《 藥理毒理檢查指導原則 》 《 藥品生產(chǎn)質量管理辦法 》 《 藥品注冊管理辦法 》 生物技術藥物的質量控制 生物技術藥物的特點： 來源：活的生物體（細菌或細胞）； 結構：復雜（包括組成、空間結構）； 生產(chǎn)：涉及生物材料和生物學過程（發(fā) 酵、細胞培養(yǎng)，分離純化等）， 有其固有的易變性。 重組 DNA藥物包括： ?寡核苷酸藥物：反義核酸等； ?基因藥物：腺病毒 IL腺相關病毒 凝血 Ⅸ 因子；腺病毒 P53 ?細胞治療制劑：抗原致敏的人樹突狀細胞 ?DNA疫苗：治療乙型肝炎、愛滋病的核酸疫苗等 。生物技術藥物質量控制 李平生 概 述 ? 利用人體內(nèi)的天然物質治療人類的疾病或達到某種醫(yī)學效果一直是醫(yī)學上的一個重要研究領域。 我國生物技術藥物質量標準研究現(xiàn)狀 ? 現(xiàn)代醫(yī)藥生物技術的發(fā)展以及人類基因組計劃的完成和遺傳病基因的不斷發(fā)現(xiàn)，對醫(yī)藥領域產(chǎn)生了巨大影響。 生物技術藥物的質量控制 質量控制包括兩個方面： 生產(chǎn)過程中質量控制 GMP（硬件、軟件） 最終目標產(chǎn)品的質量控制（方法學研究） 質量控制方法學研究具體內(nèi)容 一、生物學活性測定和比活性 二、蛋白質純度檢查 三、蛋白質含量測定 四、蛋白質藥物理化性質的鑒定 五、蛋白質的二硫鍵分析 六、對糖蛋白的特殊要求 七、殘余雜質檢查 八、安全性及其他檢測項目 九、生物技術藥物待測樣品保存 一、生物學活性測定和比活性 意義： 1）基因工程產(chǎn)品的化學本質為蛋白質、多肽，其活性由產(chǎn)品的氨基酸序列或其空間結構所形成 的活性中心所決定的，與其絕對 質量 不一致。L1 NaOH 溶液調(diào) pH 至 )的麥氏浴槽中，加負荷 1g，穩(wěn)定 1h，期間每 20min換 1次臺氏液： 連接多導記錄儀，調(diào)節(jié)靈敏度，記錄血管的張力變化。 b、體外測定：可使用分離的器官或組織、原代細胞或傳代細胞系，目前最常用方法是連續(xù)生長、因子依賴的、克隆化的細胞系的方法，其測定結果比較準確、重現(xiàn)性好、經(jīng)濟、容易使用和便于統(tǒng)計分析。 幾種細胞培養(yǎng)測定方法比較 3Hthymidine BrdU MTT Alamar Blue 靶向物 DNA合成系統(tǒng) 線粒體電子傳遞系統(tǒng) 檢出細胞的狀態(tài) 增殖 增殖、生存 檢出法 放射活性 色素、熒光 色素 色素、熒光 抽出的必要性 + + + 其他試劑的必要性 +