【正文】 分離主要有以下幾種常用方法 。 分離培養(yǎng)藻種 ， 可分為兩大類 ， 一為單種培養(yǎng) ， 即藻類雖只有一種 ， 但還混雜細(xì)菌 。 4H2O） 178mg 檸檬酸鐵 （ FeC6H5O7 4． f/2培養(yǎng)液 硝酸鈉 （ NaNo3） 75 mg 磷酸二氫鈉 （ NaH2PO4） mg f/2微量元素溶液 1mL f/2維生素溶液 1mL 海水 1000mL 本配方時應(yīng)與目前生產(chǎn)上使用的各種偽造的培養(yǎng)，但用于硅藻培養(yǎng)時，應(yīng)再加 50mgNa2SiO3。 2． 浮游硅藻培養(yǎng)液 水生硅 1（ mg/l） 硝酸氨 120 硫酸鎂 70 磷酸氫二鉀 40 磷酸二氫鉀 80 氯化鈣 20 氯化鈉 10 硅酸鈉 100 檸檬酸鐵 5 土壤浸出液 20 硫酸錳 2 水 1000mL pH 水生硅 2（ mg/l） 尿素 150 氯化鉀 30 過磷酸鈣 50 硅酸鈣 100 硫酸鎂 50 碳酸氫鈉 3 硫酸錳 3 土壤浸出液 4mL EDTA－ 鐵 1mL 水 1000mL 水生硅 2號是用化肥尿素過磷酸鈣為氮磷來源，適于大量培養(yǎng)硅藻時選用，生長適溫為 20～ 30℃ ；光強(qiáng)為 2,000～ 5,000米燭光。 7H2O NaHCO3 KCL FeCL3（ 1％ ） 土壤浸出液 水 1000mL 水生 6號 NH2CONH2 H2PO4 MgSO4 維生素：許多藻類要求有硫胺素和維生素 B12的供應(yīng)。 e． pH： 通常用偏酸的 pH值來避免鈣鎂和其它微量元素發(fā)生沉淀 。 大多數(shù)微型藻干物中含有 7～ 9％ 的氮 。 發(fā)展藻類培養(yǎng)的營養(yǎng)配方時的主要考慮的問題是： a． 鹽的總濃度：大多是取決于有機(jī)體的生態(tài)來源 。這種培養(yǎng)方式，利用管道，依靠動力，使培養(yǎng)液流動和通入含二氧化碳的空氣。 ⑵ 開放非循環(huán)培養(yǎng)：其特點(diǎn)是培養(yǎng)液不循環(huán)流動 ， 而定時由小管通入 CO2和空氣到培養(yǎng)液中；同時也起攪拌作用 。 方法設(shè)備較簡便 ， 可進(jìn)行小量或大面積的培養(yǎng) 。 將培養(yǎng)液密封在與外界完全隔離的透明容器中 ， 由此通氣 、攪拌 、 輸送培養(yǎng)液及調(diào)節(jié)水溫和取樣等設(shè)備 ， 也都要與外界隔離 。 先僅就藻類 、 主要是單細(xì)胞藻類的一般培養(yǎng)方法及有關(guān)理論加以簡述 。 目前 ， 有關(guān)海水藻類的培養(yǎng)較多 ， 我國在海水養(yǎng) 殖方面 ， 已大規(guī)模展開了某些浮游植物的培養(yǎng) ， 如扁藻 （ Platymonas spp） 、 中肋骨條藻 （ Skeletonema costatum） 、 三 角 褐 指 藻 （ Phaeodactylum tricornutum） 、 鹽藻 （Dunaliella spp.） 、 新月菱形藻 （ Nitzschia clostertum） 、 牟氏角毛藻 （Chaetoceros muelleri） 及球等鞭金藻 （ Isochrysis galbana） 等 ， 已解決貝類人工養(yǎng)殖的早期幼體餌料問題 。 自上世紀(jì)四十年代以來 ， 各國學(xué)者都試圖用藻類這一資源解決人類食物和動物餌料的缺乏問題 。 另一方面 ， 藻類可直接或間接的作為魚類及其他水生動物的餌料 ， 因此 ， 藻類培養(yǎng)對水產(chǎn)養(yǎng)殖具有更大意義 。 在淡水養(yǎng)殖方面 ， 我國只進(jìn)行了螺旋藻 、 魚腥藻 、 小球藻 、 柵列藻等的培養(yǎng) 。 藻類的生長模式 單細(xì)胞藻類在培養(yǎng)過程中，生長繁殖的速度，出現(xiàn)一定的起伏，這種生長模式可劃分為六個時期 藻類的培養(yǎng)方式 藻類的培養(yǎng)方式 ， 以藻類培養(yǎng)的目的要求而各種各樣 。 