[理學(xué)]第六章 酶-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 , 也稱 synthetases合成酶類） 將兩個(gè)小分子合成一個(gè)大分子，通常需要 ATP供能。”隔開，前面冠以 EC（為 Enzyme Commission）。 而反應(yīng)速度快慢 ,則主要取決于反應(yīng)的活化能 Ea。 E + S ==== ES ??? P + E 許多實(shí)驗(yàn)事實(shí)證明了 E－ S復(fù)合物的存在。 酶活性中心是酶分子中具有三維結(jié)構(gòu)的區(qū)域，或?yàn)榱芽p，或?yàn)榘枷?，深入到酶分子?nèi)部，常為氨基酸殘基的疏水基團(tuán)組成的。 四、誘導(dǎo) — 契合學(xué)說(shuō) （ b）鎖鑰學(xué)說(shuō) 認(rèn)為整個(gè)酶分子的天然構(gòu)象是具有剛性結(jié)構(gòu)的，酶表面具有特定的形狀。 ?酶原的激活 在一定條件下，酶原向有活性酶轉(zhuǎn)化的過(guò)程。 ?概念 研究各種因素對(duì) 酶促反應(yīng)速度 的影響，并加以定量的闡述。 （ 2）應(yīng)使 [S][E]。 1． 反應(yīng)速度與酶濃度成正比 [S][E] V∝ [E] 0酶 濃 度反應(yīng)速度 二、酶濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響 2． V與 [E] 關(guān)系的幾點(diǎn)討論 1．米氏方程的提出 三、底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響 第一步 : E+S ES 中間復(fù)合物學(xué)說(shuō)： 第二步 : ES→E+P V∝ [ES] 1913年 Michaelis和Menten推導(dǎo)了米氏方程 ]S[K]S[Vvmm a x??[S]：底物濃度 V：不同 [S]時(shí)的反應(yīng)速度 Vmax：最大反應(yīng)速度 Ｋ m：米氏常數(shù) 當(dāng)反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí) ? Km值的推導(dǎo) Km＝ [S] ∴ Km值等于酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度，單位是 mol/L。 另一方面 ,溫度升高 ,酶的高級(jí)結(jié)構(gòu)將發(fā)生變化或變性，導(dǎo)致酶活性降低甚至喪失。 反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，最適溫度低。反應(yīng)的溫度、時(shí)間等的影響。 （ 2）陰離子：如 Cl、 Br、 I、 CN 等 （ 3）氫離子 七、 抑制劑對(duì)酶活性的影響 使酶的活性降低或喪失的現(xiàn)象，稱為酶的抑制作用。如有機(jī)磷毒劑二異丙基氟磷酸酯。抑制劑可以通過(guò)透析等方法被除去，并且能部分或全部恢復(fù)酶的活性。 竟?fàn)幮砸种仆ǔ？梢酝ㄟ^(guò)增大底物濃度，即提高底物的競(jìng)爭(zhēng)能力來(lái)消除。 非竟?fàn)幮砸种? ⑴ 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑往往是酶的底物類似物或反應(yīng)產(chǎn)物； ⑵ 抑制劑與酶的結(jié)合部位與底物與酶的結(jié)合部位相同； ⑶ 抑制劑濃度越大 ， 則抑制作用越大；但增加底物濃度可使抑制程度減小； ⑷ 動(dòng)力學(xué)參數(shù)： Km值增大 ， Vm值不變 。 酶活力的大小可用一定條件下酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的速度來(lái)表示， 速度大 酶活力高， 速度小 酶活力低。 