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醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用方法學(xué)簡(jiǎn)介-全文預(yù)覽

  

【正文】 膠原酶:膠原 溶菌酶:糖蛋白和肽的糖苷鍵 血管 彈性蛋白酶:糖蛋白和彈性蛋白 心臟 肝臟 注意: 溶解液 酶效價(jià) 時(shí)間 新鮮組織、酶解時(shí)間過長(zhǎng),細(xì)胞自溶 pH值 堿性:胃蛋白酶失活 中性:胰酶活性欠佳 酶純度 細(xì)胞膜改變 機(jī)械法 剪碎組織 100目尼龍網(wǎng)過濾(去除大組織塊) 離心 1000prm35分鐘,去上清 洗三次,每次離心( 500~800prm)取上清, 棄細(xì)胞碎片 300目尼龍網(wǎng)過濾去除細(xì)胞團(tuán)塊 。如細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞的比例,同步分析細(xì)胞內(nèi) DNA、RNA和蛋白質(zhì)的含量, T淋巴細(xì)胞亞群的分離和定量,淋巴細(xì)胞表面受體的分析,分離和濃縮造血干細(xì)胞,血細(xì)胞增殖情況,惡性腫瘤早期診斷,藥物作用機(jī)制等。 標(biāo)記胰島素 cRNA探針 , 示胰島素 mRNA陽(yáng)性 (六)細(xì)胞和細(xì)胞化學(xué)定量術(shù) 顯微分光光度測(cè)量術(shù) 形態(tài)計(jì)量術(shù) 流式細(xì)胞術(shù) 顯微分光光度測(cè)量術(shù)( microspectrophotometry) 應(yīng)用顯微光光度計(jì),以物質(zhì)分子對(duì)光波的選擇性吸收為基礎(chǔ),在顯微鏡下對(duì)生物樣品中的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。 應(yīng)用:吖啶橙 +核酸 金胺 +結(jié)核菌 介子奎二噁因 +染色體 ( C)抗體熒光技術(shù) (用免疫染色) 利用特定的抗原必然和特定的抗體相結(jié)合這一個(gè)事實(shí),有意識(shí)地使帶熒光標(biāo)記的抗體和標(biāo)本中的抗原進(jìn)行抗原 /抗體反應(yīng),這樣兩者的結(jié)合體就能通過抗體的熒光觀察到。 ( A)自發(fā)熒光 ( B)二次熒光 ( C)抗體熒光技術(shù) ( A)自發(fā)熒光 (不加染色) 有些物質(zhì)不加染色,也能發(fā)出熒光(自發(fā)熒光或原發(fā)熒光),但在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)(細(xì)胞學(xué)、生物組織、培養(yǎng)體等)領(lǐng)域中,只有很少物質(zhì)具有自發(fā)熒光,常采用后兩種方法。 (四)免疫組織化學(xué)術(shù)( immunohistochemistry) 利用免疫學(xué)抗原和抗體特異性結(jié)合的原理,檢測(cè)組織或細(xì)胞中的多肽
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