培養(yǎng)容器多為管狀 、 也有池狀 ， 用有機(jī)玻璃或透明的聚乙烯所料做成水平管道 ， 直立或斜立在地上 ， 暴露陽光或人工光照下 。 該法培養(yǎng)物中易發(fā)生敵害生物污染 ， 但成本低 ， 使用較普遍 ， 也是今后藻類培養(yǎng)所應(yīng)采取的方式 。 此法在大面積培養(yǎng)中使用較普遍 。該方式設(shè)備復(fù)雜，但效果較好。 b． 主要離子組分的組成及濃度：他們是鉀 、 鎂 、 鈉 、 鈣 、 硫酸鹽和磷酸鹽 。 因此在 1升培養(yǎng)液中生產(chǎn) 10g細(xì)胞就至少需要 500～600mgL1KNO3。 f． 微量元素：培養(yǎng)基中的微量元素通常是用早已證明有效濃度的混合溶液來提供的 （ 濃度在 μ gl1級范圍 ） 。 以下是幾種很有用的培養(yǎng)液配方 1． 單細(xì)胞綠藻 （ 柵列藻 ） 培養(yǎng)液 水生 4號 （ NH4） 2SO4 Ca(H2PO4)2 7H2O NaHCO3 KCL FeSO4（ 1％ 水溶液 ） Cacl2 土壤浸出液 水 1000mL 水生四號培養(yǎng)液中 ， 藻類呈深綠色 ， 生長繁殖速率較低 。 3． 朱氏 10號培養(yǎng)液：適用于培養(yǎng)硅藻 、 藍(lán)綠藻等 。 附 I： f/2微量元素溶液配方： 硫酸鋅 （ ZnSO4 5H2O） 鉬酸鈉 （ NaMoO4 另一為純培養(yǎng) ， 即不僅藻類只有一種 ， 亦無其它任何生物 。 1． 離心法：將混合液用離心機(jī)離心 ， 水中不同藻體及細(xì)菌就以不同的速度下沉 ， 因此得以分開 。 但此法不能做到使不同藻類完全分離 。 以后依次同樣滴入第 3～ 5管 ， 并都充分均勻稀釋 。 用消過毒的白金絲取些藻群 ， 進(jìn)行瓊膠固體培養(yǎng)基的不通氣培養(yǎng) 。 將要分離的藻體吸出 ， 用蒸餾水或平衡礦物質(zhì)溶液沖洗數(shù)次 ， 然后主導(dǎo)成有培養(yǎng)基的小培養(yǎng)皿中培養(yǎng) ， 待生長旺盛后 ， 再擴(kuò)大培養(yǎng) 。 分離效果較好 ， 只是不能應(yīng)用于不運(yùn)動的藻體 。 再經(jīng)鏡檢 ， 反復(fù)此法不斷提純 ， 即可分離出較純的藻種 。 應(yīng)該研究在室外培養(yǎng)其他藻種的可能性和他們生產(chǎn)的潛力 ， 所選擇的生物種應(yīng)具有下列特征： ⑴ 生長迅速； ⑵ 對極端的溫度和輻射條件的耐性范圍大； ⑶ 蛋白質(zhì) ， 脂類和糖類含量高 ， 或有選擇地積累一種特殊的代謝產(chǎn)物 （ 如甘油 ） ； ⑷ 無毒性 ， 且易于收獲 。前者是將藻液直接加入培養(yǎng)液中進(jìn)行攪拌，加入的藻種分量視水溫而定，水溫較低（ 10℃ 以內(nèi)）時，多加；約占培養(yǎng)液總量的 30～ 40％左右，水溫適宜時（ 25～ 30℃ 左右），可加 5～ 8％左右。 給以適當(dāng)?shù)墓庹蘸蜏囟?。 大多數(shù)藻類保存在室溫下 （ 15～ 20℃ ） 即可 ， 少數(shù)造中存活需較高溫度 。 在培養(yǎng)過程中 ， 補(bǔ)給的養(yǎng)料 ， 要選擇肥效速 ， 并有持久性 ， 來源較廣 ， 價格低廉的種類 。 溫度調(diào)節(jié)一般采用室內(nèi)用白熾燈照射培養(yǎng)物或用溫室、 安裝電熱管等升溫 ， 室外冬季升溫較困難 ， 主要采用玻璃棚；用冷水管道降溫 ， 或經(jīng)通風(fēng)遮陽降溫 。 攪拌的方法一般為人力攪拌 、 風(fēng)力攪拌 、空氣攪拌和磁力攪拌 。當(dāng)有浮游動物污染時，可施用化學(xué)試劑、殺蟲劑等殺滅，如硫酸銅 1～2ppm可殺滅輪蟲、纖毛蟲；漂白粉 4ppm對各種蟲類均有效；食鹽 9‰ ，可殺滅輪蟲；碘液 5‰ ，再稀釋到十萬分之一，可殺滅纖毛蟲。 主要工具是離心機(jī) 。 低溫使藻類也有下沉現(xiàn)象 2． 化學(xué)濃縮法： 用沉淀劑如明礬 、 石灰等 ， 使培養(yǎng)物下沉 ， 而得到濃縮物 。 此外，較大體積的種類，如絲狀體、非浮游性的藻類等可用過濾法采收。 