【正文】 ..... 7 拮抗 物質(zhì)的 分泌 和 積累 ..................................... 8 基因工程技術(shù) 的應(yīng)用 ....................................... 8 本課題研究目的 ................................................. 8 應(yīng)用前景和學(xué)術(shù)價值 ............................................. 9 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 ..... 10 前言 .......................................................... 10 實驗材料和方法 ................................................ 10 主要儀器 ................................................ 10 拮抗菌及其培養(yǎng) .......................................... 11 病原菌培養(yǎng)和孢子懸浮液的制備 ............................ 11 試劑 .................................................... 11 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 目錄 2 果實選擇與預(yù)處理 ........................................ 12 幾丁質(zhì)對 R. paludigenum 生防效果的影響 .................... 12 數(shù)據(jù)處理分析與作圖 ...................................... 13 結(jié)果 .......................................................... 13 不同濃度幾丁質(zhì)對 R. paludigenum 生防效力的影響 ............ 13 幾丁質(zhì)誘導(dǎo)后不同濃度 R. paludigenum 酵母的生防效果 ........ 15 不同培養(yǎng)時間對幾丁質(zhì)誘導(dǎo)下 R. paludigenum 生防效力的影響 .. 17 幾丁質(zhì)與 NaCl結(jié)合誘導(dǎo)對 R. paludigenum 生防效力的影響 ..... 18 討論 .......................................................... 20 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制機理研究 ..... 22 前言 .......................................................... 22 實驗材料和方法 ................................................ 22 主要儀器 ................................................ 22 拮抗菌及其培養(yǎng) .......................................... 23 病原菌培養(yǎng)和孢子懸浮液的制備 ............................ 23 果實選擇與預(yù)處理 ........................................ 23 幾丁質(zhì)對 R. paludigenum 生防機理的影響 .................... 23 數(shù)據(jù)處理分析與作圖 ...................................... 24 結(jié)果 .......................................................... 24 幾丁質(zhì)對 R. paludigenum 在果實傷口處生長動態(tài)的影響 ........ 24 幾丁質(zhì)處理后 R. paludigenum 對果實誘導(dǎo)抗性的影響 .......... 26 幾丁質(zhì)處理后 R. paludigenum 發(fā)酵上清液的抑菌效果 .......... 27 幾丁質(zhì)培養(yǎng)后 R. paludigenum 對果實 POD 酶活性的影響 ....... 27 討論 .......................................................... 28 第四章 結(jié)果 與 展望 ........................................... 30 本論文的主要研究結(jié)果 .......................................... 30 本實驗的后續(xù)研究及展望 ........................................ 30 致謝 ...................................................... 32 參考文獻 ................................................... 33 附 錄 ...................................................... 37 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第一章 文獻綜述 1 第一章 文獻綜述 我國水果產(chǎn)業(yè)發(fā)展概述 水果是維生素、礦物質(zhì)和膳 食纖維的重要來源，是人們維持身體健康，增進營養(yǎng)必不可少的主要食品 ， 是世界上僅次于糧食的 農(nóng)產(chǎn)品 。 Tallman isolated by our laboratory Colleague in marine yeast (Identified by CABI Bioscience Identification Services as Rhodosporidium paludigenum Fell amp。 （ 5）果實誘導(dǎo)抗性試驗結(jié)果表明， R. paludigenum 能激發(fā)蘋果果實對青霉病害的抗性，而經(jīng) NYCB 誘導(dǎo) 培養(yǎng)的酵母能進一步增強這種對果實抗性的誘導(dǎo)作用。此外，試驗結(jié)果表明，幾丁質(zhì)誘導(dǎo)培養(yǎng)與 NaCl誘導(dǎo)培養(yǎng)之間并不存在協(xié)同增效作用。 