【正文】 ，建議申請人采用血清血漿同源比對的方式對抗凝劑干擾進行研究，研究應能夠覆蓋所有聲稱的 抗凝劑種類。 （ HOOK）效應須采用多份高濃度樣本進行梯度稀釋后由低濃度至高濃度開始檢測，每個梯度的稀釋液重復 3～ 5 份，對鉤狀效應進行合理的驗證。用于該項研究的樣本可為人工構建樣本，建議在產(chǎn)品說明書上明示對鉤狀效應的研究結果。申請人應依據(jù)產(chǎn)品的反應原理選擇是否進行此項研究。 換的檢測，應進行相應性能研究?？刹捎蒙陥螽a(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品同時檢測不少于五套經(jīng)充分確認的乙型肝炎患者系列采集樣本，也可采用申報產(chǎn)品檢測不少于五套的商業(yè)化 的血清轉換盤。研究應當顯示出患者發(fā)生血清學轉換過程中 HBeAg 消失、抗 HBe 出現(xiàn)的趨勢，同時，申報產(chǎn)品檢測結果應與已上市同類產(chǎn)品檢測結果一致，或滿足商業(yè)化的血清轉換盤的使用要求。 （五）陽性判斷值確定資料此類產(chǎn)品臨界值通常采用定標液 /對照品檢測結果經(jīng)特定的計算公式得出，樣本檢測結果通過與臨界值進行比較以判斷檢測結果的陰陽性。建議申請人采用受試者工作特征（ ROC）曲線的方式進行臨界值的研究，明確臨界值的計算公式。研究過程中應選取適當?shù)呐R床樣本，應包括經(jīng)確認的標志物為陽性的樣本及經(jīng)確認標志物為陰性的樣 本。研究所需的樣本量應滿足統(tǒng)計學要求。 如申報產(chǎn)品陽性判斷值包含灰區(qū)，應明確灰區(qū)的確定依據(jù)，并提供相應支持性資料。 在陽性判斷值設定后，申請人應當選取一定數(shù)量陰、陽性真實臨床樣本進行實驗驗證。 （六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、開瓶穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細的研究數(shù)據(jù)以及結論。對于實時穩(wěn)定性研究，應 提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。 申請人應對樣本穩(wěn)定性進行研究，主要包括冷藏和冷凍兩種條件下的有效期驗證，可以在合理的溫度范圍內，每間隔一定的時間段對儲存樣本進行性能分析驗證，從而確認不同類型樣本的穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應對凍融次數(shù)進行評價。 試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內容的研究結果均應在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進行詳細說明。 （七）臨床試驗臨床試驗的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應符合相關法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗技 術指導原則》的要求。 。臨床試驗可采用試驗用體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品（對比試劑）進行比較研究，評價兩種方法檢測結果的一致性，評價指標通常包括陽性符合率、陰性符合率等。對比試劑在預期用途、適用人群、樣本類型、檢測方法學、檢測性能等方面應與試驗用體外診斷試劑具有較好的可比性。 如申報產(chǎn)品在該類產(chǎn)品現(xiàn)有的臨床預期用途下，有新的臨床預期用途（如：定量檢測產(chǎn)品的治療效果監(jiān)測等），應采用試驗用體外診斷試劑與臨床參考標準進行比較研究，對產(chǎn)品新預期用途進行臨 床評價。臨床參考標準是指現(xiàn)有條件下臨床上可獲得的能夠用來確定受試者目標狀態(tài)的最佳方法，通常來自臨床和實驗室的醫(yī)學實踐，包括患者跟蹤隨訪等。 如申報產(chǎn)品性能優(yōu)于已上市同類產(chǎn)品，如產(chǎn)品靈敏度顯著高于已上市同類產(chǎn)品，可將試驗用體外診斷試劑與臨床參考標準的比較研究和試驗用體外診斷試劑與境內已上市同類產(chǎn)品的比較研究相結合，對產(chǎn)品的臨床性能進行綜合評價，從而支持預期用途所聲稱的內容。 試劑的預期用途、目標人群和檢測要求等合理確定臨床試驗受試者的選 擇要求和樣本收集方法，包括：受試者入組 /排除標準、樣本收集的前瞻性和回顧性設計等。 根據(jù)產(chǎn)品臨床驗證的目的，入組人群應包含不同年齡段、不同性別人群，以及一定數(shù)量的孕婦。入組人群還應包括急性及慢性病毒性乙型肝炎患者，同時根據(jù)臨床驗證需要，入組病例應包括不同疾病進展期（如：免疫耐受期、免疫活動期等）的患者。如申報產(chǎn)品聲稱可適用于“疾病監(jiān)測”，臨床試驗應入組符合要求的病例，進行患者跟蹤隨訪研究。 臨床試驗中所涉及的樣本類型應為實際臨床檢測中常用的樣本類型。如申報產(chǎn)品所適用的樣本類型同時包含血清、血 漿等多個樣本類型，應針對不同樣本類型進行同源比對。 建議臨床試驗采用前瞻性收集的樣本進行研究，同時，在嚴格控制偏倚的前提下，允許入組部分符合要求的既往留存樣本。 3 家（含 3 家）符合要求的臨床試驗機構開展。