此外 ， 也可以采用血球計(jì)數(shù)法 。 3． 干重測定 測定干重的增加量是生產(chǎn)估測方法中的一個最直接的方法 ， 其步驟如下： ⑴ 取樣 — 從藻體培養(yǎng)液中取出有代表性的一小部分體積的藻液 。 ⑶ 干燥 — 選擇對特定有機(jī)體最適的烘干溫度 。 表 51 一些已大量培養(yǎng)利用藻類的生態(tài)適應(yīng)性 浮游動物集約化培養(yǎng)簡介 浮游動物主要包括原生動物 、 輪蟲 、 鰓足類 、 橈足類 、 糠蝦和浮游幼蟲等 。 一 、 浮游動物培養(yǎng)所需要的一般條件 對培養(yǎng)浮游動物影響較大的因素有飼養(yǎng)用水的水質(zhì) 、 水溫 、 鹽度 、 pH、含氧量 、 光照條件 、 餌料的種類和數(shù)量 、 容器的大小等 ， 現(xiàn)分述如下： ㈠ 培養(yǎng)用水：培養(yǎng)用水可用海水 、 湖泊或池沼里的水 ， 或者保存 2～ 3周的住家井水或自來水 。 因此 ， 如果在 10～ 12℃ 以下培養(yǎng) ， 并且注意水的交換 ， 可不添加抗生素 。 對飼養(yǎng)用水的鹽度問題研究較少 ， 怎樣影響浮游動物尚無充分了解 。 ㈣ 光照：飼養(yǎng)浮游動物的光照條將俄中各樣 ， 其效果無明顯差異 ， 但必須避免直射日光 。 ④ 酵母 、 小麥粉 、 大豆粉 、 醬油粕 、 海藻粉末以及相應(yīng)配方的配合餌料等人工餌料 。 將上述培養(yǎng)液放在 15～ 18℃ 處 ， 過 3～ 4d， 用細(xì)篩絹過濾；然后用過濾池水適當(dāng)沖稀 （ 1:2～ 4） ， 便可使用 。 這種單細(xì)胞培養(yǎng)液配制如下： 每立方米水中放硝酸銨 ～ 35g； 過磷酸鹽 ～ 為確保藻類的不斷繁殖 ， 需經(jīng)常追加這兩種無機(jī)鹽類 。溞的顏色應(yīng)為淡黃色，略帶紅色或淡綠色；腸道應(yīng)為綠色或深褐色；卵應(yīng)為圓形、暗色，數(shù)量在 10～ 20個以上。用小球藻或微綠球藻加酵母投喂。 三 、 輪蟲的培養(yǎng)方法 目前，用于水產(chǎn)動物育苗生產(chǎn)上室內(nèi)工廠化培養(yǎng)的輪蟲主要是褶皺臂尾輪蟲輪蟲，可以用培養(yǎng)的小球藻、扁藻、衣藻等為餌料培養(yǎng)。 (一 ) 輪蟲種的分離與保種 目前使用的種輪蟲最初都是從天然水體中分離出來的 ， 這些輪蟲品系一般都經(jīng)過長期研究和實(shí)際使用證明具有優(yōu)良的品質(zhì) ， 因而生產(chǎn)所用的種輪蟲一般不需自己分離 ， 可從有關(guān) 科研 、 教學(xué)單位獲得 。在秋冬季冬卵往往大量出現(xiàn)于輪蟲培養(yǎng)池，從池底的沉淀物中可收集到大量的輪蟲卵。 在這種培養(yǎng)方式下 ， 培養(yǎng)條件一般能得到較好的控制 ， 輪蟲的生產(chǎn)比較穩(wěn)定 。 這些容器在位用前都需要用有效氯或高錳酸鉀進(jìn)行化學(xué)消毒 ， 小型培養(yǎng)容器也可進(jìn)行高溫消毒 。 （ 3） 餌料 輪蟲培養(yǎng)常用的餌料主要是微藻和酵母 。 一般直接向密度為 500一 700萬個／ mL的微綠球藻 、 200一 250萬個／ mL的纖細(xì)角刺藻 、 200一 250萬個／ mL的球等鞭金簇中接種輪蟲是沒有問題的 。所用的面包酵母一般是從酵母廠或食品廠購得，一般用鮮酵母，也可用干酵母。 d，分 2— 4次投喂。 日常管理中要經(jīng)常檢查充氣系統(tǒng) ， 及時糾正過大或過小的充氣 。 當(dāng)用面包酵母培養(yǎng)輪蟲時 ， 殘餌會敗壞水質(zhì) ， 必須進(jìn)行換水 。為減少輪蟲的損失 ， 吸底時可將吸出的水和污物接入一容器 ， 沉淀后再將上層 的輪蟲濾出 ， 放回原來的培養(yǎng)池 。 輪蟲成體帶夏卵的比例和數(shù)目是判斷生良好壞的重要標(biāo)準(zhǔn)， 如果多數(shù)成體帶有夏卵 (一般 3— 4個 ， 少的 1— 2個 ， 多的 10一 15個 )， 則說明生長較好 。 (三 )輪蟲的營養(yǎng)強(qiáng)