《基因工程制下》ppt課件(文件)
【正文】 （ 4）純度測定：非還原型 SDSPAGE,銀染為單一條帶，掃描儀測定純度 95%；HPLC測定呈一個(gè)吸收峰，或主峰占峰總面積的 95%以上。 。 （ 6）殘余外源性 DNA測定：探針雜交，應(yīng)低于 100pg （ 7）殘余血清 IgG含量測定 （ 8）殘余抗生素活性測定 （ 9）紫外光譜掃描：最大吸收峰應(yīng)為 280+2nm （ 10）肽圖測定：用 CNBr裂解法 （ 12）等電點(diǎn)測定：用等電聚焦法 成品檢定 （ 1）物理形狀：凍干制品為白色或?yàn)辄S色疏松體，加水后不含有肉眼可見的不溶物。 五、產(chǎn)品的保存 ：制成干粉或結(jié)晶，在干燥器中 4度可長期保存。 體內(nèi)測定：建立合適的動(dòng)物模型 體外測定：細(xì)胞培養(yǎng)計(jì)數(shù)法、 3HT α R摻入法等。 ② 非蛋白類雜質(zhì) ：包括病毒、細(xì)菌、熱原、內(nèi)毒素、致敏原、DNA等。thrich）（瑞士蘇黎士聯(lián)邦理工學(xué)院）教授的貢獻(xiàn)是把核磁共振（ NMR）分析方法應(yīng)用到了生物大分子 (蛋白質(zhì)和核酸 )的結(jié)構(gòu)研究中，建立了一套完整的確定生物大分子空間結(jié)構(gòu)的方法。存在鏈間二硫鍵的分子在還原的 SDSPAGE 中被還原 ,分子變?yōu)樾〉碾逆湺^在非還原的 SDSPAGE 中泳動(dòng)快。 ② 雙向?qū)蔷€ SDSPAGE：既無鏈內(nèi)又無鏈間二硫鍵的分子位于對角線上 (兩向電泳中分子遷移率相等 ) 。 （ 3） 部分氨基酸序列分析 ：測定 N端 15個(gè)氨基酸，作為重組蛋白質(zhì)和多肽的重要鑒定指標(biāo)。 ： （ 1） 肽圖分析 ：用酶法或化學(xué)法降解目的蛋白質(zhì)，對生成的肽段進(jìn)行分離分析。見 PAGE 100~101。 可溶性蛋白，誘導(dǎo)后 2，3， 4， 5， 6小時(shí)后，目的蛋白的表達(dá)量 包含體，誘導(dǎo)后 2， 3， 4， 5，6小時(shí)目的融合蛋白表達(dá)量 第八節(jié) 基因工程藥物的分離純化 （ 三 ） 初步分離 ： 離心 ， 超離心 ： 酶法 DNase,RNase；超聲 ： 丙酮 ， 脂肪酶 （ 四 ） 粗分蛋白 ： NaCl， (NH4)2SO4沉淀 ： 甲醇 ， 乙醇 ， 丙酮 ： 除去雜蛋白 ： 除去雜蛋白 （ 五 ） 除鹽
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