【正文】 /L教學過程中師生活動設(shè)計思考人體內(nèi)膽固醇的生理作用及正常含量提綱、板書設(shè)計原理及簡要操作步驟作業(yè) 主要參考資料[1]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學實驗教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學出版社，2010總結(jié)分析重點講解血清膽固醇的測定原理；再次復(fù)習分光光度計使用要熟練《醫(yī)學生物化學實驗》教案 第 12次課 2學時實驗項目 牛奶中提取酪蛋白實驗性質(zhì)基礎(chǔ)性實驗 教學目的和要求。酪蛋白是含磷蛋白質(zhì)的混合物，~，不溶于水、醇、有機溶劑。觀察牛奶開始有絮狀沉淀出現(xiàn)后，保溫一定時間使沉淀完全。教學過程中師生活動設(shè)計 牛奶中蛋白質(zhì)成份，牛奶的營養(yǎng)提綱、板書設(shè)計原理及簡要操作步驟作業(yè)設(shè)計另一種方法提取蛋白的方法。卵磷脂和腦磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性質(zhì)可將其與中性脂肪分離開；此外，卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂不溶，利用此性質(zhì)又可將卵磷脂和腦磷脂分離。這樣通過對分解產(chǎn)物的檢驗可以對卵磷脂進行鑒定▲。▲取干燥試管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氫氧化鈉溶液，放入水浴中加熱15min，在管口放一片紅色石蕊試紙，觀察顏色有無變化，并嗅其氣味。▲取干凈試管一支， 硫酸氫鉀，用試管夾夾住并先在小火上略微加熱，使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔，然后再集中加熱，待有水蒸氣放出時，嗅有何氣味產(chǎn)生。菌體容易收集，RNA也易分離。在酵母的堿性提取液上清中加入酸性乙醇溶液使解聚的核糖核酸沉淀，利用離心技術(shù)收集RNA粗提物。，混勻?！?，（大約4滴），混勻，用試管夾夾好后放到沸水浴中5~10min，注意觀察溶液是否變成綠色，說明核糖的存在。掌握根據(jù)物質(zhì)性質(zhì)設(shè)計分離方法教學重點與難點重點：離心機的使用及DNA分離難點：DNA的組分和鑒定方法實驗材料試劑：新鮮菜花、95%乙醇、丙酮、5%高氯酸溶液、10%氯化鈉溶液、石英砂。 打開研磨桿上蓋，用移液器取研磨液 2ml，轉(zhuǎn)至試管中，緩慢沿試管閉加入4ml冰無水乙醇，輕輕轉(zhuǎn)試管，可看到白色絮狀物出現(xiàn)，即提取出的纏繞在一起的DNA。 c)二苯胺水浴鑒定▲：兩只試管中各加1ml二苯胺試劑，在沸水浴中加熱10min，觀察顏色變化。實驗內(nèi)容一、實驗原理：利用沉淀法分離蛋白質(zhì)▲利用電泳法鑒定其組分▲利用考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度▲二、實驗步驟：自行設(shè)計教學過程中師生活動設(shè)計 實驗完畢后各小組結(jié)果比較提綱、板書設(shè)計每個小組寫出簡要實驗方案作業(yè) 比較各組實驗設(shè)計分析自己的實驗設(shè)計優(yōu)缺點主要參考資料[1] 《生物化學實驗》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 讓學生了解不同分離測定方法； 考察學生設(shè)計實驗和操作能力 。教學過程中師生活動設(shè)計 DNA的種類及組成成分提綱、板書設(shè)計原理及簡要操作步驟作業(yè)本實驗中為何用高氯酸溶液？主要參考資料[1] 《生物化學實驗》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 實驗原理要讓學生知道每一步的作用和方法； 鑒定的過程要與RNA鑒定做對比《醫(yī)學生物化學實驗》教案 第 16 次課 2學時實驗項目 卵清蛋白分離及濃度測定實驗性質(zhì)設(shè)計性實驗 教學目的和要求能自行設(shè)計卵清蛋白分離及組分鑒定方法能較準確測得蛋白質(zhì)濃度教學重點與難點重點：分離鑒定方法，濃度測定方法難點：實驗設(shè)計實驗材料試劑：考馬斯亮藍溶液、卵清、乙醇、漂洗液。b)設(shè)置對照組：另外一試管中加1ml 2 mol/L的Nacl溶液作為對照。實驗內(nèi)容一、實驗原理★：，DNA含量豐富，并且材料無色，便于鑒定；，釋放出DNA；，而細胞中某些物質(zhì)溶于酒精，可以用酒精提取含雜質(zhì)較少的DNA；，和二苯胺試劑沸水浴條件下作用呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺可作為鑒定DNA的試劑。