【正文】 規(guī)格、批號、臨床樣本來源等。 /陽性參考品符合率申請人應(yīng)考察申報產(chǎn)品檢測企業(yè)陰 /陽性參考品的符合情況，陽性參考品重在評估產(chǎn)品包容性，陰性參 考品旨在評價試劑特異性。 申報產(chǎn)品檢測企業(yè)最低檢測限參考品，檢測結(jié)果應(yīng)滿足相應(yīng)要求。因模擬樣本并不能體現(xiàn)臨床樣本可能帶來的所有變異因素，因此精密度評價中所用樣本應(yīng)至少包含精密度參考品及若干臨床樣本。 交叉反應(yīng)： 申請人應(yīng)針對可能出現(xiàn)在檢測樣本中的病原體進行交叉反應(yīng)驗證，用于交叉反應(yīng)驗證的樣品，除乙型肝炎病毒相關(guān)標志物外，評估 HBeAg檢測試劑交叉反應(yīng)的樣本應(yīng)盡量采用滅活病原體培養(yǎng)物或臨床相關(guān)病原體抗原陽性樣本； 評估抗 HBe檢測試劑交叉反應(yīng)的樣本應(yīng)盡量采用臨床相關(guān)病原體抗體陽性樣本。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度條件（“最差條件”）下進行評價，干擾物質(zhì)的選取應(yīng)至少包括：血紅蛋白、膽紅素、甘油三酯、類風濕因子、自身抗體及常見治療性藥物等。用于該項研究的樣本可為人工構(gòu)建樣本，建議在產(chǎn)品說明書上明示對鉤狀效應(yīng)的研究結(jié)果。研究應(yīng)當顯示出患者發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換過程中 HBeAg 消失、抗 HBe 出現(xiàn)的趨勢，同時，申報產(chǎn)品檢測結(jié)果應(yīng)與已上市同類產(chǎn)品檢測結(jié)果一致，或滿足商業(yè)化的血清轉(zhuǎn)換盤的使用要求。研究所需的樣本量應(yīng)滿足統(tǒng)計學(xué)要求。前者主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、開瓶穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進行評價。臨床試驗可采用試驗用體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品（對比試劑）進行比較研究，評價兩種方法檢測結(jié)果的一致性，評價指標通常包括陽性符合率、陰性符合率等。 如申報產(chǎn)品性能優(yōu)于已上市同類產(chǎn)品，如產(chǎn)品靈敏度顯著高于已上市同類產(chǎn)品，可將試驗用體外診斷試劑與臨床參考標準的比較研究和試驗用體外診斷試劑與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品的比較研究相結(jié)合，對產(chǎn)品的臨床性能進行綜合評價，從而支持預(yù)期用途所聲稱的內(nèi)容。如申報產(chǎn)品聲稱可適用于“疾病監(jiān)測”，臨床試驗應(yīng)入組符合要求的病例，進行患者跟蹤隨訪研究。 3 家（含 3 家）符合要求的臨床試驗機構(gòu)開展。 到準確評價的必要條件。樣本量估算過程中，評價指標的臨床可接受標準（ P0）即 HBeAg、抗 HBe檢測試劑臨床陰 /陽性符合率應(yīng)大于 95%。 ，應(yīng)與臨床試驗?zāi)康囊恢?，如臨床試驗?zāi)康臑轵炞C申報產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品的一致性，統(tǒng)計分析一般以 2 2 表的形式總結(jié)兩種分析方法的檢測結(jié)果，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、 Kappa 值等指標及其可信區(qū) 間。研究者應(yīng)充分考慮臨床試驗用樣本的獲得和試驗結(jié)果對受試者的風險性，應(yīng)提交倫理委員會的審查意見。評價過程應(yīng)評估境外和境內(nèi)人群中 HBV 的流行情況存在的差異。 按照《辦法》的規(guī)定，此類產(chǎn)品為第三類體外診斷試劑，申請人應(yīng)按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求，以附錄形式明確主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求，附錄的編制應(yīng)符合相關(guān)編寫規(guī)范的要求。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo) 原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 17 號）的要求，進口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準確且符合中文表達習慣。如申報產(chǎn)品存在新的預(yù)期用途，應(yīng)有充分的臨床試驗證據(jù)作為支持。 ，主要包括以下內(nèi)容： 本試劑檢測結(jié)果應(yīng)結(jié)合患者臨床癥狀及其他 相關(guān)醫(yī)學(xué)檢查結(jié)果進行綜合分析，不得單獨作為患者管理的依據(jù)。 第二篇：酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 1 酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 一、前言 本指導(dǎo)原則主要針對酶聯(lián)免疫類檢測試劑的主要原材料、生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系、產(chǎn)品 質(zhì)量控制等環(huán)節(jié)提出指導(dǎo)性技術(shù)要求。