農(nóng)產(chǎn)品分析3-2-wenkub
2023-03-20 13:53:25 本頁面
【正文】 為磺酸型 Na+柱），氨基酸與樹脂中的交換基團進行離子交換，當用不同的 PH值的緩沖溶液進行洗脫時，因交換能力不同而將氨基酸混合物分開。? 有關(guān)氨基酸的測定方法很多，近些年來氨基酸分析采用了一系列微量分析及高效率的分離方法。氨基酸的測定?必需氨基酸的種類、數(shù)量及構(gòu)成比例，越接近機必需氨基酸的種類、數(shù)量及構(gòu)成比例，越接近機體合成蛋白質(zhì)所需的各種氨基酸的量及其組成則機體體合成蛋白質(zhì)所需的各種氨基酸的量及其組成則機體對氨基酸的利用率越高。對嬰兒來說，組氨酸也是必需氨基酸 。若缺乏這些氨基酸，人與動物不僅不能發(fā)育，還會引起某些疾病，而這些氨基酸在貯存和加工過程中極易損失破壞。全氨基酸和個別氨基酸的分析測定是研究蛋白質(zhì)、酶的化學組成及性質(zhì)的重要手段。 氨基酸分析 生物學及農(nóng)業(yè)科學的許多領(lǐng)域都需要分析氨基酸，在評價谷物的蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值時需要測定游離氨基酸及蛋白質(zhì)中氨基酸的組成。動植物產(chǎn)品中的氨基酸以多種形式存在，大致可分為構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸和游離氨基酸兩種。測定它們的含量已成為衡量谷物、飼料蛋白質(zhì)的重要標準之一。對氨基酸的利用率越高。氨基酸分析方法包括測定氨基酸總含量及測定全氨基酸中每種氨基酸含量兩個方面。 例如，薄層層析、氣相色譜、液相色譜、氨基酸自動分析儀等方法。178。178。? 其中：屬于芳香族氨基酸的是： 色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸 屬于亞氨基酸： 脯氨酸 178。內(nèi)標法 :內(nèi)標法是將一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標物 ,加入到準確稱量的試樣中 ,根據(jù)被測物和內(nèi)標物的質(zhì)量及在色譜圖的峰面積或峰高的變化 ,就可以看出標準品和樣品進樣體積的差別。l 測定樣品處理 除去脂肪等雜質(zhì)后的待測樣品，可直接上柱分析。一般為每種氨基酸 右 (水解樣品干重約 )。? 流速 :。? 緩沖液的 pH與 Na+濃度 溶液的 pH值和鈉離子濃度對氨基酸的分離有很大關(guān)系，配制不當會影響峰的位置，甚至會使個別氨基酸丟失，因此應(yīng)特別精心配制。因此，除氨柱可重復連續(xù)使用。? 定量測定的依據(jù) 是氨基酸和茚三酮反應(yīng)生成 紫色化合物 。氨基酸總量 (氨態(tài)氮 )的測定178。由于這二個基的相互作用，使氨基酸成為中性的內(nèi)鹽。 。記錄兩次滴定所消耗的堿液毫升數(shù)，用下述公式計算計算：V100 V： NaOH標準溶液消耗的總量 (m1) W：樣品溶液相當樣品重量 (克 )。與單色法相同，只是在此法中使用了兩種指示劑。試劑：三種試劑同單指示劑法 ％中性紅 (50％乙醇溶液 ) 操作步驟： 取相同的兩份樣品，分別注入 100毫升三角燒瓶中，一份加入中性紅指示劑 23滴，用 NaOH溶液滴定終點 (由紅變琥珀色 )，記錄用量，另一份加入麝香草酚酞 3滴和中性甲醛 20ml，搖勻，以 藍色。 計算： 氨基酸態(tài)氮 (％ )=[ N(V2V1)]/W100式中： V2：用麝香草酚酞為指示劑時標準堿液消耗量 (毫升） V1：用中性紅作指示劑時堿液的消耗量 (m1)。注意事項：178。 國內(nèi)外應(yīng)用最廣的分析方法有 : 三硝基苯磺酸法、 2氯 3,5二硝基吡啶法、離子交換色譜法 (氨基酸自動分析儀法 ) 、 DBL法。 DBL法的原理 在較強酸性 (pH值 23)條件下 ,樣品蛋白質(zhì)中的 3種堿性氨基酸 ,即賴氨酸、組氨酸和精氨酸可與酸性橙 12染料 (AO12,一種單磺酸鹽 )分子結(jié)合 ,生成不溶性絡(luò)合物， 其染料的被結(jié)合量相當于賴氨酸、組氨酸和精氨酸的總和 ；178。O賴氨酸的 174。234。e—HN—C—CH2—CH3CH3—CH2—COOH 如果剩余染料溶液的濃度超出標準曲線范圍時稱樣量應(yīng)作適當調(diào)整。 稱樣量是保證 DBL法準確度的關(guān)鍵 ，且酰化與否的兩份樣品的稱樣量也必須是不等的， ?；瘶悠返姆Q樣量應(yīng)大約為不?；瘶悠返?，谷物飼料中，約 .216。216。216。216。色氨酸的測定 —— 乙醛酸法 色氨酸也是重要的必需氨基酸之一。它已被公認為 “ 第二限制性氨基酸 ” 。? 方法原理? 谷物中蛋白質(zhì)經(jīng) 木瓜蛋白酶 作用水解出色氨酸，然后在 濃硫酸及微量 Fe3+（可將乙酸氧化為乙醛酸）存在的情況下，2mol色氨酸能與 1m
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