【正文】 . 測(cè)定方法： 取本品適量，加水制成每 1ml中含 ，取 20μl 注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度和記錄儀衰 減，使主成分的峰高為記錄儀滿量程的 24倍，記錄 時(shí)間應(yīng)為主成分峰保留時(shí)間的 2倍。 以阿托品為例，水解生成莨菪醇 (Ⅰ) 和莨菪 酸 (Ⅱ) 。利用此性質(zhì)可區(qū)別阿托品與東莨菪堿 。 氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿形成的鹽 ， 通過(guò)其 5%水溶 液的 pH值為 ～ ， 來(lái)控制本品中的酸性雜質(zhì) 。 硫氮雜蒽母核的 硫 為 二價(jià) ，易氧化為砜和亞砜，其紫外吸 收光譜有明顯不同，它們具有四個(gè)峰值。 （ 一）紫外特征吸收和紅外吸收光譜 本類藥物可用 UV和 IR鑒別， UV鑒別實(shí)例如下： 藥物名稱 溶 劑 濃度（ μg/ml ） λ max（ nm） A E1%1cm 鹽酸氯丙嗪 鹽酸（ 9 →1000 ） 5 254 915 306 — — 鹽酸異丙嗪 鹽酸（ ） 6 249 — 883~937 奮乃靜 無(wú)水乙醇 7 258 — 癸氟奮乃靜 乙醇 10 260 — — 鹽酸氟奮乃靜 鹽酸（ 9 →1000 ） 10 255 — 553~593 鹽酸三氟拉嗪 鹽酸（ 1 →20 ） 10 256 — 630 鹽酸硫利達(dá)嗪 乙醇 8 264與 315 — — 二、鑒別試驗(yàn) （ 二）顯色反應(yīng) 1. 與氧化劑的顯色反應(yīng) 藥物名稱 硫 酸 硝 酸 過(guò)氧化氫 鹽酸氯丙嗪 顯紅色 , 漸變淡黃色 — 鹽酸異丙嗪 顯櫻桃紅色 ,放置 生成紅色沉淀 ,加熱即溶解 , 后顏色漸變深 溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色 奮乃靜 — — 顯深紅色 。 600℃ 熾灼 (一 )鹽酸異丙嗪中特殊雜質(zhì)檢查 主要有： 2二甲氨基 1丙醇； N,N,β 三甲基 10H吩噻嗪 10乙胺異構(gòu)體和結(jié)構(gòu)不清的分解產(chǎn)物 。沉淀反應(yīng) 氯氮卓 橙紅色 沉淀 阿普唑侖 鹽酸氟西泮 ＋ KBiI4 也生成 橙紅色 沉淀 氯硝西泮 放置后，沉淀顏色變深， 因此可以相互區(qū)別。 。 2,284177。 2 奧沙西泮 乙醇 10 229, 315177。由于不同的苯并二氮雜卓類藥物水解后可能會(huì) 獲得相同的二苯甲酮衍生物，因此本法的 專屬性較差 。 三、特殊雜質(zhì)檢查 地西泮在合成過(guò)程中因其副反應(yīng)， 可能引入 N去甲基苯甲二氮卓 及 化學(xué)結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì) ，可 采用 TLC法中的高低濃度對(duì)比法進(jìn)行檢查。 檢測(cè)結(jié)果： 氨基物（ Ⅱ ）的 tR為 、 氧化物（ Ⅲ ）的 tR 為 ， 痕量雜質(zhì)（ Ⅳ 、 Ⅴ 、 Ⅵ ）的 tR為 、 、 。 BH+?A + HClO4 BH+?ClO4 + HA 游離堿類鹽 被置換出的弱酸 因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測(cè)定條件。 另外， 在冰醋酸中加入不同量的 甲酸 ，也能使滴定突躍顯著增 大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測(cè)定結(jié)果 。HAc + HgX2 過(guò)量 (1～ 3倍 )不影響測(cè)定結(jié)果 非水溶液滴定法所用的溶劑為醋酸 ， 具有 揮發(fā)性 ， 膨脹系數(shù)較大 ， 溫度和貯存條件都影響滴定劑的濃度 ?；谶@些藥物分子結(jié) 構(gòu)中氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法直接測(cè)定其含量。