【正文】 幾種生物技術(shù)藥物檢驗(yàn)項(xiàng)目表 IFNα2b 原液 蛋白含量 宿主菌蛋殘留量 ≤ 總蛋白質(zhì)的 % 等電點(diǎn) ～ 鼠 IgG含量 ≤ 100 ng/劑量 電泳純度 ≥ %分子量 177。 耐用性（ robustness/ruggedness） 是通過有效地改變實(shí)驗(yàn)方法的參數(shù)，來測定此改變對試驗(yàn)結(jié)果的影響，即實(shí)驗(yàn)結(jié)果不受影響的承受程度。 精密性（ precision） 表示測定值之間的一致性或接近的程度，一般表示為變異系數(shù) (CV%)，變異系數(shù)即是測定值的標(biāo)準(zhǔn)差與測定值的比值。 直線性（ linearity） 是測定結(jié)果與樣品中測試物濃度的線性關(guān)系，該參數(shù)的測定將確定檢測方法的測量范圍，它可以表示為回歸直線的斜率和離散性，或者相關(guān)系數(shù) R和測定系數(shù) R2 。 安全性及其他檢測項(xiàng)目 ?無菌試驗(yàn) ?熱源試驗(yàn) ?異常毒性試驗(yàn) ?免疫原性檢查 ?水分、裝量、 pH檢測 生物技術(shù)藥物待測樣品保存 ? 生物技術(shù)藥物大多為具有生物活性的蛋白質(zhì)、多肽，易受環(huán)境條件的影響。 七、殘余雜質(zhì)檢測 對殘余雜質(zhì)進(jìn)行限制的意義 a、殘余雜質(zhì)可能具有毒性，引起安全性問題； b、可能影響產(chǎn)品的生物學(xué)活性和藥理作用，或使產(chǎn)品變質(zhì)； c、反映產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性。 ?在生產(chǎn)工程中每批產(chǎn)品的紫外吸收光譜應(yīng)當(dāng)一致。 相對分子質(zhì)量測定 ? 還原型 SDSPAGE：蛋白質(zhì)在 SDS和 β 巰基乙醇存在下沸水浴 5min，形成表面帶大量負(fù)電荷的桿狀分子，降低了分子形態(tài)和電荷的影響，在電泳過程中蛋白遷移率基本只與其相對分子質(zhì)量相關(guān)。蛋白質(zhì)樣品在荷質(zhì)比均一。 對于成品的生物活性測定標(biāo)準(zhǔn)，要根據(jù)不同方法的特點(diǎn)規(guī)定相當(dāng)標(biāo)示量的范圍，目前，生物活性的測定方法有四類：動(dòng)物基礎(chǔ)、細(xì)胞基礎(chǔ)、生化（酶）法、特異（免疫、受體）結(jié)合法。 Crystal violet：染活細(xì)胞后，在比色計(jì)中測定光吸收值（ A）， A值與著染色細(xì)胞數(shù)成正比。計(jì)算對照品和各實(shí)驗(yàn)樣品的半效稀釋倍數(shù)， 按下式計(jì)算樣品效價(jià)：樣品效價(jià) =對照品效價(jià) 樣品半效稀釋倍數(shù)／對照品半效稀釋倍數(shù) 生物學(xué)活性測定方法選擇 體內(nèi)測定和體外測定方法 a、體內(nèi)測定：即整體動(dòng)物測定，能為較大范圍的重組產(chǎn)品的效價(jià)提供有用信息，但費(fèi)時(shí)、昂貴、難操作及同時(shí)存在倫理問題，大多數(shù)情況下傾向于選擇體外測定方法。7H2O 、 NaHCO3 g、 Glucose 1 000 mL的溶液， 置于玻璃或塑料瓶中，用 1 mol 我國基因工程產(chǎn)品安全管理 法規(guī)和技術(shù)指南 《 傳代細(xì)胞系生產(chǎn)生物制品的規(guī)程 》 《 人用鼠源性單克隆抗體質(zhì)量控制要點(diǎn) 》 《 預(yù)防用新生物制品臨床研究的技術(shù)要求 》 《 人用重組 DNA制品質(zhì)量控制要點(diǎn) 》 《 人的體細(xì)胞治療申報(bào)臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則 