酶的抑制及其動(dòng)力學(xué)2次-全文預(yù)覽
【正文】 法：雙倒數(shù)作圖 + 計(jì)算 加入單一固定濃度的 [I]，測(cè)定反應(yīng)初速度 v與 [S] 的關(guān)系，雙倒數(shù)作圖得一直線。 [S2] [S1] (Ki , 0) 1／ V [I] 1／ V [S1] [S2] [I] ④ 混合型抑制： 1 = Km （類(lèi)似競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑） 雙底物反應(yīng)中，產(chǎn)物可和非正常中間物形成死端 產(chǎn)物 (dead end product)，不能分解出正常產(chǎn)物 P + EAB ? EABP P + EA ? EAP ? 死端產(chǎn)物 P + FB ? FBP 正常 : NAD+ (A)+ 乳酸 (B) ? 丙酮酸 (P) + NADH(Q) 異常 : ENAD+ (EA) +丙酮酸 (P) ? EAP ? 總結(jié) : 不可逆 非專(zhuān)一性 專(zhuān)一性 抑制 競(jìng)爭(zhēng)抑制 非競(jìng)爭(zhēng)抑制 完全抑制 反競(jìng)爭(zhēng)抑制 混合抑制 可逆 部分抑制 產(chǎn)物抑制 底物抑制 基本 類(lèi)型 。 [S2] [I] Ki Ki′ [S1] Ki 1／ V [S1] Ki Ki′ [S2] [I] Ki 1／ V (三 ) CornishBowden 作圖法 ([S]/V ~[I])： 在雙倒數(shù)方程兩側(cè)乘以 [S]，再以 [S]/V ~[I]作圖，所得直線相交于一點(diǎn)，交點(diǎn)橫坐標(biāo)為 Ki’。 ? 競(jìng)爭(zhēng)性抑制：斜率之比 =1+ [I]/Ki；縱截距之比 =1 ? 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制：斜率之比 =縱截距之比 = 1+ [I]/Ki ? 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制：斜率之比 = 1；縱截距之比 = 1+ [I]/Ki’ ? 混合型抑制：斜率之比 = 1+ [I]/Ki； 縱截距之比 = 1+ [I]/Ki’ ? 優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便快速 缺點(diǎn)：誤差較大 (二 ) Dixon作圖法 (1/V~ [I]): ? Dixon作圖法： 將 [S]固定在不同的濃度，求每一個(gè) [S]下 V0與 [I]的關(guān)系，然后以 1/V對(duì) [I]作圖得一組直線，直線交點(diǎn)的橫坐標(biāo)為 Ki值。 E + S K1 ES K2 E + P + K1 + I I Ki Ki Ki′ Ki′ EI + S K1′ ESI K1′ ? 反應(yīng)歷程和處理方法同非競(jìng)爭(zhēng)性抑制 E Ks ES Ki Ki’ EI Ks’ ESI V= Vm[S] /(1+[I ] /Ki’) Km ( 1+[I ] /Ki ) + [S] 1+[I ] /Ki’ Vm和 Km都變化 ? 動(dòng)力學(xué)常數(shù)求?。? 1 = Km Ki=Ki’) ? 雙倒數(shù)作圖相交于橫軸一點(diǎn) ? Km不變； Vm 減小 ? 抑制率 i與 [S] 無(wú)關(guān)，不能通過(guò)增加 [S]來(lái)解除抑制。 例如某些機(jī)磷農(nóng)藥：敵敵畏、敵百蟲(chóng)、樂(lè)果等 (RO)2 P X O(S) ? O2N OP OC2H5 肝氧化酶 O2N OP OC2H5 S OC2H5 O OC2H5 (對(duì)硫磷 ) 膽堿酯酶 (對(duì)氧磷 ) Ks O2N O P OC2H5 O OC2H5 Ser O O2N OH （對(duì)硝基酚） （磷酸化膽堿酯酶） PAM（解磷定） 為胯化物 CH=NOP OC2H5 N OC2H5 CH3 EH + 第三節(jié) 可逆抑制作用動(dòng)力學(xué) 一 四種基本動(dòng)力學(xué)類(lèi)型： 1. 競(jìng)爭(zhēng)性抑制： E + S K1 ES K2 E + P + K1 I E K1[S] ES Ki Ki K1 EI Ki [I] Ki
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