分離工程第七章ppt課件-文庫吧資料
2024-09-04 22:33本頁面
【正文】 – 甲苯磺酰氯法：雙功能試劑法 二乙烯砜 環(huán)氧化法 O H + C H2OC H CH2C l O CH2C H C H2O+P N H2O CH2N H P表氯醇 Activation 配基偶聯(lián)方法 ? 載體經(jīng)活化后，就可以進行與配基的偶聯(lián)反應(yīng)。 –在配基與載體之間連接間隔臂，可增大配基與載體之間的距離，使其與生物大分子發(fā)生有效的親和結(jié)合。 親和吸附載體的種類 種 類 組 成 性 能 多孔玻璃載體 硅酸鹽 堅硬、耐酸堿、易修飾 聚丙烯酰胺 凝膠載體 丙烯酰胺 N,N亞甲基雙丙烯酰胺 親水性好 可供活化基團多 纖維素載體 多糖類物質(zhì) 來源豐富，但非特異性吸附及空間位阻強，對分離不利 葡聚糖凝膠載體 經(jīng)環(huán)氧丙烷交聯(lián)的多糖類 理化性質(zhì)穩(wěn)定，但粒徑太小 ?常用制備親和吸附介質(zhì)的方法有： CNBr活化法、環(huán)氧基活化法和硅膠的活化。 ?親和配基： 可選擇的有酶的抑制劑、抗體、 A蛋白、凝集素、輔酶和磷酸腺苷、三嗪類色素、過濾金屬離子、組氨酸和肝素等。 二、親和吸附介質(zhì) ?一般情況下，需根據(jù)目標產(chǎn)物選擇合適的親和配基修飾固體粒子，制備所需的親和吸附介質(zhì)。 –是較多采用的洗脫方法。 –相當于頂替展開 –特點：條件溫和，有利于保護目標產(chǎn)物的活性和提高純度。 ?操作 –包括進料吸附、清洗、洗脫和再生等步驟。 Keq一般為 104~108dm3/mol，太大洗脫回收困難，太小則難于有效吸附目標物質(zhì)。L 其中： E、 L和 E ?親和配基： 親和作用分子對中被固定的分子。 –群特異性體系：大多數(shù)親和體系，如外源凝集素可與任何含有糖基的蛋白質(zhì)結(jié)合。 ?在親合層析分離中，它們與層析劑結(jié)合，可用來分離整個細胞、細胞表面受體蛋白、細胞膜片段及各種含糖配基的生物大分子物質(zhì)。 ?外源凝集素是一種天然蛋白質(zhì)
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