【正文】 ty 0 60 120 18002004006008001000 P a r e n t M e t a b o l i t eT m a x ( m i n ) 6 . 1 4 6 . 5 3C m a x ( ? g / m l ) 0 . 0 8 3 0 . 7 9 9A U C ( ? g / m l / m i n ) 4 . 8 2 3 2 1 . 8 1 0B i o a v a i l a b i l i t y % 2 . 5 2 3 1 1 . 4 3 4R20 . 9 2 9 2 0 . 9 9 6 4B C H 3 8 4 0M e t a b o l i t eT i m e ( m i n )Concentration [ng/ml]排出太快 /藥效時(shí)間太短 口服吸收差 /血漿濃度太低 分布 排瀉 代謝問(wèn)題 吸收問(wèn)題 蛋白質(zhì)相互作用 分布體積 腎臟排泄 肝臟代謝 溶解度 腸道吸收膜通透性 腸道消化 早期研發(fā)階段 后期研發(fā)階段 Situation Analysis in vitro體外 metabolism in situ離體 permeability in vivo體內(nèi) bioavailability In Situ Rat Intestinal Permeability: Good 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 1500255075100P h e n o l R e dA c e t a m i n o p h e nB C H 3 8 4 0T i m e ( m i n )Decreased Concentration(%)陽(yáng)性對(duì)照 陰性對(duì)照 受試藥物 Enhanced Throughput Screening Perfusion: 4 pounds per day (4 animals) Sample size: time points 7 duplicate x 2 control/drug x 3 sample/perfusion 42 Total samples/day 168 Bioanalysis: no extraction no standard curve (peak area) machine time/2 LCs 24 hrs Total manpower: animal tech x 1 PKDM tech x 2 Test article amount: 1 mg / test article Screening rate: one chemotypes with 30 pounds / 2 weeks NONNOSOOONONHFFFOONONNOSOO OOONHFFF OONONNOSOOOOONHFFFOOpKa = 10 pKa = pKa = Preduced%= 0% Preduced%= 7% Preduced%= 12% SAR: pKa vs. permeability 實(shí)例：結(jié)構(gòu)優(yōu)化和吸收率分析 NONNOOONSNN NHFFFOONONNOSOOONSNN NHHC h i r a lFFFOONONNOOONSNNFFFOONONNOSOOONSNN+FFFOOSAR: permeability vs. efficacy 實(shí)例：結(jié)構(gòu)優(yōu)化和吸收率和活性的分析 IC50 = 2 uM Preduced%= 0% IC50 = uM Preduced%= 0% IC50 = uM Preduced%= 17% IC50 = uM Preduced%= 15% 小結(jié)：體外和離體藥物吸收實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) 體外人大腸癌細(xì)胞模型 (in vitro Caco2 monolayer) 離體大鼠十二指腸灌流模型 (in situ rat intestine perfusion) 體內(nèi)動(dòng)物藥物代謝動(dòng)力學(xué)模型 二五原則 : 5毫克 /5天 0 . 0 10 . 11101000 0 . 5 1 1 . 5 2 2 . 5 3 3 . 5 4.血漿濃度 時(shí)間 化學(xué)藥物 化學(xué)藥物 +中藥 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 1500255075100P h e n o l R e dA c e t a m i n o p h e nB C H 3 8 4 0T i m e ( m i n )Decreased Concentration(%)中藥的藥物代謝動(dòng)力學(xué)的任務(wù) ? 本身的藥物代謝動(dòng)力學(xué)問(wèn)題 ? 對(duì)其它藥物吸收的作用 排出太快 /藥效時(shí)間太短 口服吸收差 /血漿濃度太低 分布 排瀉 代謝問(wèn)題 吸收問(wèn)題 蛋白質(zhì)相互作用 分布體積 腎臟排泄 肝臟代謝 溶解度 腸道吸收膜通透性 腸道消化 早期研發(fā)階段 后期研發(fā)階段 Situation Analysis in vitro體外 metabolism in situ離體 permeability in vivo體內(nèi) bioavailability 死還是不死 ,這是個(gè)問(wèn)題 . To be or not to be, this is a problem. 