細(xì)胞的換液與傳代ppt課件-免費(fèi)閱讀
【正文】 10個(gè) /ml ? 培養(yǎng)液。同工酶方法是快速有效的，每一個(gè)細(xì)胞系在瓊脂糖電泳上有特異的同工酶帶型。 傳代數(shù)或代數(shù)：指對(duì)培養(yǎng)物傳代的次數(shù)。 有限細(xì)胞系 finite cell line: 不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限。 ? 2）胰蛋白酶消化法 ? 3）胰蛋白酶 檸檬酸鹽 ? 4）用 EDTA洗細(xì)胞再用胰蛋白酶 檸檬酸鹽處理 ? 5） EDTA洗再用胰蛋白酶 EDTA消化 ? 6） EDTA洗再用胰蛋白酶 膠原酶配合檸檬酸鹽或 EDTA消化 7）機(jī)械刮削法（ scraping） 8）分散酶（ )或蛋白酶 ( 1mg/ml) : 倒出舊液 PBS洗滌 胰蛋白酶消化 吸出消化液 加入培養(yǎng)液 吹散細(xì)胞 計(jì)數(shù) 稀釋 培養(yǎng) 離心法：離心后去上清，加培養(yǎng)液，吹 打，傳代。染色體分析、同工酶分析、 DNA指紋技術(shù)。成纖維細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。 ? 懸浮細(xì)胞克隆分離 ? 24孔板加入 1ml培養(yǎng)液 — 用毛細(xì)吸管吸取群落 — 吹入培養(yǎng)板內(nèi) ? 概念：細(xì)胞系，細(xì)胞株，傳代培養(yǎng)，細(xì)胞
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