【正文】
復(fù)制子、復(fù)制眼、復(fù)制叉的概念 ? 線狀 DNA分子復(fù)制時(shí)末端問題的解決 ? DNA通過半保留半不連續(xù)方式合成 ? 細(xì)菌和真核生物都有一種以上的 DNA聚合酶。終止后,加倍的染色體必須分開。在 DNA合成之前,母鏈必須分開,并(短暫地)保持單鏈狀態(tài),然后在復(fù)制叉處起始子鏈的合成; ? 延伸 (elongation):由另一個(gè)蛋白質(zhì)復(fù)合體完成。 (103→10 81010) 細(xì)菌的 DNA聚合酶仔細(xì)檢查延長鏈末端的堿基對,如果是錯(cuò)誤的會予以切除。 [15N] [15N14N] [14N] [15N14N] [15N14N] DNA的合成是半不連續(xù)的 ( semidiscontinuous replication) ? DNA 復(fù)制在合成先導(dǎo)鏈( leading strand) 時(shí)是連續(xù)的;而在合成后隨鏈 (lagging strand)時(shí)是先形成小片段( Okazaki fragment ) ,隨后再將它們連接而成大片段。這樣新形成的兩個(gè) DNA分子與親代 DNA分子的堿基順序完全一樣。 Replication machinery replication Positive supercoil Break DNA Topoisomerase II pass DNA through the break negative supercoil 單鏈結(jié)合蛋白( singlestrand binding protein):單鏈 DNA結(jié)合,阻止其再形成雙鏈體狀態(tài) φX174 噬菌體的 DNA在三種功能蛋白先后作用下分開成為單鏈: 在復(fù)制起始點(diǎn), 噬菌體 A蛋白 使病毒( +)鏈產(chǎn)生缺口。 原核拓?fù)錁?gòu)酶 Ⅰ 作用機(jī)制: ①酶與 DNA結(jié)合使雙鏈解旋; ②使一條鏈切開,但酶與切口的兩端結(jié)合阻止了螺旋的旋轉(zhuǎn); ③酶使另一條鏈經(jīng)過缺口,然后再將兩斷端連接起來; ④酶從 DNA上脫落,兩條鏈復(fù)原,得到的 DNA比原來少一個(gè)負(fù)超螺旋。 The mon anization of DNA polymerases has a palm that contains the catalytic site, fingers that position the template, a thumb that binds DNA and is important in processivity, an exonuclease domain with its own active site, and an Nterminal domain. 5 原核生物 DNA復(fù)制的基本過程 DNA復(fù)制的起始 DNA合成鏈的延伸 DNA復(fù)制的終止 單鏈 DNA的產(chǎn)生 3`OH引發(fā)末端的產(chǎn)生 復(fù)制復(fù)合體的形成 DNA復(fù)制的起始 單鏈 DNA的產(chǎn)生 解旋酶 (helicase): 使 DNA的兩條鏈分開,它通常利用 ATP水解來提供必需的能量; 拓?fù)洚悩?gòu)酶 ( DNA Topisomerase ) ? 拓?fù)洚悩?gòu)酶的種類分為 Ⅰ 型和 Ⅱ 型。 真核生物染色體可能采用這種方式,在這種情況下, DNA末端的短重復(fù)序列的拷貝數(shù)改變(如端粒的復(fù)制);