哈默雷特 體內(nèi)試驗(yàn)還是體外試驗(yàn) , 這是個(gè)問(wèn)題 . In vitro or in vivo, this is a problem. 藥代研究員 動(dòng)物體內(nèi)模型 人體內(nèi) (臨床試驗(yàn) ) In vivo animals vs. in vivo humans 人體外模型 人體內(nèi) (臨床試驗(yàn) ) In vitro humans vs. in vivo humans 選擇的指南 ?與人相似：疾病模型，藥效，毒性，藥物代謝 ?實(shí)驗(yàn)成本 38 Heartbeat and Bodyweight （ 心率和體重） 小鼠 大鼠 兔 猴 狗 人 39 Liver weight and Hepatic Flow vs Bodyweight （體重，肝重和肝血流量 ） 人 狗 猴 兔 大鼠 小鼠 人 狗 猴 兔 大鼠 小鼠 40 Antipyrine clearance (l/min) rat mouse rabbit monkey dog human Clearance In Vitro Models of the Liver 體外肝模型 ? Hepatocytes 肝細(xì)胞 ? Liver slices 肝切片 ? Liver microsomes 肝 微粒體 ? Liver S9 Fraction 肝 S9組分 USFDA Guidance for Industry 美國(guó)藥物和食品管理局關(guān)于藥物代謝實(shí)驗(yàn)的指南 “ The most plete picture for hepatic metabolism can be obtained with liver systems,in which the cofactors are selfsufficient and the natural orientation for linked enzymes is preserved. Isolated hepatocytes and precisioncut slices have these desirable features.” Guidance for Industry, Drug Metabolism/Drug InteractionStudies in the Drug Development Process: Studies In VitroCDER, CBER, . FDA, 1997 譯文： 肝系統(tǒng)（分離的肝細(xì)胞和精確的肝切片）能為藥物代謝 實(shí)驗(yàn)提供最完全的信息，因?yàn)檫@個(gè)系統(tǒng)含有足夠的天然 水平的酶系。 T I = 1 . 9 1C o n c e n t r a t i o n [ ? g / m l ]Efficacy / Cytotoxicity %NNO HN HO OIn vitro therapeutic index of BCH6440 Efficacy Hits Optimized Lead Go or no go decision Compound for Development (CD) NEW DRUG IND NDA Ramp。 proportionality ? 多次給藥和體內(nèi)積蓄 multiple doses amp。D 臨床實(shí)驗(yàn) 臨床前實(shí)驗(yàn) 研究和發(fā)現(xiàn) 臨床階段 ? 動(dòng)物和人的代謝特征 (長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物選擇 ) metabolism profiling in animals and humans Evaluation of In Vitro Metabolism Profiles Cryopreserved Hepatocytes ? mouse ? rat ? dog ? monkey ? human 實(shí)驗(yàn)藥物 (MW = in 1/2 tartrate salt) [14C] 放射性比活性 ( 181。 M 1–4 , me t ab oli t e s 1–4 .T ab l e 1 : [ 14 C ] R ad i oa c ti vi t y p r o fi l e s o f 38 7 0 3 2 i n i n c u b at i on w i t h fr e s h l y i s ol at e d m ou s e h e p at oc yt e s a n d c r y o p r e s e r v e d r a t, d o g, m o n k e y, an d h u m a nh e p a to c y te s致謝 Acknowledgements 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所 /藥理毒理研究所 杉山雄一博士 /小澤正吾博士 國(guó)家外專局引進(jìn)國(guó)外智力項(xiàng)目 2022A034 謝 謝！ 放映結(jié)束 感謝各位的批評(píng)指導(dǎo)！ 讓我們共同進(jìn)步 母 愛(ài) 母愛(ài)是傘，為你遮風(fēng)擋雨。 在寒冷的年代里，母愛(ài)是溫暖。