【正文】 + CB )+ k1 ] ?C k+1 (?C)2 （ ） A + B Ck + 1k 1此時， (?C)2 不能再略去，然而，微分方程 仍有解析解，但形式 復(fù)雜一些。 這樣我們可以把流動法包括在 化學(xué)弛豫 (松弛 )法中 。然而，實際上，大小接近的 τ很難分開，某些信號振幅小，也不容易探測到。上述微分方程的解有如下形式， i = 1,2,3,…… n 弛預(yù)時間等于特征方程實根本征值 λj 的倒數(shù)。 A + B Ck + 1k 1 k + 2k 2 D (a) 比 快得多（見 ） ，這里 K1 等于當(dāng) 1/τ2 = （ k+2+2k2)/2 時（ CA + CB)濃度。由圖的形狀可以區(qū)分兩種 情況（ a）和（ b）。 然而 ， 慢過程受快過程的影響 ， 因此 ?2含有較快過程的速度常數(shù) 。從這種意義上 說，兩個弛預(yù)時間相互偶聯(lián)。 它們的倒數(shù)是下面關(guān)于 λ的特征方程的兩個實根， （ ） τ1 = 1 / λ1 或 λ1 = 1/ τ1 τ2 = 1/λ2 或 λ2= 1/ τ2 （ ） 這里假定 λ1 λ2 ， τ1 τ2 ； 具體的， x1 = ΔCA ,， x2 = ΔCD a11 = k+1( ) + k1 （ ) a12 = k1 ， a21 = k+2 a22 = k+2 + k2 a 1 1 λ a 1 2a 2 1 a 2 2 λ = 0CA+ CD把 式代入 式， λ1 = 1/ τ1 = 189。 關(guān)于 Ci 的速度方程為 dCA/dt = dCB / dt = k+1CACBk1CC () dCC/dt = k+1CACB (k1 + k+2) CC + k2CD () dCD/dt = k+2 CC – k2 CD () 由 ， 有 △ CA = △ CB= () △ CC = CC () △ CD = CD () CiCA0 CB0C 0 A = C A + C C + C D = C A + C C + C DC 0 B = C B + C C + C D = C B + C C + C D= C A C A C B C BCC CDΔ C i = C i C i′又有， △ CA + △ CC + △ CD = 0 （ ） 利用 式，可以寫出兩個關(guān)于△ CA 和 △ CD 為獨 立變量的微分方程。 作為例子，讓我們研究下面兩步機(jī)制： () 我們可以把這一機(jī)制看成是一個雙分子結(jié)合過程為一個單分子過程 （ ）所伴隨。當(dāng)兩個組分 A和 B 任何一種大過量時， 例如， , 則有 () 因此，我們把 近似為 ，即 ≈ （ 1/τ= k+1 + k1) CA0 CB0C0A+ C0BCA+ CBCA+ CBCA+CB CA0 CB0C A + C BC 0 A + C 0 B C 0 A C 0 B ( C C ≤ C 0 B )CA+ CB CA0CA+ CB CA0 CA0CA+CB 1/τ與反應(yīng)性質(zhì)相關(guān)。利用 K1的一級近似值，將其代入 ， 再由 1/τ對 圖計算 k+1 和 k1(一級近似）。 K1可以通過靜態(tài)測量 （滴定法）而求得。因為，困難在于如何測量 和 ， A和 B平衡 時的濃度并不等于它們的分析濃度（或總濃度），即 。 盡管是一個雙分子過程 ， 原因在于微擾很小 ， 積分后 有 ?C(t)= ? e – t / τ () 或 ln ? / ?C = ( 1/τ)t () 式中 τ為馳預(yù)時間 ， 它等于 ?C達(dá)到 的 1/e 時所需要的時間 。物質(zhì)守蘅要求下面的關(guān) 系成立， ?CA= ?CB= ?CC≡ ?C= – Ci () 由 ，有 ?CA= ?C ?CB = ?C () ?CC = +?C Ci的變化率為 dCA/dt = dCB/dt = dCC/dt = k+1CACB k1CC () 不論微擾大與小 (如 ,停流法和溫度跳躍法 )，上式一般都成立。 Fig, 和 是 Tjump前后第 i 種物質(zhì)的平衡濃度（ T′℃ T ℃ )。 