堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測(cè)定-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 +HPO42 無(wú)色 黃色 可通過(guò)分光光度法測(cè)定產(chǎn)物 pNP的含量，求出反應(yīng)速度v。 (二 )米氏常數(shù)的測(cè)定 原理 酶促反應(yīng) v[S]曲線 v [S] 推導(dǎo)出米氏方程為： 其中 [S]為底物濃度； v為初速度； Vm為最大反應(yīng)速度；Km 為米氏常數(shù) ][][SKSVvmm?? 米氏常數(shù) Km是酶的一個(gè)基本特征常數(shù)，它包含著酶與底物結(jié)合和解離的性質(zhì)。實(shí)驗(yàn)八 堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測(cè)定 石 巍 一、目的要求 （ Km）及最大反應(yīng)速度（ Vm）的測(cè)定的原理和方法，測(cè)出堿性磷酸酶在以對(duì)硝基酚磷酸為底物時(shí)的 Km 和 Vm值。 （ 3） 摩爾吸光系數(shù)法 C=A/?（ ?為 L=1cm， C為 1mol/L時(shí)的吸光系數(shù) ， 也稱為摩爾吸光系數(shù) 。 最常用的LineweaverBurk雙倒數(shù)作圖法。 求出 pNP的克分子消光系數(shù) (?)值 。 以 1/v對(duì) 1/[S]作圖 ， 求出酶催化 pNPP水解的米氏常數(shù) Km和最大反應(yīng)速度Vm。 4. 空白對(duì)照一定要先加 NaOH， 后加酶 。 3 3 39。 (2)為什么說(shuō)的米氏常數(shù) Km是酶的一個(gè)特征常數(shù)而 Vm則不是 ？
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