《細胞的換液與傳代》ppt課件-全文預覽
【正文】 吸取群落 — 吹入培養(yǎng)板內 ? 概念：細胞系，細胞株，傳代培養(yǎng)，細胞克隆，克隆形成率 ? 鑒定細胞系應包含的內容 ? 常見的克隆培養(yǎng)技術有哪幾種，簡要敘述其技術要點 ? 影響克隆形成率的因素 ? 克隆分離的方法和技術要點 。 HamF12k ? 血清 ? 飼養(yǎng)細胞 ? 激素和生長因子：胰島素，地塞米松， EGF， BFGF。成纖維細胞、胸腺細胞和巨噬細胞。 DNA指紋技術也可以鑒定。染色體分析、同工酶分析、 DNA指紋技術。 盡量少傳代，避免轉化。 ? 2）胰蛋白酶消化法 ? 3）胰蛋白酶 檸檬酸鹽 ? 4）用 EDTA洗細胞再用胰蛋白酶 檸檬酸鹽處理 ? 5） EDTA洗再用胰蛋白酶 EDTA消化 ? 6） EDTA洗再用胰蛋白酶 膠原酶配合檸檬酸鹽或 EDTA消化 7）機械刮削法（ scraping） 8）分散酶（ )或蛋白酶 ( 1mg/ml) : 倒出舊液 PBS洗滌 胰蛋白酶消化 吸出消化液 加入培養(yǎng)液 吹散細胞 計數(shù) 稀釋 培養(yǎng)
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鄂ICP備17016276號-1