【正文】 （ 78 95%）； ? 在多種結(jié)締組織病中出現(xiàn)。 分型 相關(guān)疾病 核仁型 硬皮病 著絲點(diǎn)型 CREST綜合征 周邊型 SLE 斑點(diǎn)型 /彌散型 混合性結(jié)締組織?。?MCTD） 一、抗 DNA抗體 ? 已確認(rèn)出兩大類抗體特異性： – 天然的 雙鏈 DNA（ dsDNA）：對(duì)診斷 SLE特異性高 – 變性的 單鏈 DNA（ ssDNA） ? 多數(shù)實(shí)驗(yàn)室采用以下方法進(jìn)行 測(cè)定 ： – 放射免疫分析法（ RIA， Farr分析法）：定量 – 酶聯(lián)免疫吸附法（ ELISA）：定量 – 間接免疫熒光法（ IIF，短膜蟲(chóng)法）：半定量 ? 抗體水平與 疾病活動(dòng)度相關(guān) ，隨著疾病活動(dòng)的控制，抗 dsDNA抗體滴度可以下降或消失。自身抗體研究進(jìn)展及臨床應(yīng)用 樂(lè)清三醫(yī) 總論 自身抗體的分類 ? 一、細(xì)胞內(nèi) ? 細(xì)胞核：抗核抗體（ ANAs） ? 細(xì)胞漿：抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ ANCA） ? 二、細(xì)胞膜 ? HLA－ DR DR DR4 ? HLA－ B27 ? 三、細(xì)胞外 ? 類風(fēng)濕性因子（ RF）、抗甲狀腺球蛋白抗體、抗血漿成分（如凝血因子）抗體、抗磷脂抗體等。 ?抗組蛋白抗體 總組蛋白抗體： H H2a、 H2b、 H H4 抗 DNP抗體 抗核小抗體 ?抗非組蛋白抗體 ENA抗體（ ENA抗體譜）、抗著絲點(diǎn)抗體 ?抗核仁抗體 抗 5rRNA、核小體、 Nor90、 U3nRNP ?抗其他細(xì)胞成分 線粒體、中心體 ANA的熒光染色型別 ? 細(xì)胞核： 核均質(zhì)型（ DNA、組蛋白和核小體等） 核顆粒型（ Sm、 uRNP、 SSA、 SSB、 Ku、 I和 Ⅱ 型周期蛋白） 核膜型（板層素、 gp120等） 核仁型（ SCL70、 PMSCL、 RNA多聚酶、原纖維蛋白等） 核漿點(diǎn)型（著絲點(diǎn)、核多點(diǎn)及核少點(diǎn)型） ? 細(xì)胞漿： 胞漿顆粒型（線粒體、 Jo核糖體等） 胞漿纖維型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌動(dòng)蛋白等 ? 分裂期細(xì)胞陽(yáng)性： 紡垂體、中間體、中心體等 根據(jù)產(chǎn)生的熒光模型、靶抗原的分布部位分類如下： ANA常見(jiàn)五種核型及臨床意義 ?核膜型 —— 與抗 dsDNA有關(guān)， 多見(jiàn)于 SLE，特別是有腎炎者 ?均質(zhì)型 —— 與 AHA、抗 DNA有關(guān)，引起 LE形成 主要見(jiàn)于 SLE、藥物性狼瘡 ?斑點(diǎn)型 —— 與抗 ENA有關(guān)，應(yīng)進(jìn)一步查特異性抗體 ?核仁型 —— 多見(jiàn)于硬皮病 ?著絲點(diǎn)型 —— 多見(jiàn)于 CREST綜合征 核膜型 與抗 dsDNA有關(guān)， 多見(jiàn)于 SLE，特別是有腎炎者 均質(zhì)型 與 AHA（抗組蛋白抗體 ） 、抗 DNA有關(guān)，引起 LE形成主要見(jiàn)于 SLE、藥物性狼瘡 斑點(diǎn)型 與抗 ENA有關(guān)，應(yīng)進(jìn)一步查特異性抗體 核仁型 多見(jiàn)于硬皮病 著絲點(diǎn)型 多見(jiàn)于 CREST綜合征 細(xì)胞核 均質(zhì)性 （ homogeneous ） 熒光顯微鏡下的 ANA模型： E U R O I M M U NANA ： 核均質(zhì)型EU R O I M N斑點(diǎn)型 （ speckled） 熒光顯微鏡下的 ANA模型： E U R O I M M U N核顆粒型（ 1 ）：核粗顆粒型EU R O I M M N核顆粒型：核粗顆粒型 ? 