總活力＝單位體積的酶活力 (IU/ml) 分離溶液總體積 (ml) 酶活力 蛋白質(zhì)濃度 二、 酶活力測(cè)定的兩種方式 （ 1）終點(diǎn)法： 測(cè)定完成一定量反應(yīng)所需要的時(shí)間。 例如：今有 1g淀粉酶制劑，溶解在 1000ml水中，從中取出 ，與 20ml2％的淀粉溶液在 30℃ ，PH6的條件下一起作用， 10min后就與碘不起顏色反應(yīng)，該酶制劑的活力單位按每 1小時(shí)分解 1g淀粉為 1個(gè)單位（ g/h=U）來(lái)計(jì)算，應(yīng)為： 6 0 1 0 0 02 0 2 4 8 0 0 /1 0 0 .5? ? ? ?％ 單 位 克 酶 制 劑 （ 3）酶活力測(cè)定的主要方法 化學(xué)滴定法、分光光度法、量氣法、pH測(cè)定法、氧和過(guò)氧化氫的極譜測(cè)定、旋光法、色譜法、熒光法 （ 2）動(dòng)力學(xué)法： 測(cè)定一定時(shí)間內(nèi)酶催化的化學(xué)反應(yīng)量。 （ 2） β－淀粉酶：外切酶，只能水解 α－ 1， 4糖苷鍵，不能水解 α－ 1， 6糖苷鍵。其最適 PH為 45，最適溫度約 40℃ － 60℃ 。 C1酶和 Cx酶主要溶解纖維素， CB酶主要將纖維二糖、纖維三糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖，當(dāng)三個(gè)主要成分的活性比例適當(dāng)時(shí)，就能協(xié)同作用完成對(duì)纖維素降解。 特點(diǎn) 1）催化選擇性強(qiáng) 2） “ 油脂 水 ” 兩相的界面發(fā)揮作用 應(yīng)用 牛奶、奶酪、干果的加工中調(diào)控風(fēng)味；皮革、絹紡等。 3）微生物蛋白酶 蛋白酶制劑的重要來(lái)源，用于產(chǎn)酶的菌種必須嚴(yán) 格選擇。 載體結(jié)合法 是指將酶固定到非水溶性載體上的方法。 共價(jià)結(jié)合法 是指酶和載體以共價(jià)鍵的形式結(jié)合在一起的方法，這種方法需要酶和載體都具有氨基、羧基或羥基等官能團(tuán)。前者包埋成格子型，后者包埋成微膠囊型 交聯(lián)法 包埋法 固定化酶的應(yīng)用 總 結(jié) 酶是生物催化劑。 酶蛋白決定酶反應(yīng)的底物專一性及高效性。 比活力定義： 每 mg 酶蛋白所具有的酶活力單位數(shù)。 不可逆抑制劑 _____使酶分子中一些重要基團(tuán)發(fā)生特大的、不可逆的變化。 d. 活性中心這一局部地區(qū)的底物濃度大大增高。 別構(gòu)酶表現(xiàn)出非典型性的動(dòng)力學(xué)特征： 不符和米氏公式，表現(xiàn)出 V[S]的 S形曲線 當(dāng)其他酶對(duì)共價(jià)調(diào)節(jié)酶進(jìn)行共價(jià)修飾時(shí)（指可逆共價(jià)修飾的調(diào)控中的酶），這種調(diào)節(jié)酶能在非活性形式及活性形式之間相互轉(zhuǎn)變。 寡聚酶 同工酶 誘導(dǎo)酶 酶的分離提純包括三個(gè)基本環(huán)節(jié)：一是 抽提 ，即把酶從材料轉(zhuǎn)入溶劑中制成酶溶液； 二是 純化 ，即把雜質(zhì)從酶溶液中除掉或從酶溶液中把酶分離出來(lái)；三是 制劑 ，即將酶制成各種劑型。 1）淀粉酶：催化淀粉和糖元水解的酶類。 （ 3）葡萄糖淀粉酶：外切酶，不僅水解 α－ 1， 4糖苷鍵，也能水 解 α－ 1， 6糖苷鍵和 α－ 1， 3糖苷鍵。 （ 3）果膠裂解酶：是內(nèi)切聚半乳糖醛酸裂解酶、外內(nèi)切聚半乳 糖醛酸裂解酶和內(nèi)切聚甲基半乳糖醛酸裂解酶的 總稱。 3）微生物蛋白酶：蛋白酶制劑的重要來(lái)源，用于產(chǎn)酶的菌種必須嚴(yán)格選擇。
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