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堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測(cè)定-wenkub

2023-01-21 06:38:09 本頁(yè)面
 

【正文】 二、分光光度計(jì)的使用 儀器操作鍵介紹 “方式設(shè)定”鍵( MODE):用于設(shè)置測(cè)試方式 —— 透射比( T)、吸光度( A)、已知樣品濃度值( C)、已知標(biāo)準(zhǔn)樣品斜率( F) “ 100%”鍵:用于自動(dòng)調(diào)整 %T(透射比 )或 0ABS(零吸光度 ) “0%”鍵:用于自動(dòng)調(diào)整零透射比 “波長(zhǎng)設(shè)置”旋鈕:用于設(shè)置分析波長(zhǎng) ① 打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),使儀器預(yù)熱 20分鐘 ② 用“波長(zhǎng)設(shè)置”按鈕將波長(zhǎng)設(shè)置在您將要使用的分析波長(zhǎng)位置上 ③ 按“方式鍵”( MODE)將測(cè)試方式設(shè)置為透射比( T) ④將參比溶液和被測(cè)溶液分別倒入比色皿中 ⑤ 打開(kāi)樣品室蓋,將盛有溶液的比色皿和黑體分別插入比色皿槽中,蓋上樣品室蓋 ⑥蓋好樣品室蓋,將黑體推或拉入光路,按“ 0%”鍵調(diào)透射比零 ⑦將參比溶液推入或拉入光路中,按“ 100%”調(diào) ⑧ 按“方式鍵”( MODE)將測(cè)試方式設(shè)置為吸光度( A) ⑨ 將被測(cè)溶液拉入光路中,此時(shí),顯示器上所顯示是被測(cè)樣品的吸光度參數(shù) 實(shí)驗(yàn)完成后,關(guān)閉電源,洗凈比色皿,并蓋好蓋布。特別是同一種酶能夠作用于幾種不同底物時(shí),米氏常數(shù) Km往往可以反映出酶與各種底物的親和力的強(qiáng)弱。 二、原理 一 、 分光光度法的基本原理及方法 ( 一 ) 利用吸收光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析 1. 原理 ( 二 ) 利用吸收光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析 1. 原理 BeerLambert( 比爾 ) 定律: T=I/I0 A=lg1/T=lgI0/I A=KCL 其中: T為透光率; A為吸光率; I0為入射光強(qiáng)度; I為透射光強(qiáng)度
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