注意事項：離心一定要平衡對稱放入離心機中，離心機達到設(shè)置轉(zhuǎn)速時才能離開。，各離心管加入3mL 3mol/L硫酸，混勻，將水解液在沸水浴中加熱至少10min（使沉淀RNA充分水解）。二、實驗步驟： 用托盤天平稱2~3g干酵母于研缽中，加入20ml ，懸浮在沸水浴30min，冷卻。RNA溶于堿性溶液，加熱可使蛋白質(zhì)變性，將蛋白質(zhì)和核酸分離，同時RNA解聚。水分適宜時可復(fù)活。取干凈試管一支，加入10滴上述濾液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振搖試管，觀察有何現(xiàn)象產(chǎn)生。如濾液仍然混濁，可重新過濾直至完全透明。卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽。，鞏固對卵磷脂組成結(jié)構(gòu)的認識。離心分離8min（8000r/min）或15min（2000r/min），棄去上清液，得到酪蛋白粗制品；（洗滌時將沉淀顆粒用干凈吸管吹開或用毛細管的封閉一端攪開，充分洗滌），離心5min（12000r/min）或10min（3000r/min），棄去上清液；%的乙醇，攪拌片刻；，烘干，得酪蛋白精制品；（g）。用乙醇洗滌沉淀物，除去脂質(zhì)雜質(zhì)后便可得到純的酪蛋白。教學重點與難點重點：從牛奶中制取酪蛋白的原理難點：加乙醇和水的目的實驗材料鮮牛奶、恒溫水浴鍋、臺式離心機、抽濾裝置。二、實驗步驟：（1）， mL，搖勻，10 min后離心（3000r/min 5 min），取上清備用。教學過程中師生活動設(shè)計 VC作用及缺乏癥提綱、板書設(shè)計原理及簡要操作步驟作業(yè) 本實驗中為何用草酸稀釋VC，而不用純水？主要參考資料[1]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學實驗教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學出版社，2010總結(jié)分析滴定前要提醒檢查滴定管的氣密性，裝溶液后還要排氣泡，微量滴定管需正確使用；結(jié)果計算較復(fù)雜，幫助推導(dǎo)和理解《醫(yī)學生物化學實驗》教案 第 11次課 2學時實驗項目 血清膽固醇的測定實驗性質(zhì)設(shè)計性實驗 教學目的和要求教學重 點與難點重點：血清中膽固醇測定的原理難點：膽固醇測定方法實驗材料儀器：離心機、離心管、試管、刻度吸量管、722型分光光度計。因此，從滴定時2，6一二氯酚靛酚標準液的消耗量，可以計算出被檢物質(zhì)中Vc的含量。二、實驗步驟：試劑測定管（1）測定對照管（2）標準管（3）標準對照管（4）ALT底物（mL）37度保溫5min（預(yù)熱，可略）血清（mL）丙酮酸標液（200ug/ml)磷酸buffer（mL）混勻，37度保溫30min2,4二硝基苯肼（mL）混勻，37度保溫20minALT底物（mL）（mL）▲以dH2O為空白對照測四管的A值▲公式：教學過程中師生活動設(shè)計 什么是酶的比活力？提綱、板書設(shè)計原理及簡要操作步驟作業(yè) 混浴各管后，為何要在10min后，30min內(nèi)測其吸光值？主要參考資料[1] 《生物化學實驗》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 原理講解要結(jié)合血清ALT活性測定在醫(yī)學檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用； 整個實驗過程中加樣和操作過程需規(guī)范，否則數(shù)據(jù)差距較大； 幫助學生推導(dǎo)酶活性的計算公式《醫(yī)學生物化學實驗》教案 第 10次課 2學時實驗項目 維生素C含量測定實驗性質(zhì)基礎(chǔ)性實驗 教學目的和要求學習測定VC含量的原理和方法掌握微量滴定管使用方法教學重 點與難點重點：滴定操作難點：計算方法實驗材料①試劑：辣椒勻漿（樣品VC）、標準VC，2，6二氯酚靛酚溶液。通過測定其在520nm波長處的光吸收來了解丙酮酸的生成量，借此測定血清ALT的活力，故該類方法又稱比色測定法。難點：血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測定的方法。三、分析結(jié)果▲：實驗采用小牛血清故出現(xiàn)三條色帶：清蛋白；α1球蛋白；α2球蛋白，且清蛋白顏色最深。蓋嚴電泳室，檢查一下電泳槽和穩(wěn)壓電源是否已經(jīng)連接好。將蓋玻片在膜條一端2~3cm處輕輕地垂直落下并隨即提起，這樣即在膜條上點上了細條狀的血清樣品，每張膜點一個樣。 ：事先用點樣器在濾紙上點幾個樣，熟悉一下點樣器的用法。染色后可顯示5條區(qū)帶。該膜