《細胞的換液與傳代》ppt課件-預(yù)覽頁
【正文】 離心法：離心后去上清，加培養(yǎng)液，吹 打，傳代。 連續(xù)細胞系 continuous cell line：可連續(xù)傳代的細胞系，即已建成的細胞系。 有限細胞系 finite cell line: 不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限。 ?（一）傳代培養(yǎng)的方法 ? 從生長器皿上解離細胞的方法： ? 1）震蕩法。 傳代數(shù)或代數(shù)：指對培養(yǎng)物傳代的次數(shù)。 ? 證明細胞系的種系。同工酶方法是快速有效的，每一個細胞系在瓊脂糖電泳上有特異的同工酶帶型。 （一） 克隆培養(yǎng)技術(shù) 稀釋鋪板法 飼養(yǎng)層克隆法 膠原膜板 瓊脂克隆法等 分類： ：最常用 消化 — 低密度細胞懸液制備 — 接種 — 標(biāo)記與培養(yǎng) — 分離擴大培養(yǎng) — 觀察 — 移植瓶或皿內(nèi)培養(yǎng) 稀釋鋪板法圖解 ? 注意事項： ? 1）確保一個細胞 ? 2）輪廓清晰完整，體積適宜健康 ? 3）不需換液 飼養(yǎng)層克隆法 ? 飼養(yǎng)細胞（ feeder cell）：也稱滋養(yǎng)細胞，是一層經(jīng)過射線或絲裂霉素 C處理過的供其它細胞附著的細胞層。 10個 /ml ? 培
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