《分離工程第七章》ppt課件(文件)
【正文】 adsorption 載體的活化和偶聯(lián) ? 親和吸附的載體通常是惰性的，往往不能直接與配基連接，偶聯(lián)前需要先活化，活化的方法主要有： – 溴化氰活化法：瓊脂糖、葡聚糖引入亞氨基碳酸鹽 – 高碘酸活化法：氧化多糖，生成烷基胺 – 環(huán)氧化法 ：多糖類(lèi)載體與環(huán)氧氯丙烷作用生成環(huán)氧化合物，再與氨基偶聯(lián) – 甲苯磺酰氯法：雙功能試劑法 二乙烯砜 環(huán)氧化法 O H + C H2OC H CH2C l O CH2C H C H2O+P N H2O CH2N H P表氯醇 Activation 配基偶聯(lián)方法 ? 載體經(jīng)活化后，就可以進(jìn)行與配基的偶聯(lián)反應(yīng)。親合配基固定在膜孔表面。磷酸激酶，脫羧酶， DNA和RNA的核酸酶和聚合酶以及干擾素等。 ?利用被膜截留的水溶性高分子化合物或不溶性微粒為載體的固定親合配基。 親和膜分離操作方式 ? 親和超濾過(guò)程（分離目標(biāo)物的同時(shí)，濃縮其他成分） ? 微孔親和過(guò)濾過(guò)程（僅分離目標(biāo)物） 二、應(yīng)用和特點(diǎn) ?應(yīng)用： 如伴刀豆球蛋白（ con A）的純化，連續(xù)親和循環(huán)提?。?CARE）純化 ?半乳糖苷酶等。 ?操作： 包括親和分配（進(jìn)料）、雜蛋白反萃取（清洗）和目標(biāo)產(chǎn)物反萃?。ㄏ疵摚┑炔襟E。 ?原理 –一次作用親和沉淀 ?水溶性化合物分子上偶聯(lián)兩個(gè)或兩個(gè)以上親和配基，與含有兩個(gè)以上親和結(jié)合部位的多價(jià)蛋白質(zhì)產(chǎn)生親和交聯(lián)，進(jìn)而增大為較大的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)而沉淀。同時(shí)，在分離過(guò)程的早期階段除去對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物有害的雜質(zhì)（如蛋白酶），有利于提高目標(biāo)產(chǎn)品質(zhì)量和收率。親和介質(zhì)結(jié)合目標(biāo)分子后，通過(guò)改變物理場(chǎng)使介質(zhì)與目標(biāo)分子共同沉淀。 ?一般將含配基的助表面活性劑稱(chēng)為親合助表面劑。 –缺點(diǎn) ?相當(dāng)于層析過(guò)程的一個(gè)理論板，分離效率較低。分子量差 10倍才能完全分離。 –缺點(diǎn) ?理論板數(shù)很低，吸附和清洗效率低； ?膜的污染會(huì)使操作速度、吸附效率和親和膜的壽命下降。 二、應(yīng)用及特點(diǎn) ?
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