申辦者應根據(jù)產(chǎn)品特點及其預期用途，綜合不同地區(qū)乙型肝炎病毒流行情況等因素選擇具有代表性的機構開展臨床試驗，包括受試人群的代表性等。 試劑與已上市同類產(chǎn)品相比的陽性符合率、陰性 符合率等。如試驗用體外診斷試劑與臨床參考方法進行對比研究，其臨床評價標準應包括臨床靈敏度、臨床特異度等。 到準確評價的必要條件。臨床試驗樣本量應滿足統(tǒng)計學要求，可采用適當?shù)慕y(tǒng)計學方法進行估算。臨床試驗樣本量估算的方法有很多，如單組目標值法、優(yōu)效性試驗的樣本量估算等。 HBeAg、抗 HBe 檢測試劑為定性檢測產(chǎn)品，如臨床試驗采用申報產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品進行比對的試驗設計，可采用單組目標值法樣本量公式估算最低樣本量。樣本量估算過程中，評價指標的臨床可接受標準（ P0）即 HBeAg、抗 HBe檢測試劑臨床陰 /陽性符合率應大于 95%。 如申報產(chǎn)品性能顯著優(yōu)于已上市同類產(chǎn)品，可將試驗用體外診斷試劑與臨床參考標準的比較研究和試驗用體外診斷試劑與境內已上市同類產(chǎn)品的比較研究相結合，進行臨床研究，可采用優(yōu)效性試驗樣本量估算的方法估算樣本量。 樣本量估算過程中需要考慮臨床試驗中病例的剔除率，一般而言，病例剔除率不應高于 10%。 臨床試驗樣本量除需滿足上述統(tǒng)計學估算的最低樣本量要求外，還應保證入組病例覆蓋受試者的各種特征； 如臨床試驗研究有更合理的樣本量估算方式，在說明其合理性后亦可采用。 ，應與臨床試驗目的一致，如臨床試驗目的為驗證申報產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品的一致性，統(tǒng)計分析一般以 2 2 表的形式總結兩種分析方法的檢測結果，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、 Kappa 值等指標及其可信區(qū) 間。除此之外，還應同時進行假設檢驗評價兩種分析方法的一致性。 如產(chǎn)品臨床試驗采用其他統(tǒng)計學模型進行統(tǒng)計分析，如優(yōu)效性試驗等，應充分說明其合理性。 ，必須獲得臨床試驗機構倫理委員會的同意。研究者應充分考慮臨床試驗用樣本的獲得和試驗結果對受試者的風險性，應提交倫理委員會的審查意見。 ，建議進行臨床試驗的預試驗，以熟悉并掌握相關試驗方法的操作、儀器、技術性能等，最大限度控制試驗誤差。整個試驗過程都應處于有效的質 量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準確性及可重復性。 作為臨床評價資料時，其境外臨床試驗資料在滿足《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗數(shù)據(jù)技術指導原則》要求的基礎上，應至少有一家臨床試驗機構在中國境內，檢測病例數(shù)不低于總病例數(shù)的 1/3。評價過程應評估境外和境內人群中 HBV 的流行情況存在的差異。 （八）產(chǎn)品技術要求申請人應當在原材料質量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)申請人產(chǎn)品研制、臨床評價等結果，依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關文獻，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技 術要求編寫指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 9 號）的有關要求，編寫產(chǎn)品技術要求。 HBeAg、抗 HBe 檢測試劑的產(chǎn)品性能指標應主要包括：物理性狀、陰 /陽性參考品符合率、精密度、最低檢測限等。申報試劑已有適用的國家標準品、參考品發(fā)布，申請人應在產(chǎn)品技術要求中提出檢測要求。 按照《辦法》的規(guī)定，此類產(chǎn)品為第三類體外診斷試劑，申請人應按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術要求編寫指導原則》的要求，以附錄形式明確主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求，附錄的編制應符合相關編寫規(guī)范的要求。 （九 ）產(chǎn)品檢驗報告根據(jù)《辦法》的要求，首次申請注冊的第三類體外診斷試劑產(chǎn)品應在具有相應醫(yī)療器械檢驗資質和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗機構進行連續(xù) 3 個生產(chǎn)批次樣品的產(chǎn)品檢驗。產(chǎn)品檢驗報告應符合相應的國家標準品、參考品的要求。 （十）產(chǎn)品說明書說明書承載了產(chǎn)品預期用途、樣本采集及處理、檢驗方法、檢驗結果的解釋以及注意事項等重要信息，是指導實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應符合《體外診斷試劑說明書編寫指導 原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 17 號）的要求，進口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內容應盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準確且符合中文表達習慣。