【正文】 果。 （ 3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是 。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與 完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。（ 2）植物 A、B 體細(xì)胞雜交形成的雜種植株是四倍體，且該雜種植株減數(shù)分裂能形成正常配子，理論上是可育的；但如果將甲和乙有性雜交形成的二倍體，減數(shù)分裂由于不存在同源染色體無(wú)法聯(lián)會(huì)，無(wú)法形成正常配子，不可育。 （ 3）這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成 _______組織，然后經(jīng)過(guò) _______形成完整的雜種植株。 【試題評(píng)價(jià)】此題考查無(wú)性繁殖及單倍體植株的特點(diǎn)，難度適中。下列有關(guān)敘述，正確的是 A． ① 是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng) T 淋巴細(xì)胞 B． ② 中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成 C． ③ 同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性 D． ④ 是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的 能分泌特異性抗體的細(xì)胞群 【答案】 D 【解析】 ① 是獲得已經(jīng)免疫的 B 細(xì)胞， A 項(xiàng)錯(cuò)誤；胰蛋白酶使得組織塊分散為單個(gè)細(xì)胞， B 項(xiàng)錯(cuò)誤； ③ 同時(shí)具有 B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性， C 項(xiàng)錯(cuò)誤； ④ 經(jīng)篩選后獲得能夠獲得分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞， D 項(xiàng)正確。下列有關(guān)敘述， 錯(cuò)誤 ． ． 的是 A．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害 B．在愈傷組織培培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞 C．出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性 表達(dá)的調(diào)控 D．生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含 α—萘乙酸等生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑 【答案】 B 【解析】消毒劑的使用既要?dú)⑺辣砻嫖⑸?，有防止傷害組織細(xì)胞，影響組織培養(yǎng)， A項(xiàng)正確；植物細(xì)胞融合是指經(jīng)纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質(zhì)體的誘導(dǎo)融合，帶有細(xì)胞壁的愈傷組織細(xì)胞不能誘導(dǎo)融合形成染色體加倍的細(xì)胞， B 項(xiàng)錯(cuò)誤；出芽和生根都是細(xì)胞再分化的結(jié)果，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)， C 項(xiàng)正確； α—萘乙酸為生長(zhǎng)素類(lèi)似物，可誘導(dǎo)愈傷組織生根， D 項(xiàng)正確。 、動(dòng)物基因工程 ①、② 切割質(zhì)粒、將質(zhì)粒與目的基因重組 、 d 、 D、 F ：遺傳物質(zhì)相同；不同點(diǎn)：表面蛋白質(zhì)不同。在圖 17 所示過(guò)程中，獲取目的基因的步驟是流程 （ 用圖中編號(hào)回答 ） ；在流程 ③ 中必需實(shí)施的步驟有 _____。 （ 9 分 ） 圖 17 表示利用致病病毒 M 的表面蛋白基因和無(wú)害病毒 N，通過(guò)基因工程制作重組 M 病毒疫苗的部分過(guò)程。 （ 3）如果這種貧血病可以遺傳給后代，而又能證實(shí)不是重型地中海貧血，即 β 鏈不能被限制性酶切割，則為證明該突變位點(diǎn)就是這種貧血病的致病點(diǎn)提供了有力證據(jù)。如果 ____________，但 ____________，則為證明該突變位點(diǎn)就是這種貧血癥 的致病位點(diǎn)提供了一個(gè)有力證據(jù)。） （ 1）在獲得單鏈模板的方式上， PCR 擴(kuò)增與體內(nèi) DNA 復(fù)制不同，前者通過(guò) __________解開(kāi)雙鏈，后者通過(guò) ________解開(kāi)雙鏈。用 PCR 擴(kuò)增包含該位點(diǎn)的一段 DNA 片段 l，突變序列的擴(kuò)增片段可用一種限制酶酶切為大小不同的兩個(gè)片段 m 和 s；但正常序列的擴(kuò)增片段不能被該酶酶切，如圖 11（ a）。目前在 P1 的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是 DNA 片段 DNA 片段的表達(dá)載體 P1 氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽 【答案】 C 【解析】 該題目屬于蛋白質(zhì)工程 ,已經(jīng)獲得該目的基因片段 ,不需要合成編碼目的肽的 DNA片段 ,故 A錯(cuò)誤 ,是需要構(gòu)建含目的肽 DNA片段的表達(dá)載體 ,但這不是第一步 ,故 B錯(cuò)誤 。綠熒光胚胎數(shù)量 /胚胎總數(shù)），可推出重組的配子比例為： 4紅 （ 3）由題可知， D 與 G 是 連鎖遺傳的，再由第（ 2）題的分析可知，其基因分析如下圖（左）所示，因此正常情況不會(huì)產(chǎn)生紅 【答案】（ 1）限制性核酸內(nèi)切酶 DNA 連接酶 受精卵 表達(dá) （ 2） ① b ② b、 d （ 3） N 非姐妹染色單體 4（紅 a. DDGG b. DDGg c. DdGG d. DdGg （ 3）雜交后，出現(xiàn)紅 （ 1）在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中，將 G 基因與質(zhì)粒重組，需要的兩類(lèi)酶是 和 。具有純合突變基因（ dd）的斑馬魚(yú)胚胎會(huì)發(fā)出紅色熒光。 （ 3）胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的另一個(gè)雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。 【 答案】 （ 1）顯微注射法 限制性內(nèi)切酶 DNA 連接酶 農(nóng)桿菌可感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中 （ 2）蛋白質(zhì) 現(xiàn)有蛋白質(zhì) 新蛋白質(zhì) 氨基酸 （ 3）同 供體 受體 【解析】 (1)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用顯微注射法，構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是限制性內(nèi)切酶和 DNA 連接酶。在該實(shí)例中，引起 T4 溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是 組成該酶肽鏈的 序列發(fā)生了改變。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶有 和 。 材料乙： T4 溶菌酶在溫度較高時(shí)易失去活性，科學(xué)家對(duì)編碼 T4 溶菌酶的基因進(jìn)行改造，使其表達(dá)的 T4 溶菌酶的第 3 位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，在該半胱氨酸與第 97 為的半胱氨酸之間形 成了一個(gè)二硫鍵，提高了 T4 溶菌酶的耐熱性。下列敘述正確的是 A． 根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準(zhǔn)確計(jì)算樣品中含有的活菌實(shí)際數(shù)目 B． 外源 DNA 必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行復(fù)制 C． 重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)?DNA 分子脫氧核糖和磷酸交替連接 D． 放射自顯影結(jié)果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定 DNA 的細(xì)菌菌落位置 【答案】 D 【解析】 稀釋涂布平板 法可以測(cè)定活菌數(shù)量，但如果菌種之間的距離較小時(shí)會(huì)有多個(gè)活菌種共同形成一個(gè)菌落的現(xiàn)象， 菌落數(shù)只能大約推測(cè)出活菌數(shù) ， 不能準(zhǔn)確計(jì)算活菌數(shù)， A錯(cuò)誤；外源 DNA 作為一個(gè)完整的基因，自身含有啟動(dòng)子和終止子， B 錯(cuò)誤； 所有 DNA 分子都是脫氧核糖和磷酸交替連接，是共性，不同的堿基序列才是 DNA 分子的特異性， DNA分子雜交原理是相應(yīng)堿基序列的互補(bǔ)配對(duì) ， C錯(cuò)誤； 通過(guò) DNA分子雜交鑒定含有某特定 DNA的細(xì)菌克隆。2020 年全國(guó)高考生物試題分章匯編（新課標(biāo)版） 選修三 《現(xiàn)代生物技術(shù)》 專題 1 基因工程 （ 2020 江蘇卷） ，為了克服這個(gè)缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再 重組表達(dá)。 (2020 安徽卷 )6. 下圖為通過(guò) DNA 分子雜交鑒定含有某特定 DNA 的細(xì)菌克隆示意圖。 （ 2020 新 課標(biāo)卷 Ⅰ） 40．【生物 ——選修 3 現(xiàn)代生物科技專題】（ 15 分） 閱讀如下材料： 材料甲：科學(xué)家將牛生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫言?，得到了體型巨大的 “超級(jí)小鼠 ”；科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用 法。該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì) 進(jìn)行改造，或制造制造一種 的技術(shù)。在資料丙的實(shí)例中，兔甲稱為 體，兔乙稱為 體。在該實(shí)例 中，引起 T4 溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的氨基酸序列發(fā)生了改變。 （ 2020 北京 卷） 30.（ 18 分） 斑馬魚(yú)的酶 D 由 17 號(hào)染色體上的 D 基因編碼。用個(gè)體 M 和 N 進(jìn)行如下雜交實(shí)驗(yàn)。 a. DDgg b. Ddgg ② 子代中只發(fā)出綠色熒光 的胚胎基因型包括 （選填選項(xiàng)前的符號(hào)）。綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù)，可計(jì)算得到該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比例，算式為 。 （ 2）由于出現(xiàn)了綠色熒光（ D_G_）和紅色熒光（ ddgg）的子代胚胎，則親代 M 中必定均含有 d 基因，同時(shí)可推出 M 和 N 的基因型是： Ddgg、 DdGg，由此可知第一問(wèn)選 b，第二問(wèn)選 b、 d。綠熒光胚胎的概率為x/4，即： x/4=（紅 (2020 廣東卷 )，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌體和溶血性均較強(qiáng)的多肽 P1。一對(duì)夫婦生有一位重型β地中海貧血癥患兒，分析發(fā)現(xiàn)，患兒血紅蛋白β鏈第 39 位氨基酸的編碼序列發(fā)生了突變（ C→ T）。（終止密碼子為 UAA、 UAG、 UGA。 （ 3）研究者在另一種貧血癥的一位患者β鏈基因中檢測(cè)到一個(gè)新的突變位點(diǎn)，該突變導(dǎo)致β鏈第 102 位的天冬酰胺替換為蘇氨酸。由圖可知，其突變?yōu)橛赡０彐湹?CTC 突變成 ATC，mRNA 上由 GAG 變成 UAG，因此終止密碼子提前出現(xiàn)，使翻譯提前終止。 （ 2020 上海卷 ） （ 六 ） 回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞和表達(dá)的問(wèn)題。 56．基因工程除了微生物基因工程外，還有 _____。 A．使用質(zhì)粒運(yùn)載體是為了避免目的基因被分解 B．質(zhì)粒運(yùn)載體只能在與目的基因重組后進(jìn)入細(xì)胞 C．質(zhì)粒運(yùn)載體可能是從