抗核抗體染色類型 核仁型 （ nucleolar） 熒光顯微鏡下的 ANA模型 E U R O I M M U N核仁型（ 2 ）： 原纖維蛋白類型EU R O I M M N熒光顯微鏡下的 ANA模型 熒光顯微鏡下的 ANA模型 E U R O I M M U NANA ： 核點(diǎn)型EU R O I M M N熒光顯微鏡下的 ANA模型 E U R O I M M U NANA ： 著絲點(diǎn)型EU R O I M M N細(xì)胞漿 抗中性粒細(xì)胞漿抗體在顯微鏡下的熒光模型 : E U R O I M M U Np A N C A ( 甲醛抗性 )粒細(xì)胞 ( 乙醇固定 )粒細(xì)胞 ( 甲醛固定 )猴肝H E p 2 細(xì)胞分裂期細(xì)胞陽(yáng)性 熒光顯微鏡下的 ANA模型 E U R O I M M U N分裂期細(xì)胞陽(yáng)性（ 2 ）：抗紡錘體纖維抗體EU R O I M M NANA的 熒光類型 ? ANA試驗(yàn)的結(jié)果中一般會(huì)報(bào)告其分型，這些分型可能與某一特定的抗原反應(yīng)活性相關(guān)。 抗 DNA抗體 分類： 天然的雙鏈 DNA 變性的單鏈 DNA 雙鏈 DNA抗體針對(duì)的是 DNA（外圍區(qū)）脫氧核糖核酸骨架 單鏈 DNA抗體針對(duì)的是嘌呤及嘧啶堿基 抗 dsDNA抗體 ?臨床意義 ① 對(duì) SLE的診斷有較高特異性 ② 滴度與 SLE活動(dòng)相關(guān)，可作為病情監(jiān)測(cè)及療效觀察指標(biāo) ③ 與 SLE腎損害有關(guān) ?檢測(cè)方法 ①放免法（ Farr)—— 敏感，有利于早期預(yù)測(cè) 檢測(cè)高親合力的抗 dsDNA ② 間接免疫熒光法 (IF)—— 特異 ③ ELISA—— 可檢測(cè)低親合力的抗 dsDNA 有助于中樞狼瘡的病情監(jiān)測(cè) ④金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法 抗雙鏈 DNA的檢測(cè)方法： 多數(shù)實(shí)驗(yàn)室采用以下三種方法： 一 .RIA 二 .ELISA 三 .IIF 抗雙鏈 DNA在熒光顯微鏡下的模型（綠蠅短膜蟲(chóng)基質(zhì)）： 抗 DNA的臨床意義： 在 SLE患者的腎臟病變處發(fā)現(xiàn)了抗 DNA抗體，這強(qiáng)烈提示其致病作用。 組蛋白與 DNA一起形成高度有序的核小體。 ANA分類 ——抗組蛋白抗體 抗原 : 組蛋白 H1, H2A, H2B, H3, H4 (主要的靶抗原為 H1和 H2B) 相關(guān)疾病 : 藥物誘導(dǎo)性 LE: 100% （標(biāo)志性抗體） SLE: 40% 80% 在其他風(fēng)濕病中很少見(jiàn) 抗組蛋白的臨床意義 : 抗組蛋白抗體主要用于藥物性狼瘡的診斷 ,95%的藥物性狼瘡患者抗組蛋白抗體陽(yáng)性，另外，抗組蛋白抗體還見(jiàn)于 30％ 70％的非藥物誘導(dǎo)的紅斑狼瘡以及 15％ 50％的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者。 抗核小體抗體 抗核小體的定義： ? 組蛋白與 dsDNA的復(fù)合物。 抗核小體的臨床意義 : 抗核小體抗體 (AnuA)的檢測(cè)主要用于 SLE的診斷 ， 特異性較高 ， 特異性 98%。 該抗體因其也可見(jiàn)于藥物性狼瘡 ， 特異性不及抗 dsDNA抗體 。 ? 抗體常在疾病的 整個(gè) 病程中均能夠被檢測(cè)到。通常又把 nRNP稱之為 u1RNP。 抗 U1RNP抗體： 混合性結(jié)締組織病有高滴度的抗 U1RNP抗體，是其特異指標(biāo)。 與 dsDNA一起，是 SLE的特異性指標(biāo)，但僅見(jiàn)于 20%40%病人中。 ? SLE患者中，常與 抗 U1RNP抗體一同出現(xiàn) ? 