堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定(更新版)
【正文】 (?mol數(shù) )為橫坐標(biāo) ， OD405nm值為縱坐標(biāo) ， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 3. 加酶前后一定要將試劑混勻 。 加酶時(shí)間 （ min） m 1m 2m 3m 4m 5m 加NaOH時(shí)間 11 12 13 14 15 反應(yīng)時(shí)間 （ min） 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 五 、 思考題 (1) 試說明的米氏常數(shù) Km的物理意義和生物學(xué)意義 。 5. 測定 OD405時(shí)要以各自的空白調(diào)零點(diǎn) 。 (二）測定 15支試管， 15做兩組平行測定管， 0105作為空白對照。 (二 )米氏常數(shù)的測定 原理 酶促反應(yīng) v[S]曲線 v [S] 推導(dǎo)出米氏方程為： 其中 [S]為底物濃度； v為初速度； Vm為最大反應(yīng)速度；Km 為米氏常數(shù) ][][SKSVvmm?? 米氏常數(shù) Km是酶的一個(gè)基本特征常數(shù)，它包含著酶與底物結(jié)合和解離的性質(zhì)。 （ 3） 摩爾吸光系數(shù)法 C=A/?（ ?為 L=1cm， C為 1mol/L時(shí)的吸光系數(shù) ， 也稱為摩爾吸光系數(shù) 。 求出 pNP的克分子消光系數(shù) (?)值 。 4. 空白對照一定要先加 NaOH， 后加酶 。 (2)為什么說的米氏常數(shù) Km是酶的一個(gè)特征常數(shù)而 Vm則不是 ？
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