《chap糖類藥物》ppt課件-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 用 水 或 鹽溶液 直接提取，但因大部粘多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合于細(xì)胞中，因此需用 酶解法 或 堿解法 使糖 白質(zhì)間的結(jié)合鍵斷裂，促使 多糖釋放 ? ? 一般組織中存在 多種 粘多糖。這類多糖不宜用 堿解法提取 。 ? （二）多糖的純化 試劑和器材 一、試劑 平衡緩沖溶液： , PH=。 二、材料 灰樹花子實(shí)體。在濃縮液中加入 3倍體積的乙醇攪拌，沉淀為多糖和蛋白質(zhì)的混合物，此為粗多糖。 ? 取樣品 10ml , PH=。合并多糖高峰部分，濃縮后透析，凍干，即得多糖級(jí)分。 ? 本實(shí)驗(yàn)利用紅外光譜對(duì)多糖進(jìn)行鑒定。 ? 展開劑 :正丁醇：乙酸乙酯：異丙醇：醋酸：乙醇：水：吡啶＝ 7： 20： 12： 7： 6： 6。 ? 操作方法 ? 一、單糖組分分析 ? 1．薄層板制備：稱取硅膠 5g于 50ml燒杯中，加入用 12 mL ／ L 磷酸二氫鈉水溶，用玻璃棒慢慢攪拌至硅膠分散均勻，鋪在玻璃板上(7． 5cm 10cm)， 110℃ 活化 1h。用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊 ，點(diǎn)樣直徑為 2— 4mm，點(diǎn)間距離約為 — ，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。 ? 薄層顯色后，將樣品圖譜與標(biāo)準(zhǔn)樣圖譜進(jìn)行比較，參考斑點(diǎn)顏色、相對(duì)位置及 Rf值，確定樣品中有哪幾種糖。 ? 單糖標(biāo)準(zhǔn)品。 ? 2．點(diǎn)樣：稱取少許的多糖 (0． 1克 )于 2． 0mL離心管中，加入 1M的硫酸 1mL，沸水浴水解 2h，然后加氫氧化鋇中和至中性，過(guò)濾除去硫酸鋇沉淀，得多糖水解澄清液。 ? 3．展開：展開室如需預(yù)先用展開劑飽和，將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊 — （切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中），密封室蓋，等展開至規(guī)定距離（一般為 10— 15cm），取出薄層
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