與臨床的相關(guān)性 并不強(qiáng) ，但有證據(jù)顯示其與中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累、腎臟病變、肺纖維化、心包炎有關(guān)。 ? 抗 u2RNP抗體在系統(tǒng)性硬化癥伴多發(fā)性肌炎的重疊綜合征中陽(yáng)性頻率較高。 100%新生兒 SLE出現(xiàn) SSA抗體，以胎盤(pán)傳給胎兒引起炎癥反應(yīng)。 抗 Ro抗體陽(yáng)性的臨床相關(guān)性 ? 正常健康人 ? 干燥綜合征 – 淋巴結(jié)病 – 白細(xì)胞減少 – 抗 La抗體 – RF – ANA ? SLE – 光過(guò)敏性皮疹 – 血小板減少 – 間質(zhì)性肺炎 – ANA（－） ? 亞急性皮膚型紅斑狼瘡 – 抗 La抗體 ? 其它風(fēng)濕性疾病 – RA – 多發(fā)性肌炎 – 系統(tǒng)性硬化 ? 原發(fā)性膽汁性肝硬化 ? 新生兒狼瘡綜合征 – 先天性完全性心臟傳導(dǎo)阻滯 – 新生兒狼瘡性皮炎 – Ro反應(yīng)針對(duì) 52kD抗原而非 60kD抗原。 ? 抗 SSB抗體較抗 SSA抗體診斷干燥綜合征更為特異。 抗 SCL70抗體 ： 見(jiàn)于 25%75%的進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥患者中 。 ? 抗核仁抗原的抗體： 見(jiàn)于 5％的患者中，患者常常患有嚴(yán)重的彌漫型疾病。 ? 存在于 35％ 至 40％ 的肌炎患者中。 ? 50％至 70％發(fā)生間質(zhì)性 肺 疾病（就肌炎總體而言，為10％至 20％）。 ? 診斷 SLE的高度 特異性 標(biāo)記物。 （二）抗著絲點(diǎn)抗體（ ACA） ANA分類 ——抗非組蛋白抗體 ◆抗著絲點(diǎn)抗體 靶抗原 : 著絲點(diǎn)中的 4種蛋白分子： A (17 kDa)、 B (80 kDa)、 C (140 B (80 kDa)、 C (140 kDa)、 D蛋白 (50 kDa) 主要的靶抗原是著絲點(diǎn)蛋白 B 相關(guān)疾病 : 硬皮病 : 18% 局限型 (CREST綜合征 ): 80% 95% 四、抗核仁抗體 ? 抗 RNA多聚酶 Ⅰ /Ⅱ /Ⅲ ? 原纖維蛋白抗體 ANA分類 ——抗核仁抗體 靶抗原 : 核仁內(nèi)的 RNA多聚酶、原纖維 和 To/Th抗原 相關(guān)疾病 ： SSc 4% 五、抗其他細(xì)胞成分 ? 抗線粒體抗體 ? 抗高爾基抗體 ? 抗肌動(dòng)蛋白抗體 ? 抗溶酶體抗體 ? 抗角蛋白抗體 抗線粒體抗體 抗線粒體的定義： 是一種抗細(xì)胞漿成分的自身抗體，是非特異性抗體，其靶抗原可分為九種亞型 (M1到 M9) 抗線粒體在熒光顯微鏡下的模型 : 抗線粒體的臨床意義 : .AMAM2:陽(yáng)性率 96%PBC 特異性 97% 早期甚至肝功能正常無(wú)癥狀期即可陽(yáng)性 AMAM4和 M9:診斷價(jià)值還有待進(jìn)一步評(píng)價(jià) .現(xiàn)有的數(shù)據(jù)表明 :M4為預(yù)后差的指標(biāo) ,M9抗體陽(yáng)性可能提示預(yù)后良好 . 抗體對(duì)應(yīng)的抗原 相關(guān)疾病 M1 梅毒（提示活動(dòng)性） 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥，干燥綜合征 夏普綜合征，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 M2 原發(fā)性膽汁性肝硬化（高滴度） 其它慢性肝病 進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥 M3 假性狼瘡綜合征 M4 原發(fā)性膽汁性肝硬化 M5 非特異性膠原病 M6 肝炎（異丙異煙肼引起）