【正文】 規(guī)格、批號(hào)、臨床樣本來(lái)源等。 /陽(yáng)性參考品符合率申請(qǐng)人應(yīng)考察申報(bào)產(chǎn)品檢測(cè)企業(yè)陰 /陽(yáng)性參考品的符合情況，陽(yáng)性參考品重在評(píng)估產(chǎn)品包容性，陰性參 考品旨在評(píng)價(jià)試劑特異性。 申報(bào)產(chǎn)品檢測(cè)企業(yè)最低檢測(cè)限參考品，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)滿足相應(yīng)要求。因模擬樣本并不能體現(xiàn)臨床樣本可能帶來(lái)的所有變異因素，因此精密度評(píng)價(jià)中所用樣本應(yīng)至少包含精密度參考品及若干臨床樣本。 交叉反應(yīng)： 申請(qǐng)人應(yīng)針對(duì)可能出現(xiàn)在檢測(cè)樣本中的病原體進(jìn)行交叉反應(yīng)驗(yàn)證，用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的樣品，除乙型肝炎病毒相關(guān)標(biāo)志物外，評(píng)估 HBeAg檢測(cè)試劑交叉反應(yīng)的樣本應(yīng)盡量采用滅活病原體培養(yǎng)物或臨床相關(guān)病原體抗原陽(yáng)性樣本； 評(píng)估抗 HBe檢測(cè)試劑交叉反應(yīng)的樣本應(yīng)盡量采用臨床相關(guān)病原體抗體陽(yáng)性樣本。建議申請(qǐng)人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度條件（“最差條件”）下進(jìn)行評(píng)價(jià)，干擾物質(zhì)的選取應(yīng)至少包括：血紅蛋白、膽紅素、甘油三酯、類風(fēng)濕因子、自身抗體及常見(jiàn)治療性藥物等。用于該項(xiàng)研究的樣本可為人工構(gòu)建樣本，建議在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上明示對(duì)鉤狀效應(yīng)的研究結(jié)果。研究應(yīng)當(dāng)顯示出患者發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換過(guò)程中 HBeAg 消失、抗 HBe 出現(xiàn)的趨勢(shì)，同時(shí)，申報(bào)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果應(yīng)與已上市同類產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果一致，或滿足商業(yè)化的血清轉(zhuǎn)換盤的使用要求。研究所需的樣本量應(yīng)滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。前者主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、開(kāi)瓶穩(wěn)定性等研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。臨床試驗(yàn)可采用試驗(yàn)用體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品（對(duì)比試劑）進(jìn)行比較研究，評(píng)價(jià)兩種方法檢測(cè)結(jié)果的一致性，評(píng)價(jià)指標(biāo)通常包括陽(yáng)性符合率、陰性符合率等。 如申報(bào)產(chǎn)品性能優(yōu)于已上市同類產(chǎn)品，如產(chǎn)品靈敏度顯著高于已上市同類產(chǎn)品，可將試驗(yàn)用體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)的比較研究和試驗(yàn)用體外診斷試劑與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品的比較研究相結(jié)合，對(duì)產(chǎn)品的臨床性能進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，從而支持預(yù)期用途所聲稱的內(nèi)容。如申報(bào)產(chǎn)品聲稱可適用于“疾病監(jiān)測(cè)”，臨床試驗(yàn)應(yīng)入組符合要求的病例，進(jìn)行患者跟蹤隨訪研究。 3 家（含 3 家）符合要求的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展。 到準(zhǔn)確評(píng)價(jià)的必要條件。樣本量估算過(guò)程中，評(píng)價(jià)指標(biāo)的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)（ P0）即 HBeAg、抗 HBe檢測(cè)試劑臨床陰 /陽(yáng)性符合率應(yīng)大于 95%。 ，應(yīng)與臨床試驗(yàn)?zāi)康囊恢?，如臨床試驗(yàn)?zāi)康臑轵?yàn)證申報(bào)產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品的一致性，統(tǒng)計(jì)分析一般以 2 2 表的形式總結(jié)兩種分析方法的檢測(cè)結(jié)果，并據(jù)此計(jì)算陽(yáng)性符合率、陰性符合率、總符合率、 Kappa 值等指標(biāo)及其可信區(qū) 間。研究者應(yīng)充分考慮臨床試驗(yàn)用樣本的獲得和試驗(yàn)結(jié)果對(duì)受試者的風(fēng)險(xiǎn)性，應(yīng)提交倫理委員會(huì)的審查意見(jiàn)。評(píng)價(jià)過(guò)程應(yīng)評(píng)估境外和境內(nèi)人群中 HBV 的流行情況存在的差異。 按照《辦法》的規(guī)定，此類產(chǎn)品為第三類體外診斷試劑，申請(qǐng)人應(yīng)按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求，以附錄形式明確主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求，附錄的編制應(yīng)符合相關(guān)編寫規(guī)范的要求。