【正文】 少兩個不同的色譜系統(tǒng)或第二個獨立的檢測方法 共同的性能標(biāo)準(zhǔn)和要求確認方法應(yīng)提供關(guān)于分析物化學(xué)結(jié)構(gòu)的信息。根據(jù)可能性，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)采用穩(wěn)定性同位素標(biāo)記的分析物—特別適用于質(zhì)譜檢測，或結(jié)構(gòu)與分析物類似的化合物。參照物或含有等于或接近允許限度或判定限度(超標(biāo)控制對照樣品)的已知量的分析物添加材料，以及陰性控制材料和試劑空白最好應(yīng)當(dāng)在整個過程中與每一批分析的樣品一塊進行操作。表2 定量方法的最低真實度真值含量（mg/kg）偏差范圍（%）＜50 ～ +20～30 ～ +10～1020 ～ +1010～1000＜151000～10000＜10＞10000＜5在沒有認證過的基準(zhǔn)物質(zhì)可使用時，通過向空白基質(zhì)中加入已知量的分析物得到的回收率來評價測定的真實度是可以接受的。實驗室內(nèi)部的變異系數(shù)參考范圍見表3。g/kg21100 181。對于在重復(fù)性條件下進行的分析，實驗室內(nèi)CV應(yīng)特別地位于上述數(shù)值的1/2～2/3之間。 色譜分離對LCMS 操作，色譜分離應(yīng)該選用合適的液相色譜柱。分析物色譜保留時間和內(nèi)標(biāo)物保留時間的比率，%的允許誤差一致。選擇離子監(jiān)控(SIM)：當(dāng)質(zhì)譜檢測是通過執(zhí)行碎片譜時，分子離子可能是更適宜的測量診斷離子之一(分子離子、分子離子的特征加和離子、特征碎片離子、同位素離子)。應(yīng)該與校準(zhǔn)物質(zhì)、校準(zhǔn)物質(zhì)溶液或吸取的樣品溶液在可比較的濃度下和相同的條件下測定。30％≤10％177。至少4個離子位于相對離子強度的最大允許范圍內(nèi)(見表5)。光譜中由樣品基質(zhì)和檢測器性能引起的變異性應(yīng)該得到檢查。然而，為了使需要確認的識別點具有資格，識別點的總和可以按以下計算：(a)最小至少一個離子對被測定：(b)所有相對測定的離子對滿足上述描述的標(biāo)準(zhǔn)；(c)最多三個獨立技術(shù)能聯(lián)合使用達到最小識別點數(shù)。 色譜分離如果可以獲得用于這一目的的一種物質(zhì)，內(nèi)標(biāo)物質(zhì)應(yīng)該盡可能的使用。分析物和內(nèi)標(biāo)物保留時間的比值，即分析物的相對保留時間，應(yīng)該與校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品的比值在合適的范圍內(nèi)相同，允許177。對二極管點陣檢測器，允許誤差值為177。如果使用計算機幫助的圖庫搜尋和匹配，測試樣品的光譜數(shù)據(jù)與校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品光譜數(shù)據(jù)比較必須超過標(biāo)準(zhǔn)匹配因子。該方法將應(yīng)用于顯示自身熒光的分子和在轉(zhuǎn)化或衍生后顯示熒光的分子。色譜條件下最近的峰的極大處應(yīng)該與指定的分析物的峰分離，至少為完整的分析物的峰的最大高度10％的一個全峰寬度。表7 分析方法通過已確定了的性能特征的分類方法檢測容量CCβ決定限度CCα真實度/回收率精密度選擇性/特異性實用性/耐用性/穩(wěn)定性定性S+++方法C++++定量S+++方法C++++++注：S＝篩選法；C＝確認方法；十＝必需測定的3．1 確證程序本章為分析方法的確證程序提供了例證和／或參考資料。這個方法由以下部分組成：(a)一套獨立于所用確證模型的共同性能特征； (b)在表8 中所描述的更具體的模型決定程序。必須有兩種方法檢查干擾情況?；鶞?zhǔn)物質(zhì)只要可得到就應(yīng)使用。 實用性/耐用性(較小的變化)這樣的研究通過實驗室故意引入較小的合理的變化和觀察它們的后果進行。(在這點上其他的方法也可使用?；镜母拍畈皇且淮窝芯恳粋€改變而是一次引入兩三個變化。必須進行八次測定，每次采用選擇的因素的一種組合(A—G)。