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分離工程第七章ppt課件-資料下載頁(yè)

2025-08-22 22:33本頁(yè)面
  

【正文】 相當(dāng)于層析過(guò)程的一個(gè)理論板,分離效率較低。 ?思考題:簡(jiǎn)述親合錯(cuò)流過(guò)濾技術(shù)分離蛋白質(zhì)的操作過(guò)程? 第五節(jié) 其他親和純化技術(shù) 一、親和雙水相分配 ?原理: 利用偶聯(lián)親和配基的 PEG為成相聚合物進(jìn)行目標(biāo)產(chǎn)物的雙水相萃取,可在親和配基的親和結(jié)合作用下促進(jìn)目標(biāo)產(chǎn)物在 PEG相的分配,提高目標(biāo)產(chǎn)物的分配系數(shù)和選擇性。 ?操作: 包括親和分配(進(jìn)料)、雜蛋白反萃?。ㄇ逑矗┖湍繕?biāo)產(chǎn)物反萃取(洗脫)等步驟。 二、親和反膠團(tuán)萃取 ?原理: 在反膠團(tuán)相中除通常的表面活性劑(如 AOT)以外,添加另一種親水頭部為目標(biāo)分子的親和配基的助表面活性劑,通過(guò)親和配基與目標(biāo)分子的親和結(jié)合作用,促進(jìn)目標(biāo)產(chǎn)物在反膠團(tuán)相的分配,提高目標(biāo)產(chǎn)物的分配系數(shù)和反膠團(tuán)萃取分離的選擇性。 ?一般將含配基的助表面活性劑稱為親合助表面劑。 三、親和沉淀 ?定義: 生物親和作用與沉淀分離相結(jié)合的蛋白質(zhì)類生物大分子的分離純化技術(shù)。 ?原理 –一次作用親和沉淀 ?水溶性化合物分子上偶聯(lián)兩個(gè)或兩個(gè)以上親和配基,與含有兩個(gè)以上親和結(jié)合部位的多價(jià)蛋白質(zhì)產(chǎn)生親和交聯(lián),進(jìn)而增大為較大的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)而沉淀。 –二次作用親和沉淀 ?利用在物理場(chǎng)(如 pH、離子強(qiáng)度、溫度和添加金屬離子等)改變時(shí)溶解度下降、發(fā)生可逆性沉淀的水溶性聚合物為載體固定親和配基,制備親和沉淀介質(zhì)。親和介質(zhì)結(jié)合目標(biāo)分子后,通過(guò)改變物理場(chǎng)使介質(zhì)與目標(biāo)分子共同沉淀。 ?優(yōu)點(diǎn) –親和結(jié)合作用在自由溶液中進(jìn)行,無(wú)擴(kuò)散傳質(zhì)阻力,親和結(jié)合速度快;配基利用率高; –利用成熟的離心或過(guò)濾技術(shù)回收沉淀,易于規(guī)模放大; –可用于高粘度或含微粒的料液中目標(biāo)產(chǎn)物的純化,因此可在分離操作的較初期采用,有利于減少分離操作步驟,降低成本。同時(shí),在分離過(guò)程的早期階段除去對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物有害的雜質(zhì)(如蛋白酶),有利于提高目標(biāo)產(chǎn)品質(zhì)量和收率。 思考題 ? 什么是親和反膠團(tuán)萃?。? ? 什么是親和沉淀? 本章內(nèi)容到此結(jié)束 謝謝大家
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