應(yīng)用示例如下： 藥物名稱 取樣量 (g) 溶 劑 加入醋酸汞試液 (ml) 指示劑 終點(diǎn)顏色 鹽酸氯丙嗪 醋酐 10ml 5 橙黃 Ⅳ 玫瑰紅色 鹽酸異丙嗪 冰醋酸 10ml 4 結(jié)晶紫 藍(lán)色 鹽酸氟奮乃靜 冰醋酸 20ml 5 結(jié)晶紫 藍(lán)綠色 鹽酸環(huán)丙沙星 冰醋酸 25ml 5 橙黃 Ⅳ 粉紅色 氫溴酸東莨菪堿 冰醋酸 20ml 5 結(jié)晶紫 純藍(lán)色 鹽酸硫利達(dá)嗪 丙酮 100ml 5 電位滴定法 硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級(jí)解離，生 成 SO42， 但在 非水介質(zhì)中 ，只顯示一元酸解離為 HSO4， 即只供給一個(gè) H+， 所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只 能滴定至硫酸氫鹽，因此可以用高氯酸滴定液直接滴 定。ClO4 + (BH+)其反應(yīng)式如下： (C20H24N2 2H+)此時(shí) 1摩爾的硫酸奎寧 可 消耗 4摩爾 的 高氯酸 ，因此片劑分析的滴定度與原料藥分析的滴定度不 同。 磷酸與有機(jī)酸在冰醋酸介質(zhì)中酸性極弱，不 影響滴定反應(yīng)的定量完成，可以按常規(guī)方法直接 滴定 。( B H+ I n)+H I n H+ I n+B H+ B H+ 2. 影響因素 (1) 水相最佳 pH值的選擇： 本法中水相的 pH應(yīng)使有機(jī)堿性藥 物均成陽(yáng)離子 (BH+)， 而酸性染料應(yīng)電離足夠的陰離子 (In ),陰陽(yáng) 離子才能定量生成離子對(duì)，并完全溶于有機(jī)溶劑中，而過(guò)量的染料 完全保留在水相中，才能保證定量的測(cè)定。常用的有機(jī)溶 劑有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、苯、甲苯、四氯化碳等。 （二）鈀離子比色法 優(yōu)點(diǎn)： 鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的 吩噻嗪類藥物的測(cè)定。 在 249nm， 采用 E1cm1%＝ 910測(cè)定。 四、紫外分光光度法 (二 )萃取后分光光度法 鹽酸氯丙嗪注射液 鹽酸氯丙嗪 氨水堿化 氯丙嗪 乙醚提取 乙醚層 鹽酸提取 鹽酸氯丙嗪 ?max254177。 abbaaababababaCAAAlCAAAAAAAAA???????????????? )()()(212121221121??????????????（四）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法 鹽酸氯丙嗪注射液 抗氧劑維生素 C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線 ， 不干擾鹽酸氯丙嗪的測(cè)定 。 精密量取鹽酸氯丙嗪注射液 ， 按光譜繪制項(xiàng) 下的方法，測(cè)得二階導(dǎo)數(shù)光譜，量取光譜峰 谷 (266nm～ 254nm) 距離，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出濃度，計(jì)算百分含量。 (4)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)： 取對(duì)照品溶液 1μl ， 進(jìn)樣 6次 ， 所得的對(duì) 照品和內(nèi)標(biāo)峰面積之比的 RSD不大于 %；對(duì)照品峰和內(nèi)標(biāo)峰的 分辨率 Rs＜ ； T＜ 。H2SO4 (1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)： ODSC18； 流動(dòng)相為甲醇 水 (70:30) ；檢測(cè)波長(zhǎng)為 254nm 。 精密量取該溶液與 內(nèi)標(biāo)溶液各 5ml， 置 25ml量瓶中 ， 用甲醇稀釋至刻度 ， 搖勻 。 回收率試驗(yàn) ： 樣品測(cè)定： 本法以艾司唑侖為內(nèi) 標(biāo)，用氯仿 異丙醇混合溶劑提取，氮?dú)饬鞔蹈?，用甲醇溶? 后進(jìn)樣，測(cè)定了剖腹產(chǎn)產(chǎn)婦及胎兒血漿中地西泮濃度。 與硝酸銀試液反應(yīng) 硫酸反應(yīng) C. 戊烯二醛反應(yīng) D. 水解后重氮化 偶合反應(yīng) E. 重氮化 偶合反應(yīng) 1. 異煙肼 2. 苯巴比妥 3. 尼可剎米 4. 氯氮卓 A B C D