》 《 人基因治療申報(bào)臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則 》 《 藥理毒理檢查指導(dǎo)原則 》 《 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理辦法 》 《 藥品注冊管理辦法 》 生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制 生物技術(shù)藥物的特點(diǎn)： 來源：活的生物體（細(xì)菌或細(xì)胞）； 結(jié)構(gòu)：復(fù)雜（包括組成、空間結(jié)構(gòu)）； 生產(chǎn)：涉及生物材料和生物學(xué)過程（發(fā) 酵、細(xì)胞培養(yǎng)，分離純化等）， 有其固有的易變性。 重組 DNA藥物包括： ?寡核苷酸藥物：反義核酸等； ?基因藥物：腺病毒 IL腺相關(guān)病毒 凝血 Ⅸ 因子；腺病毒 P53 ?細(xì)胞治療制劑：抗原致敏的人樹突狀細(xì)胞 ?DNA疫苗：治療乙型肝炎、愛滋病的核酸疫苗等 。生物技術(shù)藥物質(zhì)量控制 李平生 概 述 ? 利用人體內(nèi)的天然物質(zhì)治療人類的疾病或達(dá)到某種醫(yī)學(xué)效果一直是醫(yī)學(xué)上的一個(gè)重要研究領(lǐng)域。 我國生物技術(shù)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究現(xiàn)狀 ? 現(xiàn)代醫(yī)藥生物技術(shù)的發(fā)展以及人類基因組計(jì)劃的完成和遺傳病基因的不斷發(fā)現(xiàn)，對醫(yī)藥領(lǐng)域產(chǎn)生了巨大影響。 生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制 質(zhì)量控制包括兩個(gè)方面： 生產(chǎn)過程中質(zhì)量控制 GMP（硬件、軟件） 最終目標(biāo)產(chǎn)品的質(zhì)量控制（方法學(xué)研究） 質(zhì)量控制方法學(xué)研究具體內(nèi)容 一、生物學(xué)活性測定和比活性 二、蛋白質(zhì)純度檢查 三、蛋白質(zhì)含量測定 四、蛋白質(zhì)藥物理化性質(zhì)的鑒定 五、蛋白質(zhì)的二硫鍵分析 六、對糖蛋白的特殊要求 七、殘余雜質(zhì)檢查 八、安全性及其他檢測項(xiàng)目 九、生物技術(shù)藥物待測樣品保存 一、生物學(xué)活性測定和比活性 意義： 1）基因工程產(chǎn)品的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)、多肽，其活性由產(chǎn)品的氨基酸序列或其空間結(jié)構(gòu)所形成 的活性中心所決定的，與其絕對 質(zhì)量 不一致。L1 NaOH 溶液調(diào) pH 至 )的麥?zhǔn)显〔壑?，加?fù)荷 1g，穩(wěn)定 1h，期間每 20min換 1次臺(tái)氏液： 連接多導(dǎo)記錄儀，調(diào)節(jié)靈敏度，記錄血管的張力變化。 b、體外測定：可使用分離的器官或組織、原代細(xì)胞或傳代細(xì)胞系，目前最常用方法是連續(xù)生長、因子依賴的、克隆化的細(xì)胞系的方法，其測定結(jié)果比較準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、經(jīng)濟(jì)、容易使用和便于統(tǒng)計(jì)分析。 幾種細(xì)胞培養(yǎng)測定方法比較 3Hthymidine BrdU MTT Alamar Blue 靶向物 DNA合成系統(tǒng) 線粒體電子傳遞系統(tǒng) 檢出細(xì)胞的狀態(tài) 增殖 增殖、生存 檢出法 放射活性 色素、熒光 色素 色素、熒光 抽出的必要性 + + + 其他試劑的必要性 +