Tallman（經(jīng) 英國國際微生物所菌種保存和鑒定中心 CABI Bioscience Identification Services 鑒定為 Rhodosporidium paludigenum Fell amp。本人授權(quán) 大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已 經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。盡我所知，除文中特別加以標注和致謝的地方外，不包含其他人或組織已經(jīng)發(fā)表或公布過的研究成果，也不包含我為獲得 及其它教育機構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過的材料。對本研究提供過幫助和做出過貢獻的個人或集體，均已在文中作了明確的說明并表示了謝意。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。 涉密論文按學(xué)校 規(guī)定處理。 Tallman）以提高其采后果實 病害 生物防治 效果 。 （ 3）機理實驗結(jié)果表明，幾丁質(zhì)誘導(dǎo)培養(yǎng)后， R. paludigenum 在蘋果、梨果實傷口處的生長速度顯著提高，菌體數(shù)量顯著增加。其機理可能與激發(fā)蘋果果實傷口處組織的 POD 酶 活性有關(guān)。 Tallman) to enhance the effectiveness of its biological control of postharvest decays of fruits. (1) In vivo test results showed that R. paludigenum induced by chitin can increase its biological control of postharvest diseases (BCPD) effect significantly. (2) The optimal concentration for induction was % (w/v), the optimal time for induction was 36~48 hours. There was no collaborative effect between chitin and NaCl on the BCPD of R. paludigenum. (3) Data showed population and growth speed of R. paludigenum in wounds of apple and pear increased significantly. (4) Data showed that R. paludigenum cultured in medium with chitin had inhibitory effect to the decay of pears caused by Penicillium expansum， R. paludigenum cultured in NYDB has no inhibitory, but a promoting effect. (5) Through the induction of fruit resistance and associated biological control results showing that R. paludigenum could stimulate the resistance of fruits against the external infection. Meanwhile, chitin could improve their ability to inhibit the decay incidence and fruit resistance. The ability to stimulate fruit’s POD activity may be related. In conclusion, R. paludigenum induced by chitin could increase its BCPD effect. The promoting of R. paludigenum’s growth in fruit wounds, secreting of antimicrobial substances and induced resistance of fruit after being induced may be the mechanism. Key words: R. paludigenum。中國是世界水果生產(chǎn)大國，總收獲面積和產(chǎn)量以及多種水果的產(chǎn)量均居世界首位。 根據(jù)聯(lián)合國糧食組織對 50 多個國家的調(diào)查，發(fā)展中國家水果收獲后的平均損失率在 30%以上。 導(dǎo)致果實采后損失的因素很多，主要包括： (1)由于采前栽培管理、采收和采后處理技術(shù)不當(dāng)而造成的損失； (2)由于果實采后水分和營養(yǎng)消耗造成的失重和枯萎等品質(zhì)劣變而引起的損失； (3)由于采后逆境造成的果實生理代謝失調(diào)而引起的損失； (4)由于采后成熟衰老造成果實組織結(jié)構(gòu)崩潰而引起的損失； （ 5） 由于病原物侵染造成的腐爛損失等。病原真菌不僅會造成果實數(shù)量上的巨大損失，而且許多病原真菌分泌產(chǎn)生的大量次生代謝產(chǎn)物還可能會引起嚴重的食品安全問題，如曲霉菌（主要是 Aspergillums flavus和 Aspergillums parasiticus等）產(chǎn)生的黃曲霉毒素、擴展青 霉（ Penicillium expansum）產(chǎn)生的棒曲霉素（ patulin）等（ Martins et al., 20xx； Sholberg 和Conway, 20xx； DombrinkKurtzman 和 Blackburn, 20xx； Brodhagen 和 Keller，20xx； Morales et al., 20xx）。病原菌孢子一旦接觸傷口組織，侵染就開始了（ Janisiewicz和 Korsten, 20xx； Prusky 和 Lichter, 20xx）。nchezTorres和 Gonz225。lezCandelas, 1996； Akimitsu et al., 20xx）。 病原菌破壞植物自身防御機制 植物在遭到病原菌侵染時，通過體內(nèi)木質(zhì)素和羥脯氨酸糖的沉積，植物抗菌素的積累，蛋白質(zhì)酶抑制劑和溶菌酶的合成來增強細胞壁的保衛(wèi)反應(yīng)。lezCandelas, 20xx）。根據(jù)國內(nèi)外的研究報道，控制采后病害非殺菌劑的方法主要可分為生物學(xué)方法、物理方法和化學(xué)方法 3 大類。 有許多研究報道，化學(xué)殺菌劑具有一定的毒副作用。 因此，找到一種新的安全