高中生物專題5課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段課件新人教版選修1-wenkub
2022-11-28 23:17:53 本頁面
【正文】 PCR擴(kuò)增形成的 DNA的雙鏈解開 ， 使之成為單鏈 ，以便它與引物結(jié)合 ， 為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備 。 ② 注意不同酶的作用：解旋酶的作用是使 DNA兩條鏈的氫鍵斷開 ， 而 DNA聚合酶與 DNA連接酶都是催化形成磷酸二酯鍵的。 ③ DNA聚合酶是將單個(gè)核苷酸加到已有的單鏈片段的 3′端上 ， 需要模板 ， 而 DNA連接酶連接的是兩條 DNA片段的缺口 ， 不需要模板。 2． 模板 DNA與引物的退火 (復(fù)性 ) 模板 DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后 ， 溫度降至 55 ℃ 左右 ， 引物與模板 DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合 。 PCR擴(kuò)增過程中的易錯(cuò)點(diǎn) ① PCR過程中無解旋酶 ， 破壞氫鍵需要升高溫度才能打開氫鍵 ， 但此時(shí)的溫度還不能破壞磷酸二酯鍵 ， 因此 ， 熱變性后是 DNA單鏈 ， 并未分解成單體 。 (3)蓋嚴(yán)離心管口的蓋子 ， 用手指輕輕彈擊管壁 。 2． 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 (1)實(shí)驗(yàn)中 DNA含量的測定 。 (2)理論上 DNA擴(kuò)增數(shù)目的計(jì)算 。 檢測 DNA片段擴(kuò)增情況可以采用上述方法 ， 也可以采用電泳檢測的方法 ， 可以通過在紫外線下直接觀察 DNA帶的分布及粗細(xì)程度來評價(jià)擴(kuò)增的效果 。 答案： C ?變式訓(xùn)練 2． 在 PCR實(shí)驗(yàn)操作中 ， 下列說法不正確的是 ( ) A． 在微量離心管中添加各種
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