通常分析物在不同的貯存條件下的穩(wěn)定性被很好地描述。準(zhǔn)備兩種分析物溶液，一種作為添加的溶液，一種作為最終的分析溶液，以及其他感興趣的溶液(例如衍生的標(biāo)準(zhǔn)品)?！恳坏确莘衷嚇又蟹治鑫餄舛鹊挠嬎銘?yīng)以新鮮制備的分析物溶液的濃度為100％進行?！?dāng)可以得到實際的材料時，材料的濃度應(yīng)在新鮮配制時測定。將材料分為5 等份樣品，每份樣品中添加分析物，分析物最好制備于少量水溶液中，立即分析一份樣品。對于篩選方法，對于確證方法。對于多組分分析方法，只要先前可能的有關(guān)干擾能被排除，幾個分析物可以被同時分析。 中描述的標(biāo)準(zhǔn)附加方法的變種，用于：——樣品被認為是用空白樣品而非要分析的樣品；——試驗樣品有相同的質(zhì)量和試驗部分提取物有相同的體積；——加入到第二(添加)試驗部分的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量記為XADD(XADD＝ρA——制備一系列指定試驗物質(zhì)(同一的或不同的基質(zhì))的樣品，添加分析物使?jié)舛葹? 、 倍允許限量：——每一水平的分析應(yīng)至少重復(fù)6 次；——由不同的操作者在不同的環(huán)境中至少兩次重復(fù)這些步驟，如不同批次的試劑、溶劑等，不同的室溫，不同的儀器等，如果可能的話；——分析樣品：——計算每份樣品的測定濃度：——求出平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和添加樣品的變異系數(shù)(％)。在這種情況下，應(yīng)使用空白物質(zhì)，按照等距離梯度添加物質(zhì)，使之等于和高于反應(yīng)所需的最低量。這種方法僅適用于定量檢測(α＝1％)：或——通過分析每種矩陣至少20個空白物質(zhì)，以便能夠計算預(yù)期存在分析物的時間窗口中信號與噪音比。在這種情況下，應(yīng)使用空白物質(zhì)，按照等距離梯度添加物質(zhì)，使之位于允許限度周圍。 倍，即等于決定限度(α＝5％)。在這種情況下，應(yīng)使用有代表性的空白物質(zhì)，按照等距離梯度添加物質(zhì)，使等于和低于反應(yīng)所需的最低量。分析樣品，對分析物進行鑒別。如果該物質(zhì)的允許限度已經(jīng)建立，則按照下列方法確定CCβ：——要么按照ISO 11843(17)采用校準(zhǔn)曲線方法(這里指的是凈狀態(tài)變量的最低可檢測值)。 倍，即等于檢測容量(β＝5％)；或——通過分析每種矩陣至少20 個添加了決定限度的分析物的空白物質(zhì)。引入的變化應(yīng)該是大的變化。例如，在應(yīng)用室內(nèi)驗證模型時，確定操作特性的方式應(yīng)該允許在相同的驗證程序中能夠進行大的變化的驗證?！總€濃度水平的可重復(fù)性(Sir)；——每個濃度水平的實驗室內(nèi)部重現(xiàn)性(Sir)；——決定限度(CCα)；——檢測容量(CCβ)：——濃度曲線(β－誤差率對濃度，)；——大的變化的粗糙度： 進行確定：——樣品－相關(guān)的校準(zhǔn)曲線；——1 個總的校準(zhǔn)曲線：——總的校準(zhǔn)曲線的預(yù)測時間間隔：——矩陣導(dǎo)致的誤差(Smat)；——輪次導(dǎo)致的誤差(Srun)；——不同因子對檢測結(jié)果的影響。它是指應(yīng)用于所研究的方法時的β誤差風(fēng)險。錯誤結(jié)論的概率降低至1％。圖3 已經(jīng)確定允許限度的物質(zhì)XB 為空白樣品的平均“濃度”：XPL 為含有允許限度的分析物的樣品的平均濃度；XS 為污染樣品的平均濃度；SPL 為含有允許限度的分析物的樣品的標(biāo)準(zhǔn)差(在實驗室內(nèi)部重現(xiàn)性條件下確定的)；SS 為含有樣品的標(biāo)準(zhǔn)差(在實驗室內(nèi)部重現(xiàn)性條件下確定的)；α為假的不符合規(guī)定的結(jié)果的比例：β為假的符合規(guī)定的結(jié)果的比例：CCα為在給定α誤差和50％β誤差時的反應(yīng)；CCβ為在非常小的α誤差和β誤差時的反應(yīng)，21 / 21