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫指導(dǎo) 原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 17 號(hào)）的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。如申報(bào)產(chǎn)品存在新的預(yù)期用途，應(yīng)有充分的臨床試驗(yàn)證據(jù)作為支持。 ，主要包括以下內(nèi)容： 本試劑檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合患者臨床癥狀及其他 相關(guān)醫(yī)學(xué)檢查結(jié)果進(jìn)行綜合分析，不得單獨(dú)作為患者管理的依據(jù)。 第二篇：酶聯(lián)免疫法檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 1 酶聯(lián)免疫法檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則 一、前言 本指導(dǎo)原則主要針對(duì)酶聯(lián)免疫類檢測(cè)試劑的主要原材料、生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系、產(chǎn)品 質(zhì)量控制等環(huán)節(jié)提出指導(dǎo)性技術(shù)要求。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制訂的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善、科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，其相關(guān)內(nèi)容也將進(jìn)行適時(shí)的調(diào)整。 — 2— 術(shù)人員、儀器設(shè) 備以及適宜的生產(chǎn)環(huán)境，獲得《醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證》；同時(shí)，應(yīng)按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則（試行）》的要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，形成文件和記錄，加以實(shí)施并保持有效運(yùn)行；還應(yīng)通過(guò)《體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量管理體系考核評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)（試行）》的考核。 ：保證試劑使用安全、質(zhì)量穩(wěn)定、工藝可控、檢測(cè)有效。主要生物原料若為企業(yè)自己生產(chǎn)，其工藝必須相對(duì)穩(wěn)定；若購(gòu)買，其供應(yīng)商要 求相對(duì)固定，不能隨意變更供應(yīng)商，如果主要原料（包括工藝）或其供應(yīng)商有變更，應(yīng)依據(jù)國(guó)家相關(guān)法規(guī)的要求進(jìn)行變更申請(qǐng)。染色后的凝膠用電泳掃描儀分析原料的純度和分子量，純度應(yīng)達(dá)到相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，分子量大小應(yīng)在正確的條帶位臵。 （ 5）功能性實(shí)驗(yàn) 功能性實(shí)驗(yàn)是指生物原料用于試劑盒實(shí)際生產(chǎn)中的情況，一般考查使用該原料的試劑盒的靈敏度、特異性和穩(wěn)定性等，并比較其與上批次原料的相關(guān)性。無(wú)菌試驗(yàn)：將血清直接 37℃放臵 7 天，明亮處觀察，不得出現(xiàn)混濁或 — 4— 沉淀。 溶解性：將牛血清白蛋白配成 10%溶液，在 18 26℃時(shí)，溶解時(shí)間應(yīng)≤ 15 分鐘， pH值應(yīng)為 。（ 3）酪蛋白： 應(yīng)符合生產(chǎn)所需的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 3.化學(xué)原材料 化學(xué)原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括外觀、一般鹽類檢測(cè)、溶液 pH 值、溶解情況、干燥失重、熾灼殘?jiān)?，均?yīng)符合《中國(guó)生物制品主要原輔材 — 5— 料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)（ 2021 年版）》分析 純級(jí)別的要求，并且要適合于本企業(yè)的生產(chǎn)。②吸附能力和精密性采用合適的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。 （ 3）其他材料 包括試劑瓶標(biāo)簽、粘膠紙、鋁箔袋、襯墊、可密封塑料袋、說(shuō)明書(shū)、干燥劑和包裝外盒等，應(yīng)參照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫指導(dǎo)原則》和《醫(yī)療 器械說(shuō)明書(shū)、標(biāo)簽和包裝標(biāo)識(shí)管理規(guī)定》建立相應(yīng)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。 （三）試劑盒各組分的生產(chǎn) 酶聯(lián)免疫法檢測(cè)試劑主要組分的生產(chǎn)包括酶標(biāo)記物的制備及滴配過(guò)程（酶工作液濃度確定）、各種工作溶液的配制、包被酶標(biāo)反應(yīng)板、分裝及包裝等步驟；并通過(guò)產(chǎn)品的半成品檢驗(yàn)和成品檢驗(yàn)兩個(gè)質(zhì)控過(guò)程來(lái)保證其質(zhì)量符合規(guī)定。