【正文】 ty 0 60 120 18002004006008001000 P a r e n t M e t a b o l i t eT m a x ( m i n ) 6 . 1 4 6 . 5 3C m a x ( ? g / m l ) 0 . 0 8 3 0 . 7 9 9A U C ( ? g / m l / m i n ) 4 . 8 2 3 2 1 . 8 1 0B i o a v a i l a b i l i t y % 2 . 5 2 3 1 1 . 4 3 4R20 . 9 2 9 2 0 . 9 9 6 4B C H 3 8 4 0M e t a b o l i t eT i m e ( m i n )Concentration [ng/ml]排出太快 /藥效時間太短 口服吸收差 /血漿濃度太低 分布 排瀉 代謝問題 吸收問題 蛋白質(zhì)相互作用 分布體積 腎臟排泄 肝臟代謝 溶解度 腸道吸收膜通透性 腸道消化 早期研發(fā)階段 后期研發(fā)階段 Situation Analysis in vitro體外 metabolism in situ離體 permeability in vivo體內(nèi) bioavailability In Situ Rat Intestinal Permeability: Good 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 1500255075100P h e n o l R e dA c e t a m i n o p h e nB C H 3 8 4 0T i m e ( m i n )Decreased Concentration(%)陽性對照 陰性對照 受試藥物 Enhanced Throughput Screening Perfusion: 4 pounds per day (4 animals) Sample size: time points 7 duplicate x 2 control/drug x 3 sample/perfusion 42 Total samples/day 168 Bioanalysis: no extraction no standard curve (peak area) machine time/2 LCs 24 hrs Total manpower: animal tech x 1 PKDM tech x 2 Test article amount: 1 mg / test article Screening rate: one chemotypes with 30 pounds / 2 weeks NONNOSOOONONHFFFOONONNOSOO OOONHFFF OONONNOSOOOOONHFFFOOpKa = 10 pKa = pKa = Preduced%= 0% Preduced%= 7% Preduced%= 12% SAR: pKa vs. permeability 實例：結(jié)構(gòu)優(yōu)化和吸收率分析 NONNOOONSNN NHFFFOONONNOSOOONSNN NHHC h i r a lFFFOONONNOOONSNNFFFOONONNOSOOONSNN+FFFOOSAR: permeability vs. efficacy 實例：結(jié)構(gòu)優(yōu)化和吸收率和活性的分析 IC50 = 2 uM Preduced%= 0% IC50 = uM Preduced%= 0% IC50 = uM Preduced%= 17% IC50 = uM Preduced%= 15% 小結(jié)：體外和離體藥物吸收實驗系統(tǒng) 體外人大腸癌細胞模型 (in vitro Caco2 monolayer) 離體大鼠十二指腸灌流模型 (in situ rat intestine perfusion) 體內(nèi)動物藥物代謝動力學模型 二五原則 : 5毫克 /5天 0 . 0 10 . 11101000 0 . 5 1 1 . 5 2 2 . 5 3 3 . 5 4.血漿濃度 時間 化學藥物 化學藥物 +中藥 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 1500255075100P h e n o l R e dA c e t a m i n o p h e nB C H 3 8 4 0T i m e ( m i n )Decreased Concentration(%)中藥的藥物代謝動力學的任務 ? 本身的藥物代謝動力學問題 ? 對其它藥物吸收的作用 排出太快 /藥效時間太短 口服吸收差 /血漿濃度太低 分布 排瀉 代謝問題 吸收問題 蛋白質(zhì)相互作用 分布體積 腎臟排泄 肝臟代謝 溶解度 腸道吸收膜通透性 腸道消化 早期研發(fā)階段 后期研發(fā)階段 Situation Analysis in vitro體外 metabolism in situ離體 permeability in vivo體內(nèi) bioavailability 死還是不死 ,這是個問題 . To be or not to be, this is a problem. 哈默雷特 體內(nèi)試驗還是體外試驗 , 這是個問題 . In vitro or in vivo, this is a problem. 藥代研究員 動物體內(nèi)模型 人體內(nèi) (臨床試驗 ) In vivo animals vs. in vivo humans 人體外模型 人體內(nèi) (臨床試驗 ) In vitro humans vs. in vivo humans 選擇的指南 ?與人相似：疾病模型，藥效，毒性，藥物代謝 ?實驗成本 38 Heartbeat and Bodyweight （ 心率和體重） 小鼠 大鼠 兔 猴 狗 人 39 Liver weight and Hepatic Flow vs Bodyweight （體重，肝重和肝血流量 ） 人 狗 猴 兔 大鼠 小鼠 人 狗 猴 兔 大鼠 小鼠 40 Antipyrine clearance (l/min) rat mouse rabbit monkey dog human Clearance In Vitro Models of the Liver 體外肝模型 ? Hepatocytes 肝細胞 ? Liver slices 肝切片 ? Liver microsomes 肝 微粒體 ? Liver S9 Fraction 肝 S9組分 USFDA Guidance for Industry 美國藥物和食品管理局關(guān)于藥物代謝實驗的指南 “ The most plete picture for hepatic metabolism can be obtained with liver systems,in which the cofactors are selfsufficient and the natural orientation for linked enzymes is preserved. Isolated hepatocytes and precisioncut slices have these desirable features.” Guidance for Industry, Drug Metabolism/Drug InteractionStudies in the Drug Development Process: Studies In VitroCDER, CBER, . FDA, 1997 譯文： 肝系統(tǒng)（分離的肝細胞和精確的肝切片）能為藥物代謝 實驗提供最完全的信息，因為這個系統(tǒng)含有足夠的天然 水平的酶系。 T I = 1 . 9 1C o n c e n t r a t i o n [ ? g / m l ]Efficacy / Cytotoxicity %NNO HN HO OIn vitro therapeutic index of BCH6440 Efficacy Hits Optimized Lead Go or no go decision Compound for Development (CD) NEW DRUG IND NDA Ramp。 proportionality ? 多次給藥和體內(nèi)積蓄 multiple doses amp。D 臨床實驗 臨床前實驗 研究和發(fā)現(xiàn) 臨床階段 ? 動物和人的代謝特征 (長期毒性實驗的動物選擇 ) metabolism profiling in animals and humans Evaluation of In Vitro Metabolism Profiles Cryopreserved Hepatocytes ? mouse ? rat ? dog ? monkey ? human 實驗藥物 (MW = in 1/2 tartrate salt) [14C] 放射性比活性 ( 181。 M 1–4 , me t ab oli t e s 1–4 .T ab l e 1 : [ 14 C ] R ad i oa c ti vi t y p r o fi l e s o f 38 7 0 3 2 i n i n c u b at i on w i t h fr e s h l y i s ol at e d m ou s e h e p at oc yt e s a n d c r y o p r e s e r v e d r a t, d o g, m o n k e y, an d h u m a nh e p a to c y te s致謝 Acknowledgements 軍事醫(yī)學科學院輸血研究所 /藥理毒理研究所 杉山雄一博士 /小澤正吾博士 國家外專局引進國外智力項目 2022A034 謝 謝！ 放映結(jié)束 感謝各位的批評指導！ 讓我們共同進步 母 愛 母愛是傘，為你遮風擋雨。 在寒冷的年代里，母愛是溫暖。