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制訂的，隨著法規(guī)和標準的不斷完善、科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，其相關(guān)內(nèi)容也將進行適時的調(diào)整。 — 2— 術(shù)人員、儀器設(shè) 備以及適宜的生產(chǎn)環(huán)境，獲得《醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證》；同時，應(yīng)按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細則（試行）》的要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，形成文件和記錄，加以實施并保持有效運行；還應(yīng)通過《體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量管理體系考核評定標準（試行）》的考核。 ：保證試劑使用安全、質(zhì)量穩(wěn)定、工藝可控、檢測有效。主要生物原料若為企業(yè)自己生產(chǎn)，其工藝必須相對穩(wěn)定；若購買，其供應(yīng)商要 求相對固定，不能隨意變更供應(yīng)商，如果主要原料（包括工藝）或其供應(yīng)商有變更，應(yīng)依據(jù)國家相關(guān)法規(guī)的要求進行變更申請。染色后的凝膠用電泳掃描儀分析原料的純度和分子量，純度應(yīng)達到相應(yīng)的質(zhì)量標準，分子量大小應(yīng)在正確的條帶位臵。 （ 5）功能性實驗 功能性實驗是指生物原料用于試劑盒實際生產(chǎn)中的情況，一般考查使用該原料的試劑盒的靈敏度、特異性和穩(wěn)定性等，并比較其與上批次原料的相關(guān)性。無菌試驗：將血清直接 37℃放臵 7 天，明亮處觀察，不得出現(xiàn)混濁或 — 4— 沉淀。 溶解性：將牛血清白蛋白配成 10%溶液，在 18 26℃時，溶解時間應(yīng)≤ 15 分鐘， pH值應(yīng)為 。（ 3）酪蛋白： 應(yīng)符合生產(chǎn)所需的質(zhì)量標準。 3.化學(xué)原材料 化學(xué)原材料的質(zhì)量標準，包括外觀、一般鹽類檢測、溶液 pH 值、溶解情況、干燥失重、熾灼殘渣等，均應(yīng)符合《中國生物制品主要原輔材 — 5— 料質(zhì)控標準（ 2021 年版）》分析 純級別的要求，并且要適合于本企業(yè)的生產(chǎn)。②吸附能力和精密性采用合適的方法進行檢驗。 （ 3）其他材料 包括試劑瓶標簽、粘膠紙、鋁箔袋、襯墊、可密封塑料袋、說明書、干燥劑和包裝外盒等，應(yīng)參照國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》和《醫(yī)療 器械說明書、標簽和包裝標識管理規(guī)定》建立相應(yīng)質(zhì)量控制標準。 （三）試劑盒各組分的生產(chǎn) 酶聯(lián)免疫法檢測試劑主要組分的生產(chǎn)包括酶標記物的制備及滴配過程（酶工作液濃度確定）、各種工作溶液的配制、包被酶標反應(yīng)板、分裝及包裝等步驟；并通過產(chǎn)品的半成品檢驗和成品檢驗兩個質(zhì)控過程來保證其質(zhì)量符合規(guī)定。對于定量檢測試劑，其標準品（或校準品）溶液應(yīng)具有量值溯源性。不同批號的板條不能混用。 分裝及包裝均應(yīng)按照相應(yīng)的標準操作規(guī)程要求進行。半成品檢驗，一般使用國家標準品（參考品）或經(jīng)國家標準品（參考品）標化后的企業(yè)參考品。對定量檢測試劑，同時應(yīng)分析其線性相關(guān)系數(shù)和定量質(zhì)控品檢測結(jié)果的準確性。抽樣數(shù)量應(yīng)包括檢驗用數(shù)量和留樣數(shù)量。若該診斷試劑沒有國家 — 9— 標準品（參考品），則使用企業(yè)參考品，企業(yè)參考品的制備應(yīng)有規(guī)范的質(zhì)量控制程序，以保證產(chǎn)品的安全性、有效性及質(zhì)量可控，其質(zhì)量應(yīng)不低于國家食品藥品監(jiān)督管理局已經(jīng)批準的同類產(chǎn)品的質(zhì)量。檢驗方法 （樣品制備區(qū)） 將待測樣本、陽性定量參考品、陰性質(zhì)控品、 HBV 強陽性質(zhì)控品、HBV 臨界陽性質(zhì)控品進行同步處理。蓋緊管蓋， 8000rpm 離心數(shù)秒后轉(zhuǎn)移至擴增檢測區(qū)。 本指導(dǎo)原則系對核酸擴增法檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需詳細闡述其理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)。 二、適用范圍 本指導(dǎo)原則適用于核酸擴增法檢測試劑的注冊技術(shù)審查，其他類核酸檢測試劑可參照相關(guān)內(nèi)容。建立專用實驗室，實驗室應(yīng)當嚴格分區(qū)，人員和物品應(yīng)當單向流動，以最大限度地防止實驗過程中樣品之間的污染和避免擴增產(chǎn)物的污染。 ，應(yīng)提供與通行原材料比對研究結(jié)果及相關(guān)資料。主要原材料（包括生產(chǎn)工藝）或其供應(yīng)商發(fā)生變更，應(yīng)依據(jù)國家相關(guān)法規(guī)的要求進行變更申請。 — 20℃保存。應(yīng)提供合成機構(gòu)出具的合成產(chǎn)物的質(zhì) 檢證明，如 PAGE 電泳結(jié)果或 HPLC 分析圖譜。 是指特定的帶有示蹤物（標記物）的已知核酸片段（寡聚核苷酸片段），能與互補核酸序列退火雜交，用于特定核酸序列的探測。端標記熒光素淬滅 基團，并經(jīng) HPLC 或其他適宜方法純化。另外，根據(jù)標記熒光素的不同，還應(yīng)該在熒光素的激發(fā)波長處有吸收峰，如 FAM熒光素在 494nm、TET 熒光素在 521nm、 TAMRA 熒光素在 560nm 處有特異的吸收峰，雜交探針在 493nm、 625nm、 685nm 處有特異的吸收峰 ，檢定合格后入庫。 