【正文】 可以用實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)差來評估該方法的重現(xiàn)性。圖1 所示的是一種檢測方法的檢測容量(CCβ)圖。借助于這些這一實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，就有可能決定，由于某因子明顯偏離標(biāo)準(zhǔn)差，是否應(yīng)將所篩選的因子中的某個或其他因子從總的校準(zhǔn)曲線中去除。因此，整個驗(yàn)證程序的第1步是，分析在將來的實(shí)驗(yàn)室中為了篩選最重要的種類而將用于分析的樣品種群以及可能影響測定結(jié)果的那些因素。對于已經(jīng)證明對測定結(jié)果具有重大影響的所有大的變化，應(yīng)對其每個操作特性進(jìn)行確定。分析樣品并鑒定分析物。在這種情況下，僅僅保留≤5％錯誤的順應(yīng)的結(jié)果，濃度水平等于該方法的檢測容量。鑒定后，根據(jù)添加的物質(zhì)濃度繪圖。 檢測容量(CCβ)應(yīng)根據(jù)所定義的(見第2 部分)篩選、鑒別或鑒別加定量的要求確定檢測容量。鑒定后，根據(jù)添加的物質(zhì)濃度繪圖。這種方法適用于定性和定量檢測。鑒定后，根據(jù)添加的物質(zhì)濃度繪圖。 確定限(CCα)確定限要依據(jù)“分析方法的工作標(biāo)準(zhǔn)和其他要求”(第2 部分)中關(guān)于鑒別或鑒別加定量定義的要求確定。當(dāng)沒有得到任何上述條件(或假定)。所以，為減少工作量，建議可能的情況下組合試驗(yàn)(例如，重現(xiàn)性和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的特異性檢測的重現(xiàn)性，確定決定限的空白樣品分析和特異性檢測的試驗(yàn))。 傳統(tǒng)的確證程序依據(jù)傳統(tǒng)的方法計(jì)算參數(shù)要求有幾個單獨(dú)的試驗(yàn)工作。 校準(zhǔn)曲線當(dāng)校準(zhǔn)曲線用于定量時：——至少有五個水平(包括零)用于繪制曲線；——要描述曲線的工作范圍；——要描述曲線的數(shù)學(xué)公式和數(shù)據(jù)對曲線的吻合情況；——要描述曲線可接受的參數(shù)范圍。組織應(yīng)至少儲存在—20℃以下或根據(jù)要求采用更低的溫度?；|(zhì)中分析物的穩(wěn)定性：——只要可能，應(yīng)選用實(shí)際的樣品?！盅b適宜的體積至合適的容器中，貼標(biāo)簽并根據(jù)計(jì)劃保存：表10 分析物在溶液中穩(wěn)定性測定計(jì)劃保存條件—20℃十 4℃十 20℃暗處10 等份試樣10 等份試樣10 等份試樣亮處——10 等份試樣——保存時間可以選擇為4 星期或根據(jù)需要選擇更長時間，必要時直到在鑒別和或定量試驗(yàn)中觀察到第一次降解現(xiàn)象。當(dāng)這些不知道時，下面舉例說明如何測定穩(wěn)定性。表9 耐用性研究試驗(yàn)設(shè)計(jì)(較小的變化)因素值測定數(shù)字的組合F12345678A/aAAAAaaaaB/bBBBbBBbbC/cCCCcCcCcD/dDDddddDDE/eEeEeeEeEF/fFffFFffFG/gGggGgGGg觀察的結(jié)果RSTUVWXYZ 穩(wěn)定性已經(jīng)觀察到樣品中分析物或基質(zhì)組成成分在保存或分析過程中不十分穩(wěn)定可能引起分析結(jié)果中出現(xiàn)嚴(yán)重偏差。這樣結(jié)果有27或128 種不同的可能的組合。Youd方法是一種部分因素的設(shè)計(jì)。這樣的因素可能包括分析員、試劑的來源和年限、溶劑、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品提取物、加熱速度、溫度、pH 值和許多其他可能在實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)的因素。舉例如下：——按照方法測試指南分析六份基準(zhǔn)物質(zhì)的重復(fù)樣品；——測定存在于每份重復(fù)樣品中分析物的濃度；——計(jì)算這些濃度值的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù)(％)；——通過將測定的濃度平均值除以核準(zhǔn)值(測定濃度)再乘以100 計(jì)算真實(shí)性，結(jié)果用百分?jǐn)?shù)表示。 真實(shí)性在本節(jié)，定量的真實(shí)性(準(zhǔn)確度的一個組分)被描述。為減少工作負(fù)荷量，可以采用仔細(xì)設(shè)計(jì)并具有統(tǒng)計(jì)意義的方法將測定不同參數(shù)的試驗(yàn)合并進(jìn)行。