高中生物 專題5 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段課件 新人教版選修1-預(yù)覽頁
【正文】 之為變性；當(dāng)溫度下降到 50 ℃ 左右 (40～ 60 ℃ )時 ， 兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈 DNA結(jié)合；當(dāng)溫度上升到 72 ℃ (70～ 75 ℃ )時 ， 溶液中的四種脫氧核苷酸 (A、 T、 C、 G)在Taq DNA聚合酶的作用下 ， 根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的 DNA鏈 ， 稱為延伸 。 3． 引物的延伸 DNA模板引物結(jié)合物在 Taq DNA聚合酶的作用下 ， 以四種脫氧核苷酸為反應(yīng)原料 ， DNA母鏈為模板 ， 按堿基配對與半保留復(fù)制原理 ， 合成一條新的與模板 DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈 。 ② 復(fù)性時只是在引物和 DNA單鏈之間形成氫鍵 ， 兩條單鏈之間并未形成氫鍵 ， 因此復(fù)性后 ， 無雙鏈 DNA分子形成 。 (4)將微量離心管放在離心機(jī)上 ， 離心約 10 s。 ① 稀釋：取 2 μL PCR反應(yīng)液 ， 加入 98 μL蒸餾水 ， 即將樣品稀釋了 50倍 ② 對照調(diào)零：以蒸餾水作空白對照 ， 在波長 260 nm處 ， 將紫外分光光度計的讀數(shù)調(diào)至零 。 DNA擴(kuò)增與 DNA復(fù)制一樣 ， 呈指數(shù)擴(kuò)增 。 如果擴(kuò)增不成功 ， 則要分析失敗原因 。 答案： A 本節(jié)小結(jié) 核心歸納 1． DNA復(fù)制需要引物 ， 是因?yàn)?DNA聚合酶不能從頭開始合成 DNA， 而只能從 3′端延伸 DNA鏈 。
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