對(duì)于定量檢測(cè)試劑，其標(biāo)準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品）溶液應(yīng)具有量值溯源性。不同批號(hào)的板條不能混用。 分裝及包裝均應(yīng)按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程要求進(jìn)行。半成品檢驗(yàn)，一般使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）或經(jīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）標(biāo)化后的企業(yè)參考品。對(duì)定量檢測(cè)試劑，同時(shí)應(yīng)分析其線性相關(guān)系數(shù)和定量質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。抽樣數(shù)量應(yīng)包括檢驗(yàn)用數(shù)量和留樣數(shù)量。若該診斷試劑沒(méi)有國(guó)家 — 9— 標(biāo)準(zhǔn)品（參考品），則使用企業(yè)參考品，企業(yè)參考品的制備應(yīng)有規(guī)范的質(zhì)量控制程序，以保證產(chǎn)品的安全性、有效性及質(zhì)量可控，其質(zhì)量應(yīng)不低于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局已經(jīng)批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品的質(zhì)量。檢驗(yàn)方法 （樣品制備區(qū)） 將待測(cè)樣本、陽(yáng)性定量參考品、陰性質(zhì)控品、 HBV 強(qiáng)陽(yáng)性質(zhì)控品、HBV 臨界陽(yáng)性質(zhì)控品進(jìn)行同步處理。蓋緊管蓋， 8000rpm 離心數(shù)秒后轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增檢測(cè)區(qū)。 本指導(dǎo)原則系對(duì)核酸擴(kuò)增法檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需詳細(xì)闡述其理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)。 二、適用范圍 本指導(dǎo)原則適用于核酸擴(kuò)增法檢測(cè)試劑的注冊(cè)技術(shù)審查，其他類核酸檢測(cè)試劑可參照相關(guān)內(nèi)容。建立專用實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格分區(qū)，人員和物品應(yīng)當(dāng)單向流動(dòng)，以最大限度地防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中樣品之間的污染和避免擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。 ，應(yīng)提供與通行原材料比對(duì)研究結(jié)果及相關(guān)資料。主要原材料（包括生產(chǎn)工藝）或其供應(yīng)商發(fā)生變更，應(yīng)依據(jù)國(guó)家相關(guān)法規(guī)的要求進(jìn)行變更申請(qǐng)。 — 20℃保存。應(yīng)提供合成機(jī)構(gòu)出具的合成產(chǎn)物的質(zhì) 檢證明，如 PAGE 電泳結(jié)果或 HPLC 分析圖譜。 是指特定的帶有示蹤物（標(biāo)記物）的已知核酸片段（寡聚核苷酸片段），能與互補(bǔ)核酸序列退火雜交，用于特定核酸序列的探測(cè)。端標(biāo)記熒光素淬滅 基團(tuán)，并經(jīng) HPLC 或其他適宜方法純化。另外，根據(jù)標(biāo)記熒光素的不同，還應(yīng)該在熒光素的激發(fā)波長(zhǎng)處有吸收峰，如 FAM熒光素在 494nm、TET 熒光素在 521nm、 TAMRA 熒光素在 560nm 處有特異的吸收峰，雜交探針在 493nm、 625nm、 685nm 處有特異的吸收峰 ，檢定合格后入庫(kù)。 20℃保存。 — 20℃保存。 （四）質(zhì)量控制 （ 1）按批號(hào)抽取規(guī)定數(shù)量的半成品。 （ 3）半成品檢定內(nèi)容包括：陰 /陽(yáng)性參考品符合率、靈敏度、特異性、精密度。 — 26— （ 2）產(chǎn)品完成包裝后，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)量進(jìn)行抽樣和生產(chǎn)記錄審核。 5．試劑批放行前，應(yīng)對(duì)需要進(jìn)行穩(wěn)定性考核的試劑成分，在特定溫度或條件下進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)。 五、參考文獻(xiàn) 1.《中國(guó)生物制品規(guī)程》（ 2021 年版），化學(xué)工業(yè)出版社 — 27— 第五篇：抗人球蛋白檢 測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則（ 2021 年） 附件 3 抗人球蛋白檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則 本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)抗人球蛋白檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的技術(shù)審評(píng)提供參考。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。