【正文】 /L教學(xué)過(guò)程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì)思考人體內(nèi)膽固醇的生理作用及正常含量提綱、板書(shū)設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè) 主要參考資料[1]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學(xué)出版社，2010總結(jié)分析重點(diǎn)講解血清膽固醇的測(cè)定原理；再次復(fù)習(xí)分光光度計(jì)使用要熟練《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 12次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 牛奶中提取酪蛋白實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求。酪蛋白是含磷蛋白質(zhì)的混合物，~，不溶于水、醇、有機(jī)溶劑。觀察牛奶開(kāi)始有絮狀沉淀出現(xiàn)后，保溫一定時(shí)間使沉淀完全。教學(xué)過(guò)程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) 牛奶中蛋白質(zhì)成份，牛奶的營(yíng)養(yǎng)提綱、板書(shū)設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè)設(shè)計(jì)另一種方法提取蛋白的方法。卵磷脂和腦磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性質(zhì)可將其與中性脂肪分離開(kāi)；此外，卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂不溶，利用此性質(zhì)又可將卵磷脂和腦磷脂分離。這樣通過(guò)對(duì)分解產(chǎn)物的檢驗(yàn)可以對(duì)卵磷脂進(jìn)行鑒定▲。▲取干燥試管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氫氧化鈉溶液，放入水浴中加熱15min，在管口放一片紅色石蕊試紙，觀察顏色有無(wú)變化，并嗅其氣味?！「蓛粼嚬芤恢В?硫酸氫鉀，用試管夾夾住并先在小火上略微加熱，使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔，然后再集中加熱，待有水蒸氣放出時(shí)，嗅有何氣味產(chǎn)生。菌體容易收集，RNA也易分離。在酵母的堿性提取液上清中加入酸性乙醇溶液使解聚的核糖核酸沉淀，利用離心技術(shù)收集RNA粗提物。，混勻?！?，（大約4滴），混勻，用試管夾夾好后放到沸水浴中5~10min，注意觀察溶液是否變成綠色，說(shuō)明核糖的存在。掌握根據(jù)物質(zhì)性質(zhì)設(shè)計(jì)分離方法教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：離心機(jī)的使用及DNA分離難點(diǎn)：DNA的組分和鑒定方法實(shí)驗(yàn)材料試劑：新鮮菜花、95%乙醇、丙酮、5%高氯酸溶液、10%氯化鈉溶液、石英砂。 打開(kāi)研磨桿上蓋，用移液器取研磨液 2ml，轉(zhuǎn)至試管中，緩慢沿試管閉加入4ml冰無(wú)水乙醇，輕輕轉(zhuǎn)試管，可看到白色絮狀物出現(xiàn)，即提取出的纏繞在一起的DNA。 c)二苯胺水浴鑒定▲：兩只試管中各加1ml二苯胺試劑，在沸水浴中加熱10min，觀察顏色變化。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理：利用沉淀法分離蛋白質(zhì)▲利用電泳法鑒定其組分▲利用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度▲二、實(shí)驗(yàn)步驟：自行設(shè)計(jì)教學(xué)過(guò)程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)完畢后各小組結(jié)果比較提綱、板書(shū)設(shè)計(jì)每個(gè)小組寫(xiě)出簡(jiǎn)要實(shí)驗(yàn)方案作業(yè) 比較各組實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分析自己的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)缺點(diǎn)主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 讓學(xué)生了解不同分離測(cè)定方法； 考察學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和操作能力 。教學(xué)過(guò)程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) DNA的種類(lèi)及組成成分提綱、板書(shū)設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè)本實(shí)驗(yàn)中為何用高氯酸溶液？主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 實(shí)驗(yàn)原理要讓學(xué)生知道每一步的作用和方法； 鑒定的過(guò)程要與RNA鑒定做對(duì)比《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 16 次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 卵清蛋白分離及濃度測(cè)定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求能自行設(shè)計(jì)卵清蛋白分離及組分鑒定方法能較準(zhǔn)確測(cè)得蛋白質(zhì)濃度教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：分離鑒定方法，濃度測(cè)定方法難點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)材料試劑：考馬斯亮藍(lán)溶液、卵清、乙醇、漂洗液。b)設(shè)置對(duì)照組：另外一試管中加1ml 2 mol/L的Nacl溶液作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理★：，DNA含量豐富，并且材料無(wú)色，便于鑒定；，釋放出DNA；，而細(xì)胞中某些物質(zhì)溶于酒精，可以用酒精提取含雜質(zhì)較少的DNA；，和二苯胺試劑沸水浴條件下作用呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺可作為鑒定DNA的試劑。