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分子生物學(xué)問答題-全文預(yù)覽

  

【正文】 聚合酶Ⅲ的5’3’合成酶進(jìn)行修補(bǔ);(4)在修補(bǔ)過程中,隨著切口(nick)的移動(dòng),將放射性的底物摻人到雙鏈DNA中。這三個(gè)過程組成一個(gè)循環(huán)周期;每個(gè)周期合成的產(chǎn)物又可作為下—個(gè)周期的模板,如此循環(huán)往復(fù),經(jīng)過11輪循環(huán)后,靶DNA的拷貝數(shù)理論n2=上呈2增長(zhǎng)。答:Sanger DNA測(cè)序法是建立在兩個(gè)基本原理之上:(1)核酸是依賴于模板在聚合酶的作用下由5’端向3’端聚合;(2)可延伸的引物必須能提供游離的3’羥基末端,雙脫氧核苷酸由于缺少游離的3’羥基末端,因此會(huì)終止聚合反應(yīng)的進(jìn)行a如果分別用4種雙脫氧核苷酸終止反應(yīng),則會(huì)獲得4組長(zhǎng)度不同的DNA片段。Ecoli的recA蛋白有雙重功能,一是在DNA重組過程中具有DNA鏈交換活性;二是具有蛋白水解酶激活活性。答:在DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷時(shí),SOS應(yīng)答能夠誘導(dǎo)合成很多參與DNA損傷修復(fù)的酶和蛋白質(zhì)。37. 人DNA雙鏈斷裂后的修復(fù)機(jī)制。DNA單鏈區(qū)產(chǎn)生于recB、recC、recD酶的作用或DNA缺口。當(dāng)recB、reeC、recD遇到chi序列。36. 簡(jiǎn)述大腸埃希菌重組修復(fù)機(jī)制。在這一過程中,NER蛋白被募集于暫停的RNA聚合酶。34. 簡(jiǎn)述人類核苷酸切除修復(fù)機(jī)制。33. 簡(jiǎn)述E.coli核苷酸切除修復(fù)機(jī)制。隨后,MutS錯(cuò)配DNA復(fù)合物募集該修復(fù)系統(tǒng)的第二種蛋白因子MutL,MutL再激活內(nèi)切核酸酶MutH在錯(cuò)配位點(diǎn)附近切斷錯(cuò)配核苷酸所在的一條DNA鏈,在解旋酶UvrD和外切核酸酶作用下,將包括錯(cuò)配核苷酸在內(nèi)的一條單鏈DNA去除,所產(chǎn)生的單鏈DNA缺口由DNA聚合酶Ⅲ填補(bǔ).DNA連接酶封口,完成錯(cuò)配修復(fù)。30. 簡(jiǎn)述哺乳動(dòng)物中DNA損傷的修復(fù)類型。(2)脫氧核糖變化:脫氧核糖上的每個(gè)碳原 子和羥基上的氫都能與OH反應(yīng),導(dǎo)致脫氧核糖分解,最后引起DNA鏈斷裂。當(dāng)DNA受到最易被其吸收波長(zhǎng)(~260nm)的紫外線照射時(shí),同一條DNA鏈上相鄰的嘧啶以共價(jià)鍵連成二聚體,相鄰的兩個(gè)T、或兩個(gè)C、或C與T間都可以環(huán)丁基環(huán)連成二聚體,其中最容易形成的是TT二聚體。27. 簡(jiǎn)述DNA分子的自發(fā)性損傷。 答:由于在沒有乳糖的條件下,lac阻遏蛋白能與操縱基因特異地結(jié)合,抑制了結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)。真核基因調(diào)控中雖然也發(fā)現(xiàn)有負(fù)性調(diào)控元件,但其存在并不普遍;真核基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)的調(diào)控蛋白也有起阻遏和激活作用或兼有兩種作用者,但總的是以激活蛋白作用為主。答:阻遏蛋白通常是與基因操縱區(qū)結(jié)合,減弱或阻止其調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄,其介導(dǎo)的調(diào)控方式為負(fù)調(diào)控。答:(1)反式作用因子指能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各順式作用元件812 bp核心序列上,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的一組蛋白質(zhì),有時(shí)也稱轉(zhuǎn)錄因子。(2)mRNA穩(wěn)定性調(diào)節(jié):mRNA的穩(wěn)定性是翻譯水平調(diào)控的重要因素,是由于mRNA是翻譯蛋白質(zhì)的模板,其量的多少直接影響蛋白質(zhì)合成的量。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)AUG密碼子離5’端帽子的位置太近時(shí),不容易被40S亞基識(shí)別。AUG的閱讀框通常與正常編碼區(qū)的閱讀框不一致,不是正常的開放閱讀框a如果從539。90%以上的真核mRNA符合第一AUG規(guī)律。培養(yǎng)的真核細(xì)胞處于營(yíng)養(yǎng)不足(“饑餓”)時(shí),elF2失活,最終導(dǎo)致肽鏈合成起始效率降低。它的表達(dá)只受啟動(dòng)序列或啟動(dòng)子與RNA聚合酶相互作用的影響,而不受基他機(jī)制調(diào)節(jié)a調(diào)控區(qū)多呈低甲基化。19. 舉例說(shuō)明什么是管家基因及其基因表達(dá)特點(diǎn)。通常情況下,真核生物細(xì)胞只有2%~15%的基因處于有轉(zhuǎn)錄活性的狀態(tài)。(3)反式作用因子的活性調(diào)節(jié):①反式作用因子的活性調(diào)節(jié):真核基因轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)節(jié),首先表現(xiàn)為反式作用因子的功能調(diào)節(jié),即特定的反式作用因子被激活后,可以啟動(dòng)特定基因的轉(zhuǎn)錄。