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正文內(nèi)容

《細(xì)胞的換液與傳代》ppt課件-全文預(yù)覽

  

【正文】 吸取群落 — 吹入培養(yǎng)板內(nèi) ? 概念:細(xì)胞系,細(xì)胞株,傳代培養(yǎng),細(xì)胞克隆,克隆形成率 ? 鑒定細(xì)胞系應(yīng)包含的內(nèi)容 ? 常見的克隆培養(yǎng)技術(shù)有哪幾種,簡(jiǎn)要敘述其技術(shù)要點(diǎn) ? 影響克隆形成率的因素 ? 克隆分離的方法和技術(shù)要點(diǎn) 。 HamF12k ? 血清 ? 飼養(yǎng)細(xì)胞 ? 激素和生長(zhǎng)因子:胰島素,地塞米松, EGF, BFGF。成纖維細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。 DNA指紋技術(shù)也可以鑒定。染色體分析、同工酶分析、 DNA指紋技術(shù)。 盡量少傳代,避免轉(zhuǎn)化。 ? 2)胰蛋白酶消化法 ? 3)胰蛋白酶 檸檬酸鹽 ? 4)用 EDTA洗細(xì)胞再用胰蛋白酶 檸檬酸鹽處理 ? 5) EDTA洗再用胰蛋白酶 EDTA消化 ? 6) EDTA洗再用胰蛋白酶 膠原酶配合檸檬酸鹽或 EDTA消化 7)機(jī)械刮削法( scraping) 8)分散酶( )或蛋白酶 ( 1mg/ml) : 倒出舊液 PBS洗滌 胰蛋白酶消化 吸出消化液 加入培養(yǎng)液 吹散細(xì)胞 計(jì)數(shù) 稀釋 培養(yǎng)
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