產(chǎn)品說明書中相關技術內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規(guī)范格式對此內容進行標注，并單獨列明文獻的相關信息。 結合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求， HBeAg、抗 HBe檢測試劑說明書編寫應重點關注以下內容。 診療規(guī)范、防治指南、專家共識，其臨床試驗入組病例應能夠覆蓋產(chǎn)品適用人群。如申報產(chǎn)品存在新的預期用途，應有充分的臨床試驗證據(jù)作為支持。 （質控品）以及樣本的檢測結果，對所有可能出現(xiàn)的結果組合及相應的解釋進行詳述。檢驗結果的解釋應以陽性判斷值的研究結論為依據(jù)。如有適用的臨床診療指南，則應在此項下引用，相應檢驗結果的解釋應符合相關指南的要求。 ，主要包括以下內容： 本試劑檢測結果應結合患者臨床癥狀及其他 相關醫(yī)學檢查結果進行綜合分析，不得單獨作為患者管理的依據(jù)。 不合理的樣本采集、轉運及處理以及不當?shù)膶嶒灢僮骱蛯嶒灜h(huán)境均有可能導致假陰性或假陽性結果。 申報產(chǎn)品應明確不同病程不同階段樣本的陽性率不一致。 三、參考文獻 1.《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）， 2021 年 7 月 .《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》，（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021 年第 16 號），2021 年 9 月 11 日 .3.《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》，（國家食品藥品監(jiān) 督管理總局公告 2021 年第 17 號）， 2021 年 9 月 11 日 .食品藥品監(jiān)督管理總局關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告（國家食品藥品監(jiān)管總局公告 2021年第 44號），2021年 9月 5日 .，中華醫(yī)學會感染病學分會 .慢性乙型肝炎防治指南（ 2021 年版） .實用肝 XVI 臟病雜志，第 19 卷第 3 期 2021 年 5 月： .病毒性肝炎臨床實踐，人民衛(wèi)生 出 版 社 ，icalPracticeGuidelinesonthemanagementofhepatitisBvirusinfect， 67： ， ， Diagnosis ，andTreatmentofChronicHepatitisB ： ， 2021 ， 67 （ 4 ）：“ e”antigenandantibodytoHepatitisB “ e ”、起草單位國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術審評中心。 第二篇：酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術審查指導原則 附件 1 酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術審查指導原則 一、前言 本指導原則主要針對酶聯(lián)免疫類檢測試劑的主要原材料、生產(chǎn)工藝及反應體系、產(chǎn)品 質量控制等環(huán)節(jié)提出指導性技術要求。 本指導原則系對酶聯(lián)免疫法檢測試劑的一般要求，申請人應依據(jù)產(chǎn)品特性確定其中的具體內容是否適用，若不適用，需詳細闡述其理由及相應的科學依據(jù)。 本指導原則是對申請人和審查人員的指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細的研究資料和驗證資料。應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本指導原則。 本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制訂的，隨著法規(guī)和標準的不斷完善、科學技術的不斷發(fā)展，其相關內容也將進行適時的調整。 二、適用范圍 本指導原則適用于有關病原微生物檢測的第三類體外診斷試劑的注冊技術審查。其他酶聯(lián)免疫法檢測試劑（如作為二類管理的體外診斷試劑）可參考本指導原則執(zhí)行。 三、基本要求 （一）基本原則 、生產(chǎn)用的各種原料、輔料等應制定其相應的質量標準，并應符合有關法規(guī)的要求。 — 2— 術人員、儀器設 備以及適宜的生產(chǎn)環(huán)境，獲得《醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證》；同時，應按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細則（試行）