注意事項(xiàng)：離心一定要平衡對(duì)稱(chēng)放入離心機(jī)中，離心機(jī)達(dá)到設(shè)置轉(zhuǎn)速時(shí)才能離開(kāi)。，各離心管加入3mL 3mol/L硫酸，混勻，將水解液在沸水浴中加熱至少10min（使沉淀RNA充分水解）。二、實(shí)驗(yàn)步驟： 用托盤(pán)天平稱(chēng)2~3g干酵母于研缽中，加入20ml ，懸浮在沸水浴30min，冷卻。RNA溶于堿性溶液，加熱可使蛋白質(zhì)變性，將蛋白質(zhì)和核酸分離，同時(shí)RNA解聚。水分適宜時(shí)可復(fù)活。取干凈試管一支，加入10滴上述濾液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振搖試管，觀察有何現(xiàn)象產(chǎn)生。如濾液仍然混濁，可重新過(guò)濾直至完全透明。卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽。，鞏固對(duì)卵磷脂組成結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí)。離心分離8min（8000r/min）或15min（2000r/min），棄去上清液，得到酪蛋白粗制品；（洗滌時(shí)將沉淀顆粒用干凈吸管吹開(kāi)或用毛細(xì)管的封閉一端攪開(kāi)，充分洗滌），離心5min（12000r/min）或10min（3000r/min），棄去上清液；%的乙醇，攪拌片刻；，烘干，得酪蛋白精制品；（g）。用乙醇洗滌沉淀物，除去脂質(zhì)雜質(zhì)后便可得到純的酪蛋白。教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：從牛奶中制取酪蛋白的原理難點(diǎn)：加乙醇和水的目的實(shí)驗(yàn)材料鮮牛奶、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、抽濾裝置。二、實(shí)驗(yàn)步驟：（1）， mL，搖勻，10 min后離心（3000r/min 5 min），取上清備用。教學(xué)過(guò)程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) VC作用及缺乏癥提綱、板書(shū)設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè) 本實(shí)驗(yàn)中為何用草酸稀釋VC，而不用純水？主要參考資料[1]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學(xué)出版社，2010總結(jié)分析滴定前要提醒檢查滴定管的氣密性，裝溶液后還要排氣泡，微量滴定管需正確使用；結(jié)果計(jì)算較復(fù)雜，幫助推導(dǎo)和理解《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 11次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 血清膽固醇的測(cè)定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求教學(xué)重 點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：血清中膽固醇測(cè)定的原理難點(diǎn)：膽固醇測(cè)定方法實(shí)驗(yàn)材料儀器：離心機(jī)、離心管、試管、刻度吸量管、722型分光光度計(jì)。因此，從滴定時(shí)2，6一二氯酚靛酚標(biāo)準(zhǔn)液的消耗量，可以計(jì)算出被檢物質(zhì)中Vc的含量。二、實(shí)驗(yàn)步驟：試劑測(cè)定管（1）測(cè)定對(duì)照管（2）標(biāo)準(zhǔn)管（3）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照管（4）ALT底物（mL）37度保溫5min（預(yù)熱，可略）血清（mL）丙酮酸標(biāo)液（200ug/ml)磷酸buffer（mL）混勻，37度保溫30min2,4二硝基苯肼（mL）混勻，37度保溫20minALT底物（mL）（mL）▲以dH2O為空白對(duì)照測(cè)四管的A值▲公式：教學(xué)過(guò)程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) 什么是酶的比活力？提綱、板書(shū)設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè) 混浴各管后，為何要在10min后，30min內(nèi)測(cè)其吸光值？主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 原理講解要結(jié)合血清ALT活性測(cè)定在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用； 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加樣和操作過(guò)程需規(guī)范，否則數(shù)據(jù)差距較大； 幫助學(xué)生推導(dǎo)酶活性的計(jì)算公式《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 10次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 維生素C含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求學(xué)習(xí)測(cè)定VC含量的原理和方法掌握微量滴定管使用方法教學(xué)重 點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：滴定操作難點(diǎn)：計(jì)算方法實(shí)驗(yàn)材料①試劑：辣椒勻漿（樣品VC）、標(biāo)準(zhǔn)VC，2，6二氯酚靛酚溶液。通過(guò)測(cè)定其在520nm波長(zhǎng)處的光吸收來(lái)了解丙酮酸的生成量，借此測(cè)定血清ALT的活力，故該類(lèi)方法又稱(chēng)比色測(cè)定法。難點(diǎn)：血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定的方法。三、分析結(jié)果▲：實(shí)驗(yàn)采用小牛血清故出現(xiàn)三條色帶：清蛋白；α1球蛋白；α2球蛋白，且清蛋白顏色最深。蓋嚴(yán)電泳室，檢查一下電泳槽和穩(wěn)壓電源是否已經(jīng)連接好。將蓋玻片在膜條一端2~3cm處輕輕地垂直落下并隨即提起，這樣即在膜條上點(diǎn)上了細(xì)條狀的血清樣品，每張膜點(diǎn)一個(gè)樣。 ：事先用點(diǎn)樣器在濾紙上點(diǎn)幾個(gè)樣，熟悉一下點(diǎn)樣器的用法。染色后可顯示5條區(qū)帶。該膜