第二節(jié) 溶液中快速反應(yīng)動力學(xué)數(shù)據(jù)分析 一 .弛豫法數(shù)據(jù)分析 （ 近平衡處理 ） 在溫度跳躍法中 ， 由微擾所引起的濃度變化很小 ， 以至于弛豫的 時間過程可以用一個單指數(shù)函數(shù)近似 。 ?a是否接近于 ?1和 ?2取決于 A1/A2是否大于 1或小于 1。 該曲線的一級圖由（ b）中的 A′ 表示，它的斜 率給出 1/?1。 6ms之后 , 曲線幾乎只由 第二個指數(shù)項 A2et/?2決定，這部分用 B表示。 根據(jù) ， 可以畫出一 條延至 0時的理論曲線 。 二 .包括兩個指數(shù)項的反應(yīng)曲線 我們常常會遇到如下情況 ,即反應(yīng)曲線是由兩個指數(shù)曲線迭加而成 : χ =A0+ A1et/?1 + A2et/?2 () 式中 A0, A1和 A2為常數(shù) , ?1和 ?2為每個指數(shù)曲線的弛豫時間 。 作圖法 Guggenheim指出 ， 在一級反應(yīng)中 ， 可以通過測量 t時的 χ 值 （ χ t） 和 t + △ t時的 χ 值 （ χ t+ ?t） ， 然后以 log ?χ t+ ?t χ t?對 t作圖 ， 給出一直 線 ， 其中 △ t為不變的時間間隔 ， 直線的斜率就是一級速度常數(shù) k 。 由于 kapp對 χ ∞ 很敏感 ， χ 0χ ∞ 值 2%的誤差 ， 可以引起 kapp值 10%的差 。 即 當(dāng) t = 0 是 ， χ 0= A + B ； t = ∞ ， χ ∞ = A；因此 ， A =χ ∞ ， B =χ 0χ ∞ ， 將它們代入 , Ln[(x–x∞ )/(χ 0χ ∞ )]= (1/τ ） t （ ） 由 Ln∣ χ χ ∞ ∣ ~ t 圖的斜率可以得到 kapp。 一 .由單指數(shù)曲線計算表觀的一級速度常數(shù) kapp標(biāo)準(zhǔn)程序 典型的一級速度方程有如下形式 dχ /dt =a + bx （ ) X是一個與時間相關(guān)的變量 ， 它與反應(yīng)期間的濃度變化線性相關(guān) 。 表觀的一級速度常數(shù) （ kapp） 通常是反應(yīng)物濃度的函數(shù) 。此外 MNP(2chlomercuri4 Nitrophenol)可與 SH反應(yīng)，作為靜電環(huán)境的探針。當(dāng)然，這種探針 的引入不應(yīng)明顯影響酶的活力。 4. ( ?M ) (b) SSI 與酶結(jié)合的 Stoppedflow trace. SSI Proflavine E Proflavine At 460nm [E]0= ?M。 [Dye]0= ?M 。 在 Stoppedflow實驗中，當(dāng)?shù)孜铮ɑ虻孜镱愃莆铮┡c酶結(jié)合時，就 會形成酶 染料 配基三元復(fù)合物，結(jié)果光譜發(fā)生變化。 1. 可逆結(jié)合探針 活性部位探針（酶與配基的相互作用） 原黃素（ Prolavine)和猩紅（ Biebrich scarlet)作為探針可以結(jié)合到酶 的活性部位。 [E]0= 124 ?M 。 例如， Tjump法測量枯草桿菌蛋白酶 BPN‘(Subtilisin BPN‘)結(jié)合苯硼酸（ Benzene Boronic Acid) 的反應(yīng)，使用了對 硝基苯酚作 pH指示劑?？梢杂?pH 指示劑跟蹤反應(yīng)過程。 Fig. 測量酶結(jié)合的 NADH吸收 變化的例子 用大過量的 NAD+取代 酶結(jié)合的 NADH的時間過程。甘油醛三磷酸脫氫酶（ Glyceraldehyde3phosphate Dehydrogenase) 結(jié)合 NAD+時，在 360nm出現(xiàn)一條新帶，叫 Racker Band, 這對監(jiān)測酶反應(yīng)很有用。 在底物結(jié)合后，峰位在 340nm的蛋白質(zhì)熒光減少 20%. 累加 8次后平均 一次時間曲線 第二節(jié) 配基光學(xué)性質(zhì)的變化 利