答:主要通過反式作用因子與順式作用元件和RNA聚合酶(RNA polymerase,RNA p01)的相互作用完成。不同的結(jié)構(gòu)域有自己的特征性結(jié)構(gòu)。15. 列舉幾種真核基因的順式作用元件 答:(1)啟動(dòng)子:Hogness(TATA)盒,CAAT盒;(2)增強(qiáng)子:SV40病毒中,位于早期啟動(dòng)子5’上游約200 bp,內(nèi)含2個(gè)72bp的重復(fù)序列,其核心序列為GGTGTGGA_AAG:(3)沉默子:SV40中的AG~ITiTIT序列為終止轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件。(4)初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物要經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工修飾。(3)翻譯水平的調(diào)控:①反義RNA的調(diào)控作用;②RNA的穩(wěn)定性;③蛋白質(zhì)合成中的自身調(diào)控。11. 簡(jiǎn)述乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)。9. 簡(jiǎn)述σ因子在原核基因表達(dá)調(diào)控中的意義。(2)原核生物的基因表達(dá)以操縱子為基本單位。7. 什么是順式作用元件? 答:基因中能影響基因表達(dá),但不編碼RNA和蛋白質(zhì)的DNA序列。3. 原核生物基因組有哪些特點(diǎn)? 答:基因組由一條環(huán)狀雙鏈DNA組成;只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn);大多數(shù)結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu);結(jié)構(gòu)基因無(wú)重疊現(xiàn)象;無(wú)內(nèi)含子,轉(zhuǎn)錄后不需要剪接;基因組中編碼區(qū)大于非編碼區(qū);重復(fù)基因少,結(jié)構(gòu)基因一般為單拷貝;有編碼同工酶的等基因;基因組中存在可移動(dòng)的DNA序列;非編碼區(qū)主要是調(diào)控序列。2. 病毒基因組有哪些特點(diǎn)?答:不同病毒基因組大小相差較大;不同病毒基因組可以是不同結(jié)構(gòu)的核酸;除逆轉(zhuǎn)錄病毒外,為單倍體基因組;病毒基因組有的是連續(xù)的,有的分節(jié)段;有的基因有內(nèi)含子;病毒基因組大部分為編碼序列;功能相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄為多順反子mRNA有基因重疊現(xiàn)象。6. 質(zhì)粒有哪些特性? 答:在宿主細(xì)胞內(nèi)可自主復(fù)制;細(xì)胞分裂時(shí)恒定地傳給子代;所攜帶的遺傳信息能賦予宿主特定的遺傳性狀;質(zhì)??梢赞D(zhuǎn)移。 答:(1)只有一種RNA聚合酶。(5)原核生物基因表達(dá)的調(diào)控主要在轉(zhuǎn)錄水平,即對(duì)RNA合成的調(diào)控。10. 在有乳糖而無(wú)葡萄糖的條件下,乳糖操縱子是如何調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始的?答:無(wú)葡萄糖時(shí),cAMP處于高水平,與CAP形成cAMPCAP復(fù)合物并結(jié)合到啟動(dòng)子上游的CAP位點(diǎn),乳糖存在阻遏蛋白不與操縱基因結(jié)合,cAMPCAP復(fù)合物與lac操縱子的調(diào)控元件結(jié)合后,促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。(2)轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控:①依賴ρ因子的終止調(diào)控,通過ρ因子的作用使轉(zhuǎn)錄終止;②不依賴ρ因子的終止調(diào)控;③核糖體調(diào)控轉(zhuǎn)錄終止。(3)轉(zhuǎn)錄和翻譯分開進(jìn)行:在核中轉(zhuǎn)錄生成mRNA穿過核膜至胞質(zhì)指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成。14. 真核生物基因組DNA水平的表達(dá)調(diào)控包括哪幾種方式? 答:(1)染色質(zhì)的丟失;(2)基因擴(kuò)增;(3)基因重排;(4)基因的甲基化修飾;(5)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控作用。這些結(jié)構(gòu)域含有幾十到幾百個(gè)氨基酸殘基。17. 簡(jiǎn)述真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制。在結(jié)構(gòu)上含有與DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。答:(1)在同一機(jī)體的各種細(xì)胞中雖然含有相同的遺傳信息即相同的結(jié)構(gòu)基因,但它們并非在所有細(xì)胞中都同時(shí)表達(dá),而必須根據(jù)機(jī)體的不同發(fā)育階段、不同的組織細(xì)胞及不同的功能狀態(tài),選擇性、程序性地表達(dá)特
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