確證也能通過進(jìn)行如食品法典，國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)或國際理論和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(IUPAC)確定的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)試驗(yàn)來完成，或根據(jù)替代方法如單個實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)或內(nèi)部確證。不同的檢查目的要求不同的方法種類。色譜條件下最近的峰的極大處應(yīng)該與指定分析物的峰分離，至少為完整的分析物峰的最大高度10％的一個全峰峰寬。樣品基質(zhì)和檢測器性能引起的變異應(yīng)該被檢查。對于220nm 以上的分析物，具有相對吸收系數(shù)≥10％的兩個光譜部分，其光譜應(yīng)該與校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品光譜沒有顯而易見的區(qū)別。 全掃描UV／VIS 檢測液相方法的性能標(biāo)準(zhǔn)必須達(dá)到。相同實(shí)驗(yàn)條件下，分析物在相應(yīng)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品典型的保留時間下被洗脫。HPLC 與全掃面二極管點(diǎn)陣(DAD)連用：HPLC 與熒光檢測器連用；HPLC 與免疫血清學(xué)連用； (4)轉(zhuǎn)換產(chǎn)物包括子離子和次級子離子產(chǎn)物。96/23/EC 指令附錄Ⅰ的A 組的物質(zhì)的確認(rèn)需要最少4 個識別點(diǎn)，96/23/EC 指令附錄Ⅰ的B 組的物質(zhì)的確認(rèn)需要最少3個識別點(diǎn)。在這種情況下，測試樣品的質(zhì)譜數(shù)據(jù)和校準(zhǔn)溶液的質(zhì)譜數(shù)據(jù)的比較必須超過關(guān)鍵匹配因子。任何使用背景校正時，應(yīng)在整批的測定規(guī)程中(，第四段)采用背景校正，并被清楚的指出。20％＞20％～50％177。每一診斷離子的信噪比(S/N)應(yīng)大于3。在高分辨率質(zhì)譜(HRMS)中，全質(zhì)譜范圍10%峰谷上分辨率應(yīng)典型地超過10000。測試部分分析物的保留時間(相對保留時間)應(yīng)在特定保留時間平臺內(nèi)與校正的標(biāo)準(zhǔn)保留時間一致。對于有規(guī)定的允許限度的物質(zhì)， 倍允許限度的濃度時相應(yīng)得到的重現(xiàn)性CV。因此，歐盟對低于100μg/kg 的質(zhì)量范圍時僅其CVs應(yīng)盡可能地低。g/kg431 181。 定量方法的精密度對于測試物中的禁用物質(zhì)，精密度實(shí)驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限三個水平進(jìn)行；對于已制定MRL的，精密度實(shí)驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、MRL、選一合適點(diǎn)三個水平進(jìn)行；對于未制定MRL的，精密度實(shí)驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、常見限量指標(biāo)、選一合適點(diǎn)三個水平進(jìn)行。任何與這種順序不同的變化應(yīng)被證明是適宜的。此時，只需獲得一個峰，增高的峰的高度(或面積)應(yīng)等于加入的分析物的量。僅根據(jù)色譜分析而不采用光譜檢測的方法不適于單獨(dú)作為確認(rèn)方法。但是，如果一個技術(shù)缺乏足夠的特異性，應(yīng)該通過包括合適的凈化，色譜分離和光譜檢測等分析技術(shù)來達(dá)到所需的特異性。 篩選方法只有那些以記錄的可追溯方式證明其有效，并且在測定的水平假符合串＜5％(β－誤差)的分析技術(shù)才可用于指令96/23/EC 規(guī)定的篩選目的。 特異性在試驗(yàn)條件下一個方法應(yīng)能區(qū)分分析物和其他物質(zhì)之間的差別。樣品處理過程應(yīng)防止偶然污染或丟失分析物的可能性。 單位指ISO 31(20)和歐盟指令71/354/EC 中所述的那些單位。 測試部分指從進(jìn)行檢測或觀察的測試樣品分出的物質(zhì)的量。所加標(biāo)準(zhǔn)分析物的量必須是樣品中估計(jì)的分析物的量的2 倍到5 倍之間。 特異性一種區(qū)別被測分析物與其他物質(zhì)的能力的方法。 篩選方法用來測定關(guān)注水平的某一物質(zhì)或某類物質(zhì)的存在方法。 重現(xiàn)條件在不同試驗(yàn)室由不同的操作人，用不同的儀器、相同的方法對同一個檢測項(xiàng)目進(jìn)行檢測，獲得的獨(dú)立檢測結(jié)果的條件。 基準(zhǔn)物質(zhì)指其一種或幾種特性已經(jīng)被