其他未盡事宜，應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號(hào)）（以下簡(jiǎn)稱《辦法》）等相關(guān)法規(guī)要求。 明確抗體的來(lái)源，如為單克隆抗體應(yīng)明確細(xì)胞株、克隆號(hào)等內(nèi)容。 特異性：臨床有意義的已知血型系統(tǒng)至少 7 種，每種選 1 個(gè)抗體（ IgG），與對(duì)應(yīng)的抗原陽(yáng)性細(xì)胞均應(yīng)檢測(cè)陽(yáng)性。應(yīng)提交選擇比較過(guò)程，提交驗(yàn)證試驗(yàn)資料。 。 反應(yīng)體系的設(shè)置應(yīng)符合《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》等公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)操作 規(guī)范、指南或標(biāo)準(zhǔn)的要求。分析性能評(píng)估的實(shí)驗(yàn)方法可以參考國(guó)內(nèi)或國(guó)際有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的指導(dǎo)原則進(jìn)行。 對(duì)于抗人球蛋白檢測(cè)試劑建議著重對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究： ： 提供臨床有意義的血型系統(tǒng)至少 7 種不規(guī)則抗體（ IgG）檢測(cè)靈敏度和特異性的驗(yàn)證資料，明確所檢出抗體的抗體效價(jià)的具體要求，可參照以下要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 與已知抗體類型的血型抗體對(duì)應(yīng)的 O 型相應(yīng)抗原陰性紅細(xì)胞的反應(yīng)為陰性。 日間重復(fù)性采用同一批次檢測(cè)卡每日重復(fù)進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)天數(shù)不少于 10 天。 干擾 提供溶血、脂血、黃疸干擾的評(píng)估資料，應(yīng)至少采用強(qiáng)、中、弱性質(zhì)的抗體進(jìn)行評(píng)價(jià)。 分別進(jìn)行每個(gè)預(yù)期用途的完整的性能評(píng)估資料，應(yīng)至少包括50 例陽(yáng)性病例。前者主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、加熱穩(wěn)定性、開(kāi)瓶穩(wěn)定性等研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需 要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案，實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目應(yīng)至少包括靈敏度、特異性、重復(fù)性等內(nèi)容。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。 應(yīng)選擇符合相關(guān)法規(guī)要求的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行臨床試驗(yàn)，不得選擇血站進(jìn)行臨床試驗(yàn)。 無(wú)論直接抗人球蛋白試驗(yàn)還是間接抗人球蛋白試驗(yàn)，均應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的預(yù)期用途和適用人群分別進(jìn)行臨床試驗(yàn)。 交叉配血使用的供血者樣本，最多只能使用兩次，交叉配血不得使用血型不合的樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 。 （九）產(chǎn)品技術(shù)要求 申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝 穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、性能評(píng)估等結(jié)果，依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2021 年第 9 號(hào)）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。 產(chǎn)品技術(shù)要求的附錄應(yīng)包括主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品檢定要求。 （十）產(chǎn)品注冊(cè)檢驗(yàn)報(bào)告 根據(jù)《辦法》要求，首次申請(qǐng)注冊(cè)的第三類體外診斷試劑產(chǎn)品應(yīng)在國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理部門認(rèn)可的、具有相應(yīng)承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行連續(xù)三個(gè)生產(chǎn)批次樣品的注冊(cè)檢驗(yàn)。 以下內(nèi)容僅對(duì)抗人球蛋白檢測(cè)試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，說(shuō)明書(shū)其他內(nèi)容應(yīng)根據(jù)《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫指導(dǎo)原則》要求進(jìn)行編寫。 3.【適用儀器】明確具體的離心機(jī)和 /或孵育器型號(hào)（如適用）。 明確具體的樣本采集、處理方法及過(guò)程。 須明確具體的檢驗(yàn)步驟，反應(yīng)體系的描述應(yīng)準(zhǔn)確且應(yīng)與研究資料一致，不同的預(yù)期用途應(yīng)分別詳細(xì)描述實(shí)驗(yàn)過(guò)程。 濃度過(guò)高或過(guò)低的紅細(xì)胞懸液會(huì)引起