20℃保存。 — 20℃保存。 （四）質(zhì)量控制 （ 1）按批號抽取規(guī)定數(shù)量的半成品。 （ 3）半成品檢定內(nèi)容包括：陰 /陽性參考品符合率、靈敏度、特異性、精密度。 — 26— （ 2）產(chǎn)品完成包裝后，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)量進行抽樣和生產(chǎn)記錄審核。 5．試劑批放行前，應(yīng)對需要進行穩(wěn)定性考核的試劑成分，在特定溫度或條件下進行穩(wěn)定性試驗。 五、參考文獻 1.《中國生物制品規(guī)程》（ 2021 年版），化學(xué)工業(yè)出版社 — 27— 第五篇：抗人球蛋白檢 測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（ 2021 年） 附件 3 抗人球蛋白檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對抗人球蛋白檢測試劑注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)和標準的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。其他未盡事宜，應(yīng)當符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）（以下簡稱《辦法》）等相關(guān)法規(guī)要求。 明確抗體的來源，如為單克隆抗體應(yīng)明確細胞株、克隆號等內(nèi)容。 特異性：臨床有意義的已知血型系統(tǒng)至少 7 種，每種選 1 個抗體（ IgG），與對應(yīng)的抗原陽性細胞均應(yīng)檢測陽性。應(yīng)提交選擇比較過程，提交驗證試驗資料。 。 反應(yīng)體系的設(shè)置應(yīng)符合《全國臨床檢驗操作規(guī)程》等公認標準操作 規(guī)范、指南或標準的要求。分析性能評估的實驗方法可以參考國內(nèi)或國際有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的指導(dǎo)原則進行。 對于抗人球蛋白檢測試劑建議著重對以下分析性能進行研究： ： 提供臨床有意義的血型系統(tǒng)至少 7 種不規(guī)則抗體（ IgG）檢測靈敏度和特異性的驗證資料，明確所檢出抗體的抗體效價的具體要求，可參照以下要求進行實驗。 與已知抗體類型的血型抗體對應(yīng)的 O 型相應(yīng)抗原陰性紅細胞的反應(yīng)為陰性。 日間重復(fù)性采用同一批次檢測卡每日重復(fù)進行檢測，重復(fù)天數(shù)不少于 10 天。 干擾 提供溶血、脂血、黃疸干擾的評估資料，應(yīng)至少采用強、中、弱性質(zhì)的抗體進行評價。 分別進行每個預(yù)期用途的完整的性能評估資料，應(yīng)至少包括50 例陽性病例。前者主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、加熱穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實際需 要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案，實驗項目應(yīng)至少包括靈敏度、特異性、重復(fù)性等內(nèi)容。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進行評價。 應(yīng)選擇符合相關(guān)法規(guī)要求的臨床試驗機構(gòu)進行臨床試驗，不得選擇血站進行臨床試驗。 無論直接抗人球蛋白試驗還是間接抗人球蛋白試驗，均應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的預(yù)期用途和適用人群分別進行臨床試驗。 交叉配血使用的供血者樣本，最多只能使用兩次，交叉配血不得使用血型不合的樣本進行實驗。 。 （九）產(chǎn)品技術(shù)要求 申請人應(yīng)當在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝 穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、性能評估等結(jié)果，依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關(guān)文獻，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2021 年第 9 號）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。 產(chǎn)品技術(shù)要求的附錄應(yīng)包括主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品檢定要求。 （十）產(chǎn)品注冊檢驗報告 根據(jù)《辦法》要求，首次申請注冊的第三類體外診斷試劑產(chǎn)品應(yīng)在國家食品藥品監(jiān)督管理部門認可的、具有相應(yīng)承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)進行連續(xù)三個生產(chǎn)批次樣品的注冊檢驗。 以下內(nèi)容僅對抗人球蛋白檢測試劑說明書的重點內(nèi)容進行詳細說明，說明書其他內(nèi)容應(yīng)根據(jù)《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》要求進行編寫。 3.【適用儀器】明確具體的離心機和 /或孵育器型號（如適用）。 明確具體的樣本采集、處理方法及過程。 須明確具體的檢驗步驟，反應(yīng)體系的描述應(yīng)準確且應(yīng)與研究資料一致，不同的預(yù)期用途應(yīng)分別詳細描述實驗過程。 濃度過高或過低的紅細胞懸液會引起