堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定-wenkub
2023-01-21 06:38:09 本頁面
【正文】 二、分光光度計(jì)的使用 儀器操作鍵介紹 “方式設(shè)定”鍵（ MODE）：用于設(shè)置測試方式 —— 透射比（ T）、吸光度（ A）、已知樣品濃度值（ C）、已知標(biāo)準(zhǔn)樣品斜率（ F） “ 100%”鍵：用于自動(dòng)調(diào)整 %T(透射比 )或 0ABS(零吸光度 ) “0%”鍵：用于自動(dòng)調(diào)整零透射比 “波長設(shè)置”旋鈕：用于設(shè)置分析波長 ① 打開電源開關(guān)，使儀器預(yù)熱 20分鐘 ② 用“波長設(shè)置”按鈕將波長設(shè)置在您將要使用的分析波長位置上 ③ 按“方式鍵”（ MODE）將測試方式設(shè)置為透射比（ T） ④將參比溶液和被測溶液分別倒入比色皿中 ⑤ 打開樣品室蓋，將盛有溶液的比色皿和黑體分別插入比色皿槽中，蓋上樣品室蓋 ⑥蓋好樣品室蓋，將黑體推或拉入光路，按“ 0%”鍵調(diào)透射比零 ⑦將參比溶液推入或拉入光路中，按“ 100%”調(diào) ⑧ 按“方式鍵”（ MODE）將測試方式設(shè)置為吸光度（ A） ⑨ 將被測溶液拉入光路中，此時(shí)，顯示器上所顯示是被測樣品的吸光度參數(shù) 實(shí)驗(yàn)完成后，關(guān)閉電源，洗凈比色皿，并蓋好蓋布。特別是同一種酶能夠作用于幾種不同底物時(shí)，米氏常數(shù) Km往往可以反映出酶與各種底物的親和力的強(qiáng)弱。 二、原理 一 、 分光光度法的基本原理及方法 （ 一 ） 利用吸收光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析 1． 原理 （ 二 ） 利用吸收光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析 1． 原理 BeerLambert（ 比爾 ） 定律： T=I/I0 A=lg1/T=lgI0/I A=KCL 其中： T為透光率； A為吸光率； I0為入射光強(